328836758-Laboratorio-1-Microbiologia-Sanitaria-I-UNI.docx

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACUL FA CULT TAD DE INGENIERÍ INGENIERÍA A AMBIENTAL A MBIENTAL “Añ Añ o de la coñsolidaci coñs olidacio oóñ del Mar de Grau"

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA I NGENIERÍA SANITARIA SANITARIA

LABORATORIO LABORATORIO N°1:

DISTRIBUCION UNIVERSA DE OS MICROORGANISMOS

DOCENTE:

JORGE TELLO CEBREROS

CURSO:

MICROBIOLOGIA SANITARIA I

ALUMNO:

SALAZAR TORRES, JOSHEP

FECHA:

20 DE SETIEMBRE DEL 2016


FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA SANITARIA

Objetivos       

Aprender el correcto manejo de los instrumentos tales como la placa Petri, tubos de prueba, pipetas, etc. Aprender el correcto manejo de los equipos utilizados utili zados en este laboratorio, tales como autoclave, horno, incubadora, etc. Conocer la forma correcta de la preparación de los medios de cultivos para el crecimiento de los microorganismos. Observar el desarrollo bacteriano en cada uno de los ambientes expuestos. econocer las caracter!sticas principales de cada colonia " el grado de contaminación de cada ambiente de la facultad de #ngenier!a Ambiental. Ambiental. econocer la necesidad de evitar la contaminación tanto de los medios de cultivo como los materiales utilizados en el laboratorio de microbiolog!a. Observar las principales caracter!sticas de cultivo elaborado, tales como su forma, margen, cromog$nesis, elevación, etc.

Fundamento Fundamen to Teórico Teórico LABORATORIO LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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Objetivos       

Aprender el correcto manejo de los instrumentos tales como la placa Petri, tubos de prueba, pipetas, etc. Aprender el correcto manejo de los equipos utilizados utili zados en este laboratorio, tales como autoclave, horno, incubadora, etc. Conocer la forma correcta de la preparación de los medios de cultivos para el crecimiento de los microorganismos. Observar el desarrollo bacteriano en cada uno de los ambientes expuestos. econocer las caracter!sticas principales de cada colonia " el grado de contaminación de cada ambiente de la facultad de #ngenier!a Ambiental. Ambiental. econocer la necesidad de evitar la contaminación tanto de los medios de cultivo como los materiales utilizados en el laboratorio de microbiolog!a. Observar las principales caracter!sticas de cultivo elaborado, tales como su forma, margen, cromog$nesis, elevación, etc.

Fundamento Fundamen to Teórico Teórico LABORATORIO LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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C%&'#(O )* +AC'*#A Para estudiar debidamente los microorganismos se necesita como requisito preciso el cultivarlos en condiciones de laboratorio. Para lograr esto es preciso conocer cu-les son los nutrientes " las condiciones f!sicas que se requieren. ediante investigaciones extensas se han determinado las necesidades nutricionales de las bacterias, " esta información ha sido la causa del desarrollo de numerosos medios de cultivo. /a /a que las necesidades nutricionales de las bacterias var!an de manera mu" amplia, existen diferencias mu" importantes en cuanto a la composición de los medios empleados. &as bacterias tambi$n tienen diferencias notables en lo que respecta a las condiciones del ambiente que favorece su proliferación. Por ejemplo, algunas prosperan bajo 01C, otras necesitan temperaturas superiores a los 231C " pueden reproducirse aun a 401C. Algunas necesitan atmosfera de ox!geno, en cambio, otras se inhiben con el ox!geno o bien este elemento les es indiferente.

5*C*#)A)* 5%'#C#O5A&* 5%'#C#O5A&* )esdee los )esd los homb hombre ress hast hastaa los los micr microo oorg rgan anis ismo mos, s, toda todass las las form formas as de vida vida,, tiene tienenn en com6 com6nn determinadas necesidades nutricionales en t$rminos de necesidad qu!micas para llevar a cabo su crecimiento " sus funciones normales. normales. &as siguientes observaciones observaciones confirman lo anterior7 8.

'odo organism organismoo vivo necesita necesita una fuente fuente de energ!a. energ!a. Algunas Algunas formas formas de vida, como las las plantas plantas verdes, pueden consumir la energ!a radiante " se las denomina fototrofas. &as formas de vida incapaces de asimilar la energ!a radiante, por ejemplo, la vida animal, se valen de la oxidación de compuestos qu!micos para obtener su energ!a. A estas se las denomina quimiotrofas.

9. 'odo organi organismo smo vivo necesit necesitaa obtene obtenerr carbon carbonoo de alguna alguna manera manera,, todos todos requiere requierenn al menos peque:as cantidades de dióxido de carbono, pero la ma"or!a de ellos necesita de alg6n compuesto que tenga carbono org-nico, como az6car " otros carbohidratos. ;. 'odo organi organismo smo vivo necesi necesita ta obtener obtener nitrógen nitrógenoo de alguna alguna manera manera.. &as bacter bacteria ia son mu" vers-tiles a este respecto< algunos tipos de ellas absorben nitrógeno atmosf$rico, otras lo obtienen en compuestos de nitrógeno inorg-nico, " otras m-s lo toman de las prote!nas. 2. 'odo organismo organismo vivo necesita necesita azufre azufre " fosforo fosforo.. 3. 'odos los organis organismos mos vivos necesit necesitan an de varios metales metales como sodio, sodio, potasio, potasio, calcio, calcio, hierro, entre entre otros< para que puedan crecer normalmente. &as bacterias no son la excepción. =. 'odos los los organismos organismos necesita necesitann agua para para su crecimiento crecimiento.. *n el caso de las bacteria bacterias, s, todos todos los nutrientes deben estar en solución antes de que puedan ser incorporadas a estos organismos 4.

'odo organi organismo smo vivo tiene vitamin vitaminas as " compue compuesto stoss vitami vitaminad nados. os. Aunqu Aunquee todas todas las bacter bacterias ias necesitan de vitaminas en su proceso metabólico normal, algunas son capaces de elaborar >sintetizar? todas las vitaminas que necesitan a partir de otros compuestos que se encuentran en el medio. *studios sobre metabolismo efectuados con bacterias han posibilitado comprender como se sintetizan " funcionas las vitaminas. *n la siguiente tabla se ha referencia a las vitaminas de uso m-s com6n para el crecimiento bacteriano, asimismo ejemplo de especies.

LABORATORIO LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA

'#PO )* 5%'#C#O5 )* &A +AC'*#A )e acuerdo con las caracter!sticas generales "a mencionadas en los p-rrafos anteriores, es posible dividir las bacterias en muchos grupos tomando como base sus requerimientos nutricionales. *stos son los llamados fototrofos " quimiotrofos, estos a su vez se subdividen en base a la fuente principal de energ!a que consumen para su crecimiento, por ejemplo, la luz o la oxidación de compuestos qu!micos. *stos tipos de nutrición se consignan en la siguiente tabla.

A%'O'O@O / *'*O'O@O *n t$rminos sencillos, los autótrofos tienen las necesidades m-s simples. Por ejemplo, un medio de cultivo como que se muestra en la siguiente tabla permite el crecimiento de bacterias autotróficas que oxidan azufre. *l hecho de que un organismo que puede crecer " reproducirse en tal mezcla de compuestos qu!micos simples, es indicativo de que poseen una capacidad mu" compleja para llevar a

LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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cabo la s!ntesis. *s decir, el organismo puede transformar estos compuestos en carbohidratos, grasa, prote!nas, -cidos nucleico, vitaminas " otras sustancias complejas que constitu"en la c$lula viva.

&as bacterias heterótrofas se han estudiado m-s ampliamente que las autótrofas "a que, en esencia, las heterótrofas est-n m-s relacionadas con el hombre. *n este grupo de bacterias se pueden encontrar todas las que producen enfermedades al hombre, animales " plantas. Aunque las bacterias heterotróficas constitu"en uno de los grupos nutritivos m-s importantes, estos microrganismo var!an considerablemente en cuando a sus necesidades de nutrientes espec!ficos para el desarrollo. Como se indica en la siguiente tabla, las bacterias heterotróficas pueden tener necesidades nutricionales relativamente simples o mu" complicadas, dependiendo de la especie que se trate.

COO5)#C#O5* @##CA 5*C*A#A PAA *& C%&'#(O )* #COOBA5#O Adem-s de conocer los nutrientes apropiados necesarios para el cultivo de bacterias, tambi$n conviene conocer las condiciones f!sicas del medio en donde el microorganismo puede desarrollarse mejor. As! como las bacterias var!an ampliamente en relación a sus necesidades nutricionales, tambi$n muestran respuestas diversas a las condiciones f!sicas del medio. )icho de otra manera, para


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un buen cultivo de las bacterias se necesita combinar apropiadamente los nutrientes necesarios " las condiciones f!sicas adecuadas.

'*P*A'%A /a que el proceso de desarrollo de las bacterias depende de reacciones qu!micas " la velocidad con que se efect6an estas reacciones es influida por la temperatura, el patrón de desarrollo bacteriano puede ser influido profundamente por esta condición. &a temperatura puede, en parte, determinar la velocidad de crecimiento " el grado total de desarrollo de los microorganismos. &as variaciones en la temperatura tambi$n pueden influir en los procesos metabólicos en la morfolog!a celular. Cada especie de bacterias crece a temperatura que est-n dentro de ciertos l!mites como se muestra en la siguiente tabla.

5*C*#)A) O A%*5C#A )* BA* &os gases principales que afectan el desarrollo bacteriano, son el ox!geno " el dióxido de carbono. &as bacterias presentan una respuesta amplia " variable al oxigeno libre, " sobre esta base se dividen en cuatro grupos7 8. Aerobias, bacterias que se desarrollan en presencia de oxigeno libre 9. Anaerobias, bacterias que se desarrollan en ausencia de oxigeno libre ;. Anaerobias facultativas, bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de oxigeno libre. 2. icroaerófilas, bacterias que crecen en presencia de peque:!simas cantidades de oxigeno libre. LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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AC#)* O A&CA#)A) >p? *n la ma"or parte de las bacterias el p óptimo de crecimiento est- entre =.3 " 4.3, aunque algunas bacterias pueden desarrollarse a p extremos, en la ma"or parte de las especies los l!mites m!nimos " m-ximos corresponden a cualquier punto entre p 2 " p D como se puede apreciar en la siguiente tabla.

AC'#(#)A) )*& AB%A Como los microorganismos dependen del agua para la s!ntesis de sus componentes celulares, es necesario que $sta se encuentre disponible en el medio de cultivo para que los microorganismos la puedan utilizar para su crecimiento. &a actividad del agua >aE? es una expresión para la cantidad de agua disponible en un sustrato dado " se define como Fla cent$sima parte de la humedad relativa del aire que est- en equilibrio con ese sustratoG. *ste valor nos indica la cantidad de agua disponible para ser utilizada por los microorganismos.

*n la siguiente tabla se presentan como ejemplo algunos microorganismos " el valor de aH en el que se produce su crecimiento.


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&% A+#*5'A& &a ma"or!a de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. a" excepciones evidentes como ser!a el caso de los microorganismos fotosint$ticos

*'*#&#)A) )*& *)#O 'odos los medios de cultivo han de estar perfectamente est$riles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los espec!menes inoculados en dichos medios. *l sistema cl-sico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave >que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante?

*)#O +AC'*#O&OB#CO e necesita un gran n6mero de sustancias qu!micamente puras para cultivar bacterias que tengan necesidades nutricionales como los lactobacilos. Aunque para el cultivo de bacterias heterotróficas en laboratorios, tanto si son similares a las especies Escherichia o de Lactobacillus, generalmente se basan en medios de cultivo sint$ticos. *n lugar de esto, se usan ciertos materiales crudos como LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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peptonas, extracto de carne " extracto de levadura " as! el medio de cultivo que se obtiene hace posible el desarrollo de gran variedad de bacterias " otros microorganismos. Cuando se desea un medio solido se tomo el agar como agente solidificante. 'enemos en la siguiente tabla la descripción de algunos materiales crudos, de los cuales es posible la preparación de un capaz de permitir el crecimiento de muchas bacteria heterotróficas.

P*PAAC#O5 )* &O *)#O Para el cultivo de las bacterias se recurre a algunas sutancias naturales comunes, *n relacion con esto, se usa la leche denatada " no entera. &os materiales, en su forma natural, no presentan ningun tipo de porblema para tomarlos como medios de cultivo "a que simplemente se depositan dentro de los ensvases adecuados tales como tu bos de ensa"o, o matraces, los cuales deberan ser esterelizados antes de utilizarlos. &os medios que se preparan del tipo agar o caldo nutritivo, se hacen mezvlando


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los infredientes individuales necesarios, o de manera mas practica agregando agua o productos deshidratados que contienen todos los ingredientes. *n el comercio podemos encontrar practicamente todos los medios de cultivo en forma deshidratada. *n la prepracion de cultivo, se debe segior os guientes pasos7 8.

Cada ingrediente, o el medio deshidratado completo, se debe disolver en un volumen adecuado de agua destilada. 9. e determinara el p del medio " si es necesario se ajustara. *l p se deermina por medio de indicadores como se muestra en la siguiente tabla .


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;. *l medio se pondra en recipientes adeciados, como tubos, matraces, botellas, cu"as bocas se cierran con tapones de algodón, pasltico o cubiertas de metal. 2. &os medios se esterilizan generalmente en el autoclave.

*)#O )* C%&'#(O %'#&#A)O Agar nutritivo : *l agar 5utritivo garantiza el crecimiento de todos los microorganismos de importancia cl!nica tanto grampositivos como gramnegativos, hongos " levaduras, adem-s de proporcionar una herramienta para el mantenimiento " confirmación de aislamientos primarios *l agar 5utritivo se prepara a partir del medio de cultivo deshidratado, materia prima producida por la casa ++& " tiene la siguiente composición7gIl

Agar 5utritivo >Concentración7 9; g en 8 litro?e utilizó 9.4= g de agar en 890ml de agua.

Caldo Nutritivo : edio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. *st- descripto en muchos procedimientos para el an-lisis de alimentos, aguas " otros materiales de importancia sanitaria. Contiene pluripeptona >una mezcla de partes iguales de peptona de carne " de case!na? " extracto de carne que constitu"en la fuente de carbono " nitrógeno necesarias para el adecuado desarrollo bacteriano. Puede ser utilizado adem-s, como preenriquecimiento en la b6squeda de almonella spp. a partir de alimentos, "a que permite recuperar c$lulas da:adas, diluir metabolitos tóxicos " sustancias inhibitorias. Composición > gr Ilitro?


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p final7 =.D J 0.9 Caldo 5utritivo >Concentración7 K g en 8 litro?e utilizó 8.0K g de caldo en 8;3 ml de agua.

Agar Sabouraud : edio utilizado para el aislamiento, identificación " conservación de hongos patógenos " saprófitos. 'ambi$n es 6til para el cultivo de levaduras.ecomendado para el aislamiento " desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cut-neas >piel, pelo?. *n el medio de cultivo, la peptona, la tripte!na " la glucosa son los nutrientes para eldesarrollo de microorganismos. *l alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol" el p -cido, inhiben el desarrollo bacteriano " favorecen el crecimiento de hongos " levaduras. *l agar es el agente solidificante. Puede ser suplementado con otros agentes selectivos de crecimiento. Blucosado Composición >en gramos por litro? Peptona..........................................................................................................................3.0. 'ripte!na.........................................................................................................................3.0. Blucosa..........................................................................................................................20.0. Cloranfenicol.................................................................................................................0.03. Agar...............................................................................................................................83.0. p final7 3.= J 0 Agar abouraud >Concentración7 =3 g en 8 litro?.e utilizó 2.K43 g de agar en 43 ml de agua

O@O&OB#A )* &A CO&O5#A *5 &A %P*@#C#* )* %5 *)#O O&#)O @OA )* &A CO&O5#A


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+O)* O AB*5 )* &A CO&O5#A

*&*(AC#O5 )* &A CO&O5#A

%P*@#C#* )* &A CO&O5#A o o o

&isa ugosa Plegado

&% *@&*LA)A > observar a traves de la colonia? o o

Opaca +rillante

COOBM5*# O P#B*5'AC#O5 o o o o

Crema Amarilla Anaranjado +lanca


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CAAC'*#'#CA OP'#CA o o o

Opaca 7 no permite el paso de la luz 'raslucida7 )eja pasar la luz sin permitir la completa visibilidad 'ransparente7 )eja pasar la luz permitiendo ver claramente los objetos a traves de la colonia

*'O)O&OB#A A'*#A&* / POC*)##*5'O A 7 ateriales " *quipos 7      

2 tubos de ensa"o 2 placas Petri > ; est$riles " 8 no est$ril ? 9 inoculadores > 8 est$ril " 8 no est$ril? #ncubadora efigeradora Agar nutritivo

Procedimiento A 7 8. aber preparado el Agar nutritivo en 2 tubos de ensa"o. 9. (aciar el agar nutritivo en cada una de las ; placas Petri est$riles " en la placa Petri no est$ril. 5umerar las placas est$riles del N8 al N; " la placa no est$ril con el N2.


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;. %na vez se ha"a solidificado el agar nutritivo, se debe llevar a experimentación las cuatro placas de la siguiente manera7

Placa 51 87 



Brupo 87 +a:o de ujeres @echa7 93 de Agosto del 908= ora7 3703  3790 p.m. Brupo ;7 +a:o de (arones @echa7 93 de Agosto del 908= ora7 370=  3798 p.m.

Placa 51 97 

e debe dividir la placa en 2 partes, trazando l!neas perpendiculares >cuatro cuadrantes? con alg6n marcador. A? Pelo


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+? uella )igital C? #noculador *st$ril )? #noculador no *st$ril

Placa 51 ; " 51 27  

5o se deben abrir. &as placas Petri se deben invertir e incubarlos a ;41C por un periodo de 2K horas. )espu$s de ese tiempo llevarlas a refrigerar.

A'*#A&* / POC*)##*5'O +7 ateriales " *quipos7      

; pipetas > 9 est$riles " 8 no est$ril? ; tubos de ensa"o > 9 est$riles " no est$ril ? Pera #ncubadora efrigeradora Caldo 5utritivo

Procedimiento +7 

e prepara el caldo nutritivo " se extrae del autoclave, para despu$s con pipeta extraer el medio en otras ; pipetas distribuidas de la siguiente manera7   

Pipeta est$ril 'ubo est$ril pipeta no est$ril tubo est$ril pipeta est$ril tubo no est$ril

A'*#A&* / POC*)##*5'O C7 ateriales " *quipos7   

Agar abouraud 3 placas Petri #ncubadora

Procedimiento C7 

/a preparado el Agar abouraud, se vierte en 3 placas uno para cada grupo " se lleva a diferentes ambientes de la @acultad de #ngenier!a Ambiental. *l trabajo fue realizado el 93 de Agosto del 908=. 



Brupo 87 +a:o de (arones ora7 272K370; p.m. Brupo 97&aboratorio de @isicoqu!mica ora7 272D3702 p.m.


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





 

Brupo ;7Centro de *studiantes ora7 27303703 p.m. Brupo 27 +iblioteca @#A ora7 272D3702 p.m. Brupo 37 &aboratorio de icrobiolog!a ora7 3723=700 p.m.

%bicado cada uno en su ambiente, se destapa la placa " se deja durante 83 minutos. &uego, ponerla en la parte superior de la incubadora para que se desarrollen los hongos.

*%&'A)O *%&'A)O )*& POC*)##*5'O A7

Grupo

8

Placa N1 !st"ril

Placa N#$ !st"ril

'A(O )! ector A7 Pelo *+,!-!S .F/A0

ector uella

56mero de 89 colonias 'ama:o Q8R8mm >2? Q9R9mm >8? Q; R2mm >8? Q2R3mm >8? Q3R8Kmm>8? Q=R99mm>2? argen &obulado>8? &iso>80? OndulatorioR

Placa N#% est"ril +7 ector C7 #nocu lador est$ril 

Placa N#& est"ril no

ector )7 #nocu lador no est$ril

93





Q8S8mm>8? Q9R8mm >0? Q; R9mm >=? Q2R;mm>8? Q3R2mm>8? Q=R3mm>0? &iso>93? Ondulatorio>2? &obulado>9?

&iso>=? &obulado>2? Ondulatorio> ;?

Q8R=3mm>8 ? Q9R2mm >8? Q; R9mm >8?

&iso>=? &obulado>2? Ondulado>;?

@ilamentoso >8? &iso>9?


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

;



8

*levación

Plano>80? Convexo>8? *levado>8?

convexo>8? liso>92?

Convexo>2? Plano>D?

Plano>9? Convexo>8?

Pigmenta ción

+lanco>8? Amarillo>8? +romo>80?

+lanco>D? +romo>90?

Amarillo>8? +romo>9? +lanco>D? 5egro>8?

+lanco>9? Crema>8?

Caracter!s ticas

Opaco>89?

Opaco>93?

Opaco>8;?

Opaco>8?

Grupo

;

Placa N#1 !st"ril

Placa N#$ !st"ril

'A(O )! ector A7 Pelo A-ON!S .F/A0

ector uella

56mero de 9D colonias 'ama:o Q8R8mm >8=? Q9R9mm >;? Q; R;mm >9? Q2R2mm >8? Q3R3mm>2? Q4R4mm>8? QKRKmm>8? QDRDmm>8? argen

&iso>80?

*levación

Convexo>9D?

Placa N#% !st"ril +7 ector C7 #nocu lador est$ril

2

3

8

Q8R2mm>8? Q9R8mm >;?

Q8R2mm >8? Q9R;mm >9? Q; R9mm >9?

&iso>8;? &obulado>8?

&iso>=2 &obulado>8?

Q8R9m m>8?


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ector )7 5o abrir #nocu lador no est$ril 8 Q8R3m m>8?

8 Q8R2mm >8?

Plana>8?

Placa N#& !st"ril no 





Pigmentació n

amarillo>8? naranja>;? crema>0?

amarillo>0? crema>8? +lanco>;?

Amarillo>8? crema>9? +lanco>9?

Claro>8?

Claro>8?

Crema>8?

Caracter!s ticas

Opaco>89?

Opaco>9=? Opaco>0? Opaco>8 'ransparente>;? 'ransparente ? >2? 'rans>2?

Opaco>0 ? 'rans>8?

Opaco>0? 'rans>8?

*%&'A)O )*& POC*)##*5'O +7


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Opaco> 0 'rans>8 ?



Grupo N$ CA-ACT!-2ST/CAS

Tubo N1 Pipeta est"ril Tubo est"ril

CANT/)A) C-!C/*/!NTO

)! escaso

)/ST-/'+C/ON C-!C/*/!NTO

)!3 turbidez

Tubo N$ Pipeta est"ril Tubo no est"ril

Tubo N% Pipeta no est"ril Tubo est"ril

escaso

escaso

sedimento

sedimento

O3O-

p6trido

imperceptible

p6trido

Grupo N& CA-ACT!-2ST/CAS

Tubo N1 Pipeta est"ril Tubo est"ril

Tubo N$ Pipeta est"ril Tubo no est"ril

Tubo N% Pipeta no est"ril Tubo est"ril

escaso

Abundante

edimento >anaerobia?

Pel!cula >aerobia?

imperceptible

p6trido

CANT/)A) C-!C/*/!NTO )/ST-/'+C/ON C-!C/*/!NTO O3O-

)! escaso

)!3 edimento >anaerobia? arom-tico


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*%&'A)O )*& POC*)##*5'O C7 G-+PO 1: Observación: estuvo e4puesto al Ambiente durante: 15min Tiempo de cultivo: 6$ 7oras

Ambiente: 'a8o de varones


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9ora de e4posición : Fec7a de e4posición Numero de 7ondos observados Tipos de 7ongos

272Kpm370;pm 93I0KI8= 8= Aspergillus>8?, penicillium>;?, Alternarias>8?, saccharom"ces>9?, rhizopus>D?

Caractersticas

(erde azulado, verde amarillento " verde negrusco

G-+PO $: Observación: estuvo e4puesto al Ambiente durante: 15min Tiempo de cultivo: 6$ 7oras

Ambiente: laboratorio ;sico<=umico

9ora de e4posición :

272Dpm3702pm

Fec7a de e4posición

93I0KI8=

Numero de 7ondos observados Tipos de 7ongos

82 Aspergillus>88?, penicillium>;?

Caractersticas

Color verde amarillento

G-+PO %: Observación: estuvo e4puesto al Ambiente durante: 15min Tiempo de cultivo: 6$ 7oras 9ora de e4posición : Fec7a de e4posición Numero de 7ondos observados

Ambiente: Centro de !studiantes 2730pm3703pm 93I0KI8= 83


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Tipos de 7ongos

Aspergillus>;?, penicillium>8?, Alternarias>=?, rhizopus>9?, esporangioforo>;?

Caractersticas

(erde azulado, verde amarillento " verde negrusco

G-+PO &: Observación: estuvo e4puesto al Ambiente durante: 15min Tiempo de cultivo: 6$ 7oras

Ambiente: biblioteca de la F/A


272Dpm3702pm 93I0KI8= 80 Aspergillus>2?, penicillium>;?, levadura>9? Alternarias>8? Color verde amarillento

Caractersticas


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G-+PO 5: Observación: estuvo e4puesto al Ambiente durante: 15min Tiempo de cultivo: 6$ 7oras

Ambiente: laboratorio de microbiologa


3723pm=700pm 93I0KI8= D Aspergillus>8?, penicillium>3?, Alternarias>9?, esporangioforo>8? Color verde amarillento

Caractersticas

)#C%#T5 LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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*n el procedimiento A, se observa que el cabello utilizado del grupo 8 se encuentra m-s contaminado con respecto al cabello utilizado del grupo ;, se refleja la higiene personal de cada uno de los alumnos que participaron en el experimento. Por otro lado, el grupo ; obtuvo bacterias en la parte de la placa que se uso el inoculador est$ril, mientras que el grupo 8 no obtuvo bacterias, por lo tanto, se afirma que el grupo ; contaminó su inoculador est$ril.

*n el procedimiento +, los dos grupos contaminaron la pipeta al momento de transferir el caldo nutritivo a los tubos de ensa"o, esto justifica la presencia de bacterias en el primer tubo el cual es est$ril. e debe tomar en cuenta, que el grupo 2 dejo un periodo m-s largo de incubación que el grupo 9, por lo que es un factor mu" importante que nos impide poder comparar los resultados "a que son diferentes como en el olor, la cantidad de crecimiento " la distribución del crecimiento.

*n el procedimiento C, los 3 grupos colocaron sus placas al mismo tiempo " las retiraron todos juntos, los resultados fueron los esperados "a que se encontraron una gran cantidad de hongos los cuales se pod!an identificar " especificar de qu$ tipo de hongo se trataba. Cada placa ten!a alg6n tipo de hongo propio del ambiente al cual fue expuesto. *l resultado predecible fue que la ma"or cantidad de hongos se encontraba en el ba:o de hombres, se debe a que este no tiene un constante mantenimiento.


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O+*(AC#O5* 

e observó al calentar el Agar nutritivo con el ba:o mar!a demoró mucho m-s tiempo que al calentarlo en la plancha.



Como la pera se encuentra contaminada, se pipetea. Al poner el dedo en la pipeta se contamina.



&a preparó mu" de Agar abouraud, por lo que el grupo 3 tuvo que preparar m-s de este agar.



*l mechero no es mu" 6til para la esterilización del inoculador.



&as transferencias del caldo nutritivo a cada tubo de ensa"o fue desigual.



*l grupo 2 tardó m-s de 49 horas en sacar los tubos de ensa"o, los cuales conten!an el caldo nutritivo. 5o se llegaron a poner en el refrigerador.



*s necesario tener en disposición los guantes "a que se trabaja a altas temperaturas.



olo se calienta el Agar 5utritivo " el Agar abouraud.



*l autoclave debe llegar hasta 8981C, tambi$n se debe recoger el vapor de agua en un balde.

CO5C&%#O5*


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

e aprendió a usar los materiales necesarios para preparar los medios de cultivos para el desarrollo de bacterias " hongos, evitando que los materiales se contaminen se pudo obtener unos resultados m-s precisos.

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e comprendió como se debe manejar los equipos del laboratorio de microbiolog!a " as! se pudo evitar alg6n accidente durante el trabajo realizado.



A pesar de que los materiales de cultivos se encontraban vencidos, se pudo demostrar la presencia de hongos " bacterias en algunos ambientes de la @acultad de #ngenier!a Ambiental.



e conclu"e que a pesar de que las placas ha"an sido expuestos a diferentes ambientes de la facultad, tienen muchos hongos en com6n " otros propios de ese lugar. Por ejemplo, en la biblioteca apareció el hongo de la levadura< esto es lógico "a que los alumnos comen sus alimentos dentro de la biblioteca frecuentemente.



*l ambiente m-s contaminado de la facultad es el +a:o de los hombres, "a que la cantidad de hongos que se encontró fue superior a los dem-s ambientes, de esto se podr!a concluir que los varones son menos aseados que las damas, "a que en el ba:o de damas la cantidad de hongos fue inferior. Otro motivo de esta conclusión es que el mantenimiento del ba:o es mu" poco frecuente.



*s mu" importante no contaminar los materiales "a que en los resultados se hace dif!cil identificar " reconocer el tipo de hongo o bacterias que se encuentran dentro del tubo o la placa Petri.



e logró identificar diferentes tipos de hongos7 Aspergillus, penicillium, Alternarias, esporangioforo, levaduras. e pudieron reconocer gracias a su morfolog!a >forma, color, elevación, etc.?



*n el procedimiento +, en el tubo 518, los dos grupos obtuvieron resultados diferentes, esto se debe que al momento de pipetear la pipeta se contaminó.

*CO*5)AC#O5* 

Para realizar el experimento, tratar de usar materiales de cultivo cu"a fecha de vencimiento sea posterior al trabajo de laboratorio.


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

*n el momento de la preparación del medio de cultivo, realizar bien los c-lculos "a que podr!a faltar alg6n medio de cultivo para la realización del trabajo.



&avar bien los materiales que se usaran en el trabajo "a que est-s podr!an contaminarse " as! hacer variar un resultado esperado.



iempre trabajar cerca del mechero para evitar la contaminación de los materiales est$riles.



Por ning6n motivo abrir por completo las placas Petri que est-n est$riles, solo se levanta un poco " se ingresa el Agar.



*sterilizar todo los materiales que se usaran para los medios de cultivo.

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e comprobó que el ba:o mar!a era menos eficaz para elevar la temperatura del Agar que se encuentra solidificado, se recomienda usar la plancha.



'apar bien los tubos de ensa"o, usar una significante cantidad para evitar la contaminación.



'ener el conocimiento necesario del autoclave " del horno para su utilización, "a que esto podr!a provocar accidentes si es que no tenemos los instrumentos preventivos como los guantes.



Al transferir el caldo nutritivo con la pipeta, evitar tocar la pipeta est$ril con la mano, "a que se contaminara.



Al colocar las placas Petri en la incubadora, se deben colocar invertidas.



e recomienda poner todas las placas al mismo tiempo que contienen el Agar abouraud encima de la incubadora.



)espu$s de sacar los tubos de la incubadora, no se deben agitar.



%na vez concluido el laboratorio, lavarse bien las manos " descontaminarlas con alcohol.

C%*'#O5A#O 8. UVu$ factores influ"en en la flora bacteriana del aireW &a clase " el n6mero de microorganismo del aire var!an seg6n el medio. &os microorganismos del aire libre est-n influenciados por las condiciones meteorológicas " por el tipo de terreno. &as part!culas inertes " microbianas que flotan en el aire son llevadas a grandes distancias por los vientos. e sabe tambi$n, que el n6mero de microorganismos no aumenta porque carecen de sustancias nutritivas adecuadas. Por lo tanto, existen muchos factores que afectan a las bacterias en el aire, entre las principales serian7 LABORATORIO N° 1: DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS

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    

'emperatura umedad Part!culas en suspensión (entilación adiación

9. UCu-les son las caracter!sticas principales de los Aspergillus, hizobium, Penicillium, sacharom"ze cervicaeW Caractersticas de la Aspergillus  

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 

Perteneciente al filo Ascom"cota. e encuentra formado por hifas hialinas septadas " puede tener reproducción sexual >con formación de ascosporas en el interior de ascas? " asexual >con formación de conidios?. &as diferentes especies se diferencian en tama:o, tasa de crecimiento, textura >aterciopelada, granular, algodonosa? " color de la colonia. &a coloración aparece casi siempre en todas las estructuras a$reas, tanto en el micelio como en las cabezas conidiales. Aspergillus es uno de los principales hongos productores de micotoxinas. *s termotolerante, puede vivir entre los 89XC " los 34XC.

Caractersticas de la Penicillium  

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e caracterizan por formar conidios mediante una estructura ramificada. las ramificaciones terminan en unas c$lulas que se conocen como fialides. &as fi-lides originan las esporas. Cuando existe solamente un verticilo se denomina monoverticilado " si existen varios biverticilado, terverticilado o poliverticilado. siendo el g$nero de hongos m-s abundante en suelos

Caractersticas de la -7i>obium


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e alimenta de los restos de organismos muertos. on bacilos móviles, Bramnegativos Aerobios >necesita ox!geno para crecer?, Crece casi en cualquier temperatura, pero su desarrollo es m-s óptimo a una temperatura de 93 1C >44 1@?, us dimensiones son de 0.30.D x 8.9;.0 Ym, " cuenta con flagelos.

Sac7arom?>e cervicae Conocida desde la antigZedad, la levadura del pan, del vino " de la cerveza, accharom"ces cerevisiae, se ha convertido en un organismo de estudio com6n en el laboratorio. &a investigación biotecnológica ha mantenido el uso tradicional que se ha hecho de esta levadura, mejorando e innovando los procesos de panificación " de producción de bebidas alcohólicas. A la vez, este organismo ha ganado protagonismo en el laboratorio al convertirse en un potente modelo biológico de organismos eucariotas.

Caractersticas del Sac7arom?>e cervicae 

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*n la naturaleza se encuentra sobre sustratos ricos en az6cares o en los exudados " savias dulces de algunas plantas. a demostrado tener un enorme potencial como herramienta tecnológica para la biolog!a molecular al permitir establecer con relativa facilidad la relación entre la estr uctura gen$tica " la función de la prote!na.

3. UVu$ clase de nutrientes proporciona cada uno de los ingredientes del caldo nutritivo, agar sabourdou " agar nutritivoW *l agar sabouraud proporciona los siguientes ingredientes7 Peptona..........................................................................................................................3.0. 'ripte!na.........................................................................................................................3.0. Blucosa..........................................................................................................................20.0. Cloranfenicol.................................................................................................................0.03. Agar...............................................................................................................................83.0. / en el siguiente cuadro se muestra lo que proporciona el Agar nutritivo " el Caldo nutritivo7


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+ibliograf!a Collis, C.., " P.. &"ne7 Microbiological Methods, 3ª. Ed., University Park Press, Baltimore, 1!" . )escripcion f-cil de entender de las ecinas de laboratorio inclu"endo el cultivo de bacterias. )oestsch, .5., " '.'. Coo[7 #ntroduction to Bacteria and their Ecobiology, University Park Press, Baltimore, 1!3.

*ste volumen proporciona una excelente descripción de las necesidades f!sicas "

qu!micas >nutrientes? para el desarrollo bacteriano, particularmente respecto a los habitasts naturales.


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328836758-Laboratorio-1-Microbiologia-Sanitaria-I-UNI.docx

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