ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
BAB I PENDAHULUAN LATAR LATAR BELAKANG BEL AKANG
Keamanan produk terutama pada makanan, minuman, kosmetik, sediaan obat obat atau atau obat obat trad tradis isio iona nall (jam (jamu) u) meru merupa paka kan n suat suatu u tunt tuntun unan an yang ang tela telah h dikemu dikemukak kakan an sejaak sejaak muncul munculnya nya ganggu gangguan an kesehat kesehatan an manusi manusiaa akibat akibat adany adanyaa cemaran mikrooorganisme. Produk yang tercemar mikroorganisme tersebut dapat memproduksi racun yang dapat menyebabkan timbulnya suatu penyakit. Kondisi mikrobiologis dari makanan dan minuman menetukan keamanan dan daya tahan makanan dan minuman itu sendiri. Beberapa bakteri yang dapat menyebabka menyebabkan n keracunan keracunan makanan makanan dan minuman, akan tetapi jumlah mikroba yang mampu menimulkan kombinansi keracunan bergantung kepada kepekaan individu dan virulensi bakteri tersebut serta kombinasi makanan dan minuman itu sendiri. Uji mikrobiologis suatu sediaan merupakan salah satu uji yang sangat penting untuk mengetahui
kualitas suatu sediaan. Makanan, minuman, obat
tradisional berasal dari alam yaitu dari hean, tumbuhan, mineral ataupun sediaan galeniknya. !leh karena didalam pengadaannya bahan"bahan tersebut mengalami proses pengangkutan dan penyimpanan dalam aktu yang cukup lama. #ehingga dalam proses tersebut dapat terjadi pertumbuhan mikroba didalamnya. Untuk mengetahui baha bahan baku, bahan tambahan maupun sediaan jadi tidak mengalami perubahan si$at serta bebas dari kontaminan mikroba, maka diperlukan uji mikrobiologis, meliputi pengujian angka lempeng total (%&'), dan
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
uji cemaran bakteri kapang. ika telah dilakukan uji"uji tersebut, dan tidak ditemukan bakteri dan kapang yang sesuai standar #*+, maka produk tersebut layak untuk dikonsumsi oleh masyarakat.
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Pengertian sediaan $armasi dalam Undang"Undang ini diatur dalam pasal ayat (-) yaitu, sediaan $armasi adalah obat, bahan obat, obat tradisional dan kosmetik, dimana sediaan berupa obat yaitu semua bahan tunggal atau campuran yang digunakan oleh semua makhluk untuk bagian dalam maupun bagian luar, guna mencegah, meringankan, mapupun menyembuhkan penyakit (#yamsuni, //0). Makanan, minuman, obat tradisional, sediaan non steril, serta kosmetik merupakan suatu sediaan yang berasal dari hean, tumbuhan, mineral, maupun dari 1at"1at kimia sintetik. Pada umumnya sediaan"sediaan tersebut, diproduksi oleh industri secara besar"besaran dan biasanya memakan aktu yang cukup lama dalam produksi, penyimpanan, distribusi dan akhirnya sampai ke tangan konsumen. adi kemungkinan dapat terjadi pertumbuhan mikroba di dalamnya. Mikroorganisme merupakan jasad hidup yang mempunyai ukuran yang sangat kecil, dan karena kecilnya itu sehingga tidak dapat diamati dengan kasat mata melainkan membutuhkan alat pembantu untuk melihatnya seperti mikroskop. 2alaupun demikian, jasad hidup tersebut mempunyai kekhususan dalam perkembangbiakannya. 3an diantara jenis"jenis mikroorganisme yang ada di bumi mempunyai karakter dan si$at tersendiri dalam melakukan pertumbuhan dan perkembangan sesuai dengan si$at"si$at yang dimiliki oleh masing"masing mikroorganisme. 3imana untuk pertumbuhannya sangat bergantung pada
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
mediumnya, (3jide, //4). Uji mikrobiologis adalah suatu uji yang digunakan untuk identi$ikasi jenis mikroorganisme yang meliputi kelompok organisme bakteri maupun cendaan dan untuk menghitung jumlah organisme (5ardia1, 664). %da beberapa pengertian dari pengujian mikrobiologis, yaitu 7 (3jide, //8) . %ngka lempeng total bakteri %ngka lempeng total baktri adalah bilangan yang menunjukkan jumlah koloni bakteri yang mencemari tiap gram ml produksi yang yang diuji. . %ngka lempeng total jamur (Kapang) %ngka lempeng total jamur kapang adalah bilangan yang menunjukkan jumlah koloni tiap gram ml sampai produk yang diperiksa. 4. Mikroorganisme indicator Mikroorganisme
indicator
adalah
suatu
mikroorganisme
yang
kehadirannya pada suatu produk merupakan indikasi baha produk tersebut telah tercemar oleh bakteri"bakteri pathogen yang berasal dari saluran pencernaan manusia. #ehingga member petunjuk baha kemungkinan terdapat juga cemaran bakteri"bakteri pathogen lainnya. -. Mikroorganisme patogen Mikroorganisme patogen adalah mikroorganisme yang menyebabkan terjadinya in$eksi. #ebagai contoh adalah bakteri"bakteri salmonella sp. 8. Mikroorganisme pembusuk
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
Mikroorganisme pembusuk adalah mikroorganisme yang menyebabkan terjadinya perubahan"perubahan pada produk makanan yang dicemari seperti bentuk, rasa dan bau pada makanan. Bahan makanan terdiri dari protein, karbohidrat, lemak, vitamin dan mineral. Bahkan makanan merupakan medium pertumbuhan yang baik bagi berbagai berbagai macam mikroorganisme. Mikroorganisme dapat membusukkan protein, mem$ermentasikan karbohidrat menjadikan lemak dan minyak berbau tengik. Meskipun banyak mikroorganisme tidak berbahaya bagi manusia, beberapa mikroorganisme pencemaran dapat mengakibatkan kerusakan, dan yang lain menimbulkan penyakit atau menghasilkan racun yang menyebabkan peracunan makanan. Beberapa mikroorganisme bersi$at menguntungkan, misanya dapat menghasilkan produk"produk makanan khusus seperti keju dan acar, keduanya enak dimakan dan tidak mudah usak. 3isamping itu mikroorganisme dapat dijadikan
sebagai makanan tambahan bagi manusia dan
hean.
#esungguhnya, mikroorganisme merupakan sumber makanan pilihan yang menarik (+rianto, //9). Berbagai macam uji mokrobiologis dapat dilakukan terhadap bahan pangan,
meliputi uji kuantitati$ mikroba untuk menentukan daya tahan suatu
makanan, uji kualitati$ bakteri patogen untuk menenetukan tingkat keamanan dan uji indikator untuk menentukan tingkat sanitasi makanan tersebut. Pengujian yang dilakukan terhadap tiap bahan pangan tidak sama tergantung berbagai $aktor, seperti jenis dan komposisi bahan pangan, cara pengepakan dan penyimpanan
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
serta
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
komsumsinya,
kelompok
konsumen
dan
berbagai
$aktor
lainnya
(Buckle,///). Pengukuran kuantitati$ populasi mikroba sering kali amat diperlukan di dalam berbagai macam penelaahan mikrobiologis. Pada hakikatnya terdapat macam pengukuran dasar, yaitu penentuan jumlah sel dan penentuan massa sel. Pengukuran jumlah sel biasanya dilakukan bagi organisme bersel tunggal (misalnya bakteri), sedangkan penentuan massa sel dapat dilakukan tidak hanya bagi mikroorganisme bersel tunggal tetapi juga bagi organisme ber$ilamen (misalnya kapang) . Untuk menghitung secara kuantitati$ mikrobiologis suatu bahan dapat dilakukan atas beberapa kelompok yaitu 7 . Perhitungan jumlah sel a. :itungan mikroskopik b.
:itungan caan
c.
MP* (Most Probable *umber) . Perhitungan massa sel secara langsung a. ;olumetrik
b.
c.
Kekeruhan (turbidimetrik) 4. Perhitungan massa sel secara langsung a. %nalisis komponen sel (protein, 3*%, %'P dan sebagainya) b. %nalisis produk katabolisme (metabolit primer, sekunder atau panas)
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
c. %nalisis konsumsi nutrient (karbon, nitrogen, oksigen, asam amino, mineral, dan sebagainya). Pemeriksaan mikrobiologis terhadap bahan makanan termasuk susu dan produk susu dapat memberikan in$ormasi mengenai mutu bahan mentahnya, keadaan kebersihan pada pengolahannya, dan kee$ekti$an metode pengaetannya. 3alam hal makanan yang menjadi basi atau busuk, penyebab kerusakan itu dapat diidenti$ikasi= setelah penyebab kerusakan itu ditemukan, maka sumber pencemarannya serta keadaan yang memungkinkan terjadinya kerusakan itu dapat ditelusuri. Kemudian dapat diadakan usaha perbaikan untuk mencegah terjadinya kerusakan selanjutnya (+rianto, //4). Prosedur"prosedur mikrobiologis untuk pemeriksaan bahan makanan meman$aatkan teknik"teknik mikroskopik dan metode"metode pembiakan. Bermacam"macam media selekti$dan de$erensial digunakan secara ekstensi$ untuk memudahkan isolasi dan perhitungan tipe"tipe mikroorganisme tertentu. Macam pemeriksaan yang dilakukan ditentukan oleh tipe produk pangan yang akan diperiksa dan tujuan pemeriksaan (;olk, 66/). Produk makananobatobat tradisional (jamu) dikatan rusak secara mikrobiologis apabila dijumpai mikrooorganisme patogen dalam konsentrasi rendah, mikroorganisme yang berpotensi menjadi patogen dalam konsentrasi tinggi, metabolit mikroorganisme toksik yang tidak hilang dengan kematian mikrooorganisme kontaminannnya, serta adanya kerusakan $isik ataupun kimia pada produk obat akibat pertumbuhan mikrooorganisme, yang ditandai oleh adanya perubahan bentuk, arna, rasa ataaupun bau (Pratii, //9).
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
Pengujian angka lempeng total adalah pengujian yang dilakukan untuk menghitung angka bakteri aerob meso$il yang terdapat dalam suatu sampel (>adji, //0). %ngka kapang"khamir bertujuan untuk menentukan jumlah koloni kapang dan khamir yang terdapat dalam suatu sampel. Pada prinsipnya, pengujian ini
menggunakan metode yang
hampir sama
dengan penentuan %&',
hanyaberbeda pada media pembenihan yang digunakan (>adji, //0). ?oli$orm adalah golongan bakteri yang terdiri atas bakteri $ekal dan bakteri non $ekal. Prinsip penentuan angka bakteri coli$orm adalah adanya pertumbuhan bakteri coli$orm yang ditandai dengan terbentuknya gas pada tabung durham setelah diinkubasi pada media yang sesuai (>adji, //0). Uji MP* ( Most Probable *umber) digunakan jika jumlah yang diharapkan
relative
rendah
antara
lain
kurang
dari
sampai
//
mikroorganismem&. Prosedur ini menggunakan tabung ganda dari kultur medium biasanya 4 sampai 8 dengan 4 perbedaan volume dari sampel, misalnya 4 tabung asing"masing diinkulasi dengan /, m&, dai tabung berikutnya /,/ m& dan 4 deret tabung berikutnya /,// m&. ika konsentrasi dalam sampel adalah range yang ditujukan seperti diatas, seharusnya pada tabung yang menerima inokulasi bakteri tidak ada mikroorganisme yang hadir. +ni akan menjadi steril setelah diinkubasi, perbandingan dari tabung positi$ yang dilaporkan untuk tiap volume sampel dan hasilnya dibandingkan dengan tabel standart MP* dari organisme per m& (atau per // m& dari sampel murni). Prosedur ini biasanya digunakan dalam
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
air , makanan, dan produk indusry dibandingkan pada industry $armasi (5ardia1, 664). 'ekniK MP* adalah metode statistic yang berguna dalam menentukan konsentrasi rendah dari organisme (kurang dari // gram atau m&). 3alam metode ini sampel secara seri dilarutkan sehingga inokula akan kadang"kadang tapi tidak selalu mengandung organisme hidup pada setiap pelarutan volume ganda dipindahkan ke tabung ke 4,8, atau ke / dari medium cair yan diujikan. 'abung diinkunbasi dan hasilnya dievaluasi. Berdasarkan test ini, tabung yang positi$ diidenti$ikasi dengan kekeruhan (pertumbuhan) tunggal atau kombinasi dengan produk gas dan asam (Pelc1ar, 6@9).
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332
ANALISIS MIKROBIOLOGI SEDIAAN FARMASI
DAFTAR PUSTAKA
Buckle, K. %., dkk., ///., Ilmu Pangan., 3iterjemahkan oleh %diono dan :ari Purnomo., U+ Press., akarta. 3jidje, M.*., #artini. //@. Analis Mikrobiologi Farmasi, &aboratorium Mikrobiologi 5armasi, urusan 5armasi, 5. M+P%, U*:%s, Makassar. 3jide, M. *. #artini. //8. Dasar-Dasar Mikrobiologi Universitas :asanuddin, Makassar. .,
3yana, Aarasati, //-, Analisis Mikrobiologi Bahan Pangan, Universitas :asanuddin, Makassar. Koes, +rianto., //9, Mikrobiologi Jilid 2, asama 2idya, Bandung. 2aluyo, &ud. //-. Teknik Metode Dasar dalam Mikrobiologi. UMM Press7 Malang
VERA FEBRIANTI
150 2014 0332