DETERMINACION DETERMINACION DE AMILASA AMILAS A I. INTRODUCCIÓN: II. Marco teorico: La amil amilas asa, a, prod produc ucid ida a prin princi cipa palm lmen ente te en el pánc páncre reas as exoc exocrin rino o y en las las glándulas salivales, escinde los enlaces α-1-4 glucosídicos de los polisacáridos (almidón y glucógeno). e encuentra elevada en el suero de pacientes con pancreatitis aguda alcan!ando los valores más elevados entre las "4 y #$ %ora %oras s post poster erio iore res s al ata& ata&ue ue,, decl declin inan ando do lueg luego o para para volv volver er a los los nive nivele les s normales entre las "4 y 4' %oras siguientes. ami*n se ve aumentada en este caso la excreción urinaria de la en!ima, persistiendo la %iperamilasuria # a + días, luego de &ue la actividad s*rica %a alca alcan! n!ad ado o los los nive nivele les s norm normal ales es.. ami* mi*n n es posi posil le e enco encont ntra rarr valor valores es aumentados en cual&uier caso de adomen agudo o intervención &uirrgica en region regiones es próxim próximas as al páncre páncreas. as. La paroti parotidit ditis is acter acterian iana a y papera paperas s se asocian tami*n con elevaciones en los niveles de amilasa s*rica. La α-amilasa es una en!ima en!ima proteica &ue se encuentra encuentra en la saliva saliva %umana %umana y catali!a la degradación del almidón, &ue es un polisacárido de reserva vegetal. l almi almidó dón n está está /orm /ormad ado o por por dos dos tipo tipos s de mol* mol*cu cula las0 s0 la amil amilos osa a y la amilopectina, amos polisacáridos de glucosa. •
La amilosa se con/orma por cadenas lineales de glucosas unidas por
•
enlaces α- 1-4. Amilopectina tiene, además de estos ltimos enlaces, uniones 1 con 2, /ormando cadenas rami/icadas.
VALORES NORMALES l rango normal es de "# a '+ unidades por litro (3L). 5lgunos laoratorios dan un rango de 4$ a 14$ 3L. 6ota0 6ota0 los rangos rangos de los valore valores s norma normales les puede pueden n varia variarr ligera ligeramen mente te entre entre di/ere di/erente ntes s laora laorator torios ios.. 7ale 7ale con el m*dico m*dico acerc acerca a del del signi/ signi/ica icado do de los resultados especí/icos de su examen.
SIGNIFICADO CLINICO La med medició ición n de la acti activ vidad idad amil amilas asa a en suero uero y orin orina a tie tiene util utilid ida ad princi principal palmen mente te para para el diagnó diagnósti stico co de en/erm en/ermeda edades des pancre pancreáti áticas cas como como la panc pancre reat atit itis is crón crónic ica a o agud aguda. a. e %a comu comuni nica cado do &ue &ue la sens sensi iil ilid idad ad y especi/icidad diagnóstica de la amilasemia en la pancreatitis aguda son del 8$ al 9': y del 8$ al 82: respectivamente, y para la amilasuria del '$ al 9': y del '$ al 9$:.
La %iperamilasemia tami*n puede ser deida a insu/iciencia renal, dolor adominal agudo, tumor en pulmones u ovarios, lesiones en las glándulas salivales, macroamilasemia, cetoacidosis dia*tica, en/ermedad del tracto iliar, trauma cereral, alco%olismo crónico y medicamentos (opiáceos).
FUNDAMENTOS DEL METODO La α-amilasa %idroli!a el sustrato de/inido "-cloro-p-nitro/enil- α-;-maltotriósido (6<-=#) para lierar "-cloro-p-nitro/enol (6<), /ormándose "-cloro-nitro/enilα-;-maltósido (6<="), maltotriosa (=#) y glucosa. l 6< asore a 4$+ nm y la velocidad de aparición del color es directamente proporcional a la actividad en!imática. l uso de este sustrato de/inido, sustancia de estructura y peso molecular conocido, posiilita la expresión de los resultados en 3l y no re&uiere en!imas auxiliares.
REACTIVOS PROVISTOS 5. Reactivo A: viales conteniendo 6<-=#. >. Reactivo : u//er ? p7 2@ 1$$ mmoll.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Aeactivo >0 listo para usar. Aeactivo 5@ preparación0 reconstituir cada vial con el volumen de Aeactivo > indicado en el rótulo. apar y agitar %asta disolución completa.
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico in vitro. l Aeactivo > contiene tiocianato de potasio. A"$"1""0 nocivo por in%alación, por ingestión y en contacto con la piel.
ni el Aeactivo 5 reconstituido. 3tili!ar los reactivos guardando las precauciones %aituales de traaBo en el laoratorio de &uímica clínica. odos los reactivos y las muestras deen descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
MUESTRA uero, plasma u orina a) Aecolección0 si se utili!a suero, otener de la manera usual. eparar el suero del coágulo lo más rápidamente posile. n caso de usar plasma *ste dee ser %eparini!ado. i se emplea orina, la determinación puede e/ectuarse en una muestra de orina ocasional. ) 5ditivos0 en caso de usar plasma, dee utili!arse %eparina para su otención. i se usa orina ver d. c) ustancias inter/erentes conocidas0 %emólisis, anticoagulantes (citrato, oxalato y ;5). n el caso de orina no dee agregarse ácido clor%ídrico como conservador. 6o se oservan inter/erencias por ilirruina %asta "$$ mgl,
%emogloina %asta $,+ gdl y triglic*ridos %asta 1# gl. Ae/erirse a la iliogra/ía de Coung para los e/ectos de las drogas en el presente m*todo. d) stailidad e instrucciones de almacenamiento0 en suero la amilasa es estale durante una semana a temperatura amiente (si se evita la contaminación acteriana) o varios meses re/rigerada. n orina, si la muestra no se procesa en el día, es conveniente aBustar el p7 aproximadamente a 8 (con %idróxido de sodio) dado &ue el p7 ácido inactiva la en!ima irreversilemente. 5 p7 8 puede conservarse re/rigerada por lo menos 1$ días sin p*rdida de actividad, si no existe contaminación acteriana.
VALORACI!N DE RESULTADOS ANORMALES Los niveles aumentados de 5milasa en la sangre pueden indicar0 •
áncer de páncreas, ovarios, pulmón.
•
olecistitis.
•
ólico de vesícula iliar.
•
mara!o ectópico con rotura de trompas.
•
Dstrucción intestinal.
•
•
•
3lcera de estómago per/orada.
Los niveles disminuidos de 5milasa en la sangre pueden indicar0
•
áncer de páncreas.
•
Lesión pancreática.
•
n/ermedades renales.
•
oxemia en el emara!o.
III.
Materiales:
AMILOKIT (A Y B)
CENTRIFUGA
i!eta "e #$
A%co&o%
T'o "e E*a+o A,'-a*
i!eta E%ectroica
Li,a"'ra
A%,o"
T"#o cont$ol
T"#o %esconoci%o 5.6#5
0.311
I/. /.
ROCEDIMIENTO: RESULTADO:
For0'%a
:
A0i%a*a 1
C 2 D 3 4555 C
5milasa E
$. #11 F $."+$ x 1$$$
$.#11 5milasa E
192
l valor otenido de amilasa /ue 192, el cual nos indica &ue el resultado está dentro de los valores normales.
VI.
CONCLUSIÓN:
egn el cuadro de valores de re/erencia y nuestros resultados otenidos &ue /ue 192 (35dl), llegamos a la conclusión &ue la muestra (amilasa) está dentro de los valores normales en el suero, aun&ue tenemos &ue %acer re/erencia &ue
los valores no son exactos ya &ue %aido una cierta variación por las cantidades de agua, pero aun así nuestros valores otenidos están dentro de lo normal.
CONDICI!N CL&NICA 6ormal
SUERO G 1"$ #$$ a 1"$$
RECOMENDACIONES:
;ee saliva, en la &ue la ener
evitarse contaminaciones con ya &ue la actividad de amilasa saliva es 8$$ veces mayor del suero. cuidado en el proceso de manipulación ya &ue esto variar nuestros resultados.
podría
/II.
DISCUSIÓN:
La cocetraci *7rica "e a0i%a*a *e '*a "e 8or0a ,eera%i9a"a co0o !r'ea "e "etecci *i*te0tica !ara %a !acreatiti* a,'"a e e% !aciete co "o%or a"o0ia% a,'"o o e% "o%or "e e*!a%"a. ; A!ro3i0a"a0ete< e% =#$ "e %o* !aciete* co !acreatiti* a,'"a !re*eta ' a'0eto "e %a a0i%a*a *7rica. La a0i%a*a *7rica *'e%e a'0etar e %a !ri0era* 6>&* "e% !roce*o + !er0aece e%e?a"a "'rate 4 a @ "a*. La* ci8ra* retora a %a or0a%i"a" e @ a # "a*< *a%?o e e% ca*o 'e e3i*ta ecro*i* !acretica e3te*a< o*tr'cci ico0!%eta "e %o* co"'cto* o 8or0aci "e !*e'"o'i*te*. or e*te
0oti?o *' *e*ii%i"a" cae a ?a%ore* "e% @5$ a !artir"e %a* >=&* "e iicio "e% "o%or a"o0ia%.(#) ; U ?a%or 0a+or a #UIL &ar c'e*tioa%e 'a !acreatiti* a,'"a 'a cocetraci 0a+or a 4@5UIL &ace 0* !roa%e e% "ia,*tico + ?a%ore* @ ?ece* 0a+ore* "e %o or0a% %o e*ta%ece< *ie0!re 'e *e &a+a e3c%'i"o otro* !roce*o* 'e e%e?a %a a0i%a*a. A"e0* "e% !crea* *o ?ario* %o* r,ao* ca!ace* "e !ro"'cir a0i%a*a: %a* ,%"'%a* *a%i?a%e*< %a* tro0!a* "e Fa%o!io< %o* o?ario*< e% ite*tio "e%,a"o< e% !'%0< %a !r*tata + e% &,a"o. Si e0ar,o e %a !rctica< + e co"icioe* or0a%e*< *o%o e% !crea* + %a* ,%"'%a* *a%i?a%e* cotri'+e e 8or0a *i,icati?a a% 0atei0ieto "e %o* i?e%e* *7rico* "e e*ta e9i0a. Lo* ?a%ore* "e %a a0i%a*a e *'ero *o "e 'ti%i"a" *o%o !ara e% "ia,*tico< o ,'ar"a corre%aci co %a *e?eri"a" "e% c'a"ro< !or %o tato o tiee ?a%or !ro*tico.(#H) ; S' *e*ii%i"a" e* "e% =@$ < *' e*!ecici"a" "e% ==$ + *' ?a%or !re"icti?o !o*iti?o "e% #$.(#) ; La *i,'iete ta%a 0'e*tra %o* tra*toro* 'e !'e"e ,eerar 8a%*o* !o*iti?o* e e*ta !r'ea. ENFERMEDADES PANCREATICAS
acreatiti* crica Tra'0ati*0o !acretico Ccer "e !crea*
TRANSTORNOS PANCREATICOS
NO OTROS TRANSTORNOS ABDOMINALES
I*'ciecia rea% Le*i "e %a* ,%"'%a* *a%i?a%e* Ca. "e !'%0< e*8a,o< 0a0a< o?ario Macroa0i%a*70ia J'e0a"'ra* E0ara9o Tra'0ati*0o cerera%
;
Co%eci*titi* Litia*i* "e% co%7"oco %cera !er8ora"a I8arto ite*tia% eritoiti* Ae'ri*0a artico e!ato!ata crica A!e"iciti* a,'"a O*tr'cci ite*tia%
La* *i,'iete* *o *it'acioe* 'e !'e"e ,eerar 8a%*o* e,ati?o*: a) Si *e retra*a ("e 6 a # "a*) %a oteci "e %a 0'e*tra "e *a,re. ) Si e% tra*toro *'+acete e* 'a !acreatiti* crica e ?e9 "e 'a !acreatiti* a,'"a. c) re*ecia "e &i!ertri,%iceri"e0ia.
REFERECIA BIBLIOR!FICA: 1)
%ttps0es.scrid.comdoc1#+9$2+8H3I?I5-LI6I5 5?IL55
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%ttp0JJJ.Jienerla.com.arKademecum;ocumentosKademecum :"$espanolamilasa4$+aali&uidasp.pd/
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%ttps0JJJ.tuotromedico.comtemasamilasaensuero. %tm
4)
%ttp0med.unne.edu.arrevistarevista1+'41+'.%tm
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