UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Área de Microbiología y Parasitología
MICROBIOLOGÍA DEL SUELO PRODUCCIÓN DE “SEMILLA” O “BLANCO” DEL HONGO LIGNOCELULOLÍTICO LIGNOCELULOLÍTICO
Agaricus blazei
Alumna Ravines Arriaga C. Alejandra
Lambayeque, octubre del 2017
Introducción Los hongos lignocelulolíticos son organismos que metabolizan la lignina, compuesto que actúa como una barrera para la degradación biológica de los residuos lignocelulósicos, provocando que se acumulen en grandes cantidades y contaminen el ambiente. La mayoría de los hongos lignocelulolíticos son basidiomicetos caracterizados por formar una estructura fructificante o basidiocarpo comestible, con alto valor nutritivo y además pueden crecer en residuos silvo –agrícolas, por lo que constituyen una buena alternativa para la producción de proteína vegetal de consumo humano (Carreño & Villanueva, 2000). El ciclo de vida de los basidiomicetos es una sucesión de etapas desde la germinación de basidiosporas por un micelio (fase vegetativa) hasta la formación de cuerpos fructificantes o basidocarpos (fase generativa). En la fase vegetativa, las esporas sexuales o basidiosporas haploides germinan y originan hifas monocarióticas (un núcleo por célula). Esta fase es corta ya que pronto dos filamentos se fusionan (somatogamia) y forman un micelio secundario dicariótico que crece mediante fíbulas. En algunos casos de hongos micorrizógenos, este micelio puede ocupar varias hectáreas, pesar muchas toneladas y tener una edad de varios milenios (Saldarriaga & Pineda). El micelio secundario puede reproducirse asexualmente a través de la fragmentación; sin embargo, lo más típico es la reproducción sexual. El micelio secundario también puede agruparse en tejidos especializados plectenquimáticos, aún dicarióticos denominados micelio terciario. En la fase generativa, cuando las condiciones de humedad son favorables, el micelio secundario origina cuerpos fructíferos, basidiocarpos, carpóforos, himenóforos o esporóforos que tienen una capa fértil himenio generadora de basidios y basidiosporas. Los basidios se disponen sobre o dentro del basidiocarpo. Entre ellos existen estructuras estériles denominadas basidiolos o cistidios, muy útiles como carácter taxonómico. Algunas de las células que forman el himenio fusionan sus dos núcleos, sufren una meiosis que origina cuatro núcleos, cada uno de ellos migra a un filamento formado en el extremo de la basidia y se rodea de una membrana, constituyendo la basidiospora Cada basidio origina basidiosporas, mayoritariamente cuatro, externas que pueden germinar directamente (originan micelio primario) o indirectamente (geman u originan esporas secundarias). El cultivo comercial de hongos comestibles comprende tres etapas principales: Preparación del sustrato o “composteo”, producción del blanco o semilla y producción de basidiocarpos. Una fase
determinante es la calidad del blanco o semilla que se utiliza para inocular el compost previamente preparado e inducir la formació n del basidiocarpo. “Blanco” es el sustrato sólido colonizado por un micelio puro y fresco que se utiliza como semilla para la producción comercial de hongos comestibles. Un laboratorio especializado en la producción de semilla o blanco de Agaricus sp. inicia el proceso a partir de tejidos del basidiocarpo, obtiene un cultivo puro de micelio en un medio nutritivo solidificado con agar, realiza varios cultivos intermedios y después transfiere algunos fragmentos de este cultivo a un medio nutritivo previamente esterilizado.
Objetivos -
Obtener “cepas madre” a partir de basidiocarpos de Agaricus blazei (Murill). Producir “blanco” o “semilla” de Agaricus blazei (Murill).
PREPARACIÓN DEL SUSTRATO DE GRANO|
Figura. 1) Para preparar el sustrato a partir de granos de trigo, procedimos a separar los gra nos en mal
estado y el resto fue lavado con agua de caño aproximadamente 5 veces. Luego, estos granos lavados fueron llevados a una olla para su cocción. 2) Una vez que estuvo listo el trigo, fue depositado en papel toalla estéril, para eliminar residuos de agua, luego se mezcló con 4,5 g de carbonato de calcio y 17,5 de yeso/ kg de trigo. Posteriormente se depositó en un f rasco de vidrio.
OBTENCIÓN DE LA CEPA MADRE |
Figura. 1) Los champiñones fueron obtenidos de un supermercado. 2) Los basidiocarpos fueron
lavados en hipoclorito de sodio y fueron enjuagados en agua destilada. Posteriormente se secaron cuidadosamente en papel toalla estéril. 3) Procedimos a cortar pequeños triángulos de basidiocarpo de aproximadamente 1 cm y se los depositó en placas Petri con agar Papa Dextrosa más cloranfenicol y se incubaron a 29 °C durante 10 días. 4) Después de la incubación se observó crecimiento de micelio en la placa con PDA. 5) Se cortó un cuadrado de micelio, de aproximadamente 1 cm y se depositó sobre un cuadrado de 5 cm de agar a vena (placa izquiera). Luego se cortó un cuadrado de 5 cm de agar PDA para depositarlo sobre el frasco con semillas de trigo, este sirvió de cama en la cual depositamos el cuadrado de agar avena conteniendo el micelio de nuestro hongo.
SIEMBRA DE LA CEPA MADRE SOBRE EL SUSTRATO DE GRANO EN FRASCO |
Figura. 1) Se cortó un cuadrado de 5 cm de agar PDA para depositarlo sobre el frasco con semillas de
trigo, este sirvió de cama en la cual depositamos el cuadrado de agar avena conteniendo el micelio de nuestro hongo. Esto se llevó a incubación a 30 °C. 2) A la semana se empezó a observar crecimiento de lso micelios sobre el grano de trigo en frasco. Fue así como se obtuvo la semilla y se dio por concluida la práctica.
