La urea es el resultado final del metabolismo de las proteínas; se forma en el hígado a partir de su destrucción. Puede aparecer la urea elevada en sangre (uremia) en dietas con exceso de p…Descripción completa
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B. MUESTRA Debe usarse suero o plasma. Los lípidos son estables en el suero por a lo menos 24 horas a temperatura ambiente y 3 días entre 2° a 8°C.
C. MATERIAL Y EQUIPOS DE LABORATORIO - Espectrofotómetro. - Micropipetas. - Pipetas capaces de medir los volúmenes. - Tubos de ensayo. - Baño de agua a 37°C. - Cubetas espectrofotométricas. - Reloj.
D. DETERMINACION DE GLUCOSA EN SUERO.
TÉCNICA:
DIGESTION: Manipular el ácido sulfúrico con precaución dado a que es corrosivo.
TUBOS
Standard
Desconocido
Suero
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20 uL
Standard
20 uL
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Ácido Sul fúrico concentrad o
1000 uL
1000 uL
Guía de Practicas del Curso de Bioquímica UNMSM – Facult ad de Medici na - Semestre 2016 I Profesor Responsable Blg o. Marco Antoni o Núñez Fonseca
COLORIMETRIA: Preparar la siguiente batería de tubos:
TUBOS
BLANCO
STANDARD MUESTRA
Digerido Muestra
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100 uL
Digerido Standard
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100 uL
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Ácido Fosfovain il inico
2.5 mL
2.5 mL
2.5 mL
Mezclar con una varilla de vidrio e incubar 10 minutos en baño de agua a 37°C. Luego leer en espectrofotómetro a 530 nm llevando el aparato a cero con el blanco.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL El color de la reacción es estable por una hora por lo que la Absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. La reacción es lineal hasta 2500 mg/dL. Para concentraciones mayores, diluir el tubo de reacción ya coloreado 1:2 o 1:5; según sea necesario, con reactivo fosfovainilinico. El resultado
CALCULO DE LOS RESULTADOS Los cálculos se realizan como sigue:
Lípidos Totales (mg/dL) = Abs MP x [Standard] Abs St
VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma: 450 – 850 mg/dL
Guía de Practicas del Curso de Bioquímica UNMSM – Facult ad de Medici na - Semestre 2016 I Profesor Responsable Blg o. Marco Antoni o Núñez Fonseca
