UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA . FACULTAD DE ZOOTECNIA . DEPARTAMENTO ACEDÉMICO DE CIENCIAS PECUARIAS .
DETERMINACION DE CONCENTRACION PROTEICO A PARTIR DE PUNTO ISOELECTRICO. ISOELECTRICO.
CURSO
:
BIOQUIMICA NUTRICIONAL.
ALUMNA
:
EZPINOZA GASPAR, Rosmeri. Rosmeri.
DOCENTE
:
Ing. PEREZ MENDOZA, Elvira.
SEMESTRE
:
2017-I.
Tingo María – 2017
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I.
INTRODUCCIÓN
Las proteínas tienen un pH característico al cual su carga neta es cero. A este pH se le denomina punto isoeléctrico (PI). En el punto isoeléctrico se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas por lo que la proteína presenta su máxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregación. La palabra caseína proviene del latín caseus que significa "queso". La caseína es una proteína de la leche, del tipo fosfoproteína, que se separa de la leche l eche por acidificación y forma una masa blanca. Se emplea para fabricar pinturas especiales y en el apresto de tejidos, la clarificación de vinos, la elaboración de preparados farmacéuticos y la fabricación de plásticos, caseína casera (para la elaboración de fórmulas hospitalarias). Representa cerca del 77% al 82% de las proteínas de la leche. Cuando coagula con renina, es llamada paracaseína, y cuando coagula a través de la reducción del pH es llamada caseína ácida. Cuando no está coagulada se le llama caseinógeno. El punto Isoeléctrico (o pH isoeléctrico) de la caseína es 4.6. A este pH, la l a caseína se encuentra en su punto de menos solubilidad, debido a que hay menos repulsiones intermoleculares, por lo que precipita.
Objetivos: -
Determinar el punto isoeléctrico de la caseína.
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II.
REVISION BIBLIOGRAFICA BIBLIOGRAFICA
2.1. FUNDAMENTO TEÓRICO. 2.1.
PROTEÍNAS DE LA LECHE Las proteínas lácteas son las que hace mucho más tiempo ha consumido
el hombre. Así mismo, debido a la facilidad con que les pueda aislar de la leche, algunas poseen carácter hidrofílico y otro carácter hidrofóbico. Han sido las proteínas más estudiadas e incluso se conoce la estructura primaria de casi todas, pero debido a la gran variedad estructural y diversas propiedades fisicoquímicas que presentan de acuerdo a cada especie su descripción comparativa es muy complicada. 2.2. CASEINA La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina, ácido pantoténico y vitaminas A, D y K), minerales (calcio, potasio, sodio, fósforo y metales en pequeñas cantidades), proteínas (incluyendo todos los aminoácidos esenciales), carbohidratos (lactosa) y lípidos. Los únicos elementos importantes de los que carece la leche son el hierro y la vitamina C. Las proteínas se pueden clasificar de manera general en proteínas globulares y fibrosas. La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca. Las fosfoproteínas son un grupo de proteínas que están químicamente unidas a una sustancia que contiene ácido fosfórico. En la caseína la mayoría de los grupos fosfato están unidos por los grupos hidroxilo de los aminoácidos serina y treonina. La caseína en la leche se encuentra en forma de sal cálcica (caseinato cálcico). La caseína representa cerca del 77% al 82% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7% en composición de la leche líquida. La caseína está formada por alpha (s1), alpha (s2)-caseína, ß-caseína, y kappa-caseína formando una micela o unidad soluble. Ni la alfa ni la beta caseína son solubles en la leche, solas o
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2.3. PUNTO ISOLÉCTRICO Indica que todas las macromoléculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una característica de las proteínas y otros biopolímeros es que la carga toral que adquieren depende del pH del medio. Así, todas las proteínas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminoácidos que la componen, así como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la proteína de forma covalente (irreversible).
2.4. EL ÁCIDO ACÉTICO. El ácido metilencarboxílico o ácido etanoico, se puede encontrar en forma de ion acetato. Éste es un ácido que se encuentra en el vinagre, siendo el principal responsable de su sabor y olor agrios. Su fórmula es CH3-COOH (C2H4O2). De acuerdo con la IUPAC se denomina sistemáticamente ácido etanoico.
2.5. ÁCIDO CÍTRICO. El Ácido Cítrico es un ácido orgánico que no debe confundirse con la Vitamina C, que es ácido ascórbico. Pese a este pequeño malentendido, que suele ser común, lo importante es saber que el Ácido Cítrico se encuentra en muchas frutas cítricas: piña, grosella, lima, ciruela, limón, durazno, naranja y toronja.
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III.
MATERIALES Y METODOS
3.1. LUGAR. La práctica sobre reconocimiento de materiales y equipos equ ipos de laboratorio se realizó en la facultad de Zootecnia; ubicada en la Universidad Nacional Agraria de la Selva(UNAS), ciudad de Tingo Maria, Distrito de Leoncio Prado, Departamento de Huánuco, su nivel de altitudinal alcanza a los 647 m.s.n.m con una temperatura promedio anual de 18°C a 35°C y humedad relativa de 77,5% con una precipitación anual de 3000 mm. 3.2. FECHA. La práctica se llevó a cabo el día martes 06 de junio del 2017 desde las 11:001:00 horas de la tarde.
3.3. MATERIALES: -
Leche fresca.
-
Leche en polvo.
-
Leche en tarro.
- Limón. -
Vasos precipitados.
-
PH metro.
- Gaza. -
Placa Petri.
- Estufa. - Piceta. - Termómetro.
REACTIVOS:
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3.4. METODOLIGIA. El método utilizado por la Ing. Pérez Mendoza, Elvira fue descriptivo, oral y escrito, es decir, explico la determinación de concentración proteico a partir del punto isoeléctrico. PROCEDIMIENTO 1.- Pesar las placas Petri al vacío. 2.- En los vasos precipitados de 500 ml vaciar el contenido de la leche luego colocarlo en la cocina eléctrica donde se hará la medición de diferentes grados de temperatura (37°-60°-80°c). 3.- Se evaluará el PH de la leche en el punto isoeléctrico. 4.- Comparar el contenido proteico de cada una muestra (limón, ácido acético y ácido cítrico). 5.- Filtrar y colocar el contenido proteico en la placa Petri, luego pesarlo y ll evarlo a la estufa durante 20 h.
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V.
DISCUSIÓN
Según los autores la proteína de caseína es una fosfoproteína que se encuentra en la leche y en algunos de sus productos derivados fermentados, tanto como el queso. La proteína de caseína es un conjunto compuesto por diversas proteínas por lo que es difícil f ijar una definición. No obstante, gran parte de las proteínas que encontramos en lo que se denomina caseína posee un atributo común: acidifica la leche a PH 4,6. Debido a esto ala caseína también se le suelen calificar como proteína insoluble de la leche. A disimilitud de gran cantidad de proteínas, hasta de la leche, la proteína de caseína no precipita por acción de calor. En cambio, lo hace por acción de una enzima proteasa que se encuentra situada en el estómago de los mamíferos denominada renina e integra un precipitado llamado para caseína.
VI. -
RECOMENDACIONES
Recomiendo filtrar más de una vez si es posible porque porque los componentes podrían quedar en la solución o disolvente con el que se trabaja.
-
Trabajar ordenadamente y no ocasionar disturbio.
-
Colocar las muestras obtenidas cuidadosamente cuidadosamente a la estufa.
VII.
CONCLUSIONES
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VIII.
-
BIBLIOGRAFIA
González-Soto, E.; L. L. Bucio-Ortiz; P. Damián-Matzumura; Damián-Matzumura; F. Díaz Díaz de LeónSánchez; E. Cortés-Barberena; L.J. Pérez-Flores. (2009) Manual de bioquímica 1. 3ª ed. México.
-
Nelson, D.L. y M.M. Cox (2000) Lehninger Principios de Bioquímica. Bioquímica. 4 ed. Ed. Worth. EUA.
-
Guarnizo, A. (2003). Experimentos Experimentos de química orgánica. orgánica. Colombia: Elizcom.
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IX.
ANEXOS
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