DETERMINACION DE AMINOACIDOS TERMINALES CON GRUPO ALFA AMINO LIBRE. METODO DE SANGER

4QM1 SECCION 1

*LOPEZ RAMIREZ STEPHANY

*MENDOZA GARCES DANIA FERNANDA

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS DEPARTAMENTO DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA BIOQUIMIC A DR. GUILLERMO GUILL ERMO CARVAJAL SANDOVAL SANDOVAL PRACTICA N°1: DETERMINACION DE AMINOACIDOS TERMINALES CON GRUPO ALFA AMINO LIBRE. METODO DE SANGER *INTRODUCCION En el pr!e"#$#en% p&r& e'%&(le!er l& 'e!)en!#& &$#n!#"+ 'n $), #$pr%&n%e' l' $-%"' )'&"' p&r& #"en%##!&r l' re'%' &$#n!#"' %er$#n&le'. El pr#$er $-%" /%#l p&r& "e%er$#n&r el N0%er$#n&l "e l' pl#p-p%#"' )e "e'!r#% pr S&ner+ 2)#en en!n%r3 2)e el r)p &l& &$#n l#(re "e l' p-p%#"'+ 2)e n 4&n !&p%&" pr%ne'+ re&!!#n&n !n el 5+60 "#n#%rl)r(en!en "#n#%rl)r(en!en 7DNFB8 , r$& "er#9&"' 5+60 "#n#%ren#l&"'. C)&n" %&le' "er#9&"' "e )n p-p%#" 'e '$e%en & 4#"rl#'#' !n Cl ; N+ %"' l' enl&!e' pep%<"#!' 'e 4#"rl#=&n+ per el enl&!e en%re el r)p 5+60"#n%ren#l 5+60"#n%ren#l , el r)p &l& &$#n "el &$#n!#" N0 %er$#n&l e' rel&%#9&$en%e e'%&(le ren%e & l& 4#"r3l#'#' !#"&. Pr l !n'#)#en%e+ el 4#"rl#=&" "el p-p%#" "#n#%ren#l&" !n%#ene %"' l' re'%' &$#n!#"' "e l& !&"en& pep%<"#!& en r$& "e &$#n!#"' l#(re'+ & e>!ep!#3n "el re'% N0%er$#n&l+ el !)&l &p&re!e !$ "er#9&" 5+60"#n#%ren#l&"+ "e !lr &$&r#ll. E'%e re'% $&r!&" p)e"e 'ep&r&r'e !#l$en%e "e l' &$#n!#"' n ')'%#%)#"' e #"en%##!&r'e pr !$p&r&!#3n !r$&%r&<& !n l' "er#9&"' "#n#%ren#l&"' !n!#"' "e l' "#eren%e' &$#n!#"'. *OBJETIVOS 0El &l)$n )%#l#=&r& el $-%" "e S&ner p&r& #"en%##!&r l' &$#n!#"' "el r)p &l&0&$#n %er$#n&l "e l& 4e$l(#n&. *METODOLOGIA 1. Are&r en )n %)( ?@ "e e$l(#n& , 5.6 $L "e N&CO? 6.5. 5. A&"#r 5 $L "e DNFB &l . A#%&r pr )n& 4r& , $&n%ener )n p "e en%re 0. ?. A)'%&r A)'%&r el p pr "e(& "e ? !n 15 %&' "e Cl ?N. 6. E>%r&er ? 9e!e' l& ')'pen'#3n !n  $L "e -%er '&%)r&" !n 'l)!#3n &!)'& "e FeSO6. . E9&pr&r l' re'#")' "e -%er en (& $&r<&. ;+ Cen%r#)&r & ?@@@ rp$ ")r&n%e 1$#n. El#$#n&r el '(ren&"&n%e. . A&"#r  $L "e Cl ; N , !&len%&r en &)%!l&9e ?4 & 1 l( pr p)l&"& !)&"r&"& "e pre'#3n.

. Re!er el !n%en#" "el %)( !n  $L "e &)& en )n 9&' "e pp. E>%r&er ? 9e!e' el 4#"rl#=&" !n  $L "e -%er. P&'&r & )n 9&' "e pp. . C&len%&r l' e>%r&!%' e%-re' , enr#&r. A&"#r @.$L "e &!e%n& , re"#'l9er  1@. Re&l#=&r !r$&%r&<&. *INTERPRETACION DEL PROCEDIMIENTO De%er$#n&!#3n "el &$#n!#" N0%er$#n&l "e l& pr%e%r&er l& &'e e%-re& 7p&' 68 'e el#$#n& el DNFB 2)e n re&!!#n !n el N0%er$#n&l. IDROLISIS DE LA DNP0 PROTEINA L& 4#"rl#'#' 'e lle9& lle9& &!&( !n el Cl ;N+ el !)&l r$pe %"' l' enl&!e' pep%<"#!'. Per 'e $&n%#ene el enl&!e en%re el "#n#%ren#l , el r)p &$#n. T" e'% (& l&' !n"#!#ne' "e l& &)%!l&9e 7? 4 , 1 l( "e pre'#3n8 pr  2)2)- 'e ne!e ne!e'# '#%& %& $' $' ener ener< <& & p&r& p&r& r$p r$per er "#!4 "#!4' ' enl&!e'. IDENT IDE NTIFI IFICAC CACION ION DEL RE RESI SIDUO DUO N0T N0TER ERMIN MINAL AL POR CROMAT CROMATOGRAFIA OGRAFIA EN PA PAPEL. PEL. •

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*RESULTADOS COMPUESTO DNP-Asp DNP-Val

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@.; @.;;

4QM1 SECCION 1 DNP-Glu

*LOPEZ RAMIREZ STEPHANY @.15

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PROBLEMA

@.;5@ , @.65@

* ANALISIS DE RESULTADOS En (&'e & l re&l#=&" en l& pr!%#!&+ l& re&!!#3n "e '&ner n' &,)"3 & #"en%##!&r el r)p H0&$#n %er$#n&l "e l& 4e$l(#n&+ pn#en" en e9#"en!#& l& !lr&!#3n &$&r#ll& !&r&!%er<'%#!& "e e'%& pr)e(&+ e'%& r&!#&' &l pr!e' #n%er$e"# ll&$&" D#n#%ren#l&!#n+ 2)e e' l& &"#!#3n "el r)p D#n#%ren#l &l &$#n %er$#n&l "e l& pr%e
*MENDOZA GARCES DANIA FERNANDA

*CONCLUSIONES El $-%" "e S&ner e' $), /%#l p&r& #"en%##!&r 'l )n &$#n!#"' &l& &$#n %er$#n&l "e l&' !&"en&' "e l&' $l-!)l&' "e l&' pr%e
*BIBLIOGRAFIA *Le4n#ner+ Al(er%+ Nel'n+ D&9#" L. 71?8. Pr#n!#p#' "e B#2)<$#!&. Se)n"& E"#!#3n+ E"#!#ne' O$e&+ B&r!eln&+ E'p&&.