Informe laboratorio “EXTRACCIÓN DE ADN”
Integrantes: Mario Álvarez Stefania Rojas Catalina Tapia Curso: 4 medio B Fecha: 26 de Abril de 2016
Índice 1
Introducción: ________________________________________________pág. 3 Materiales:__________________________________________________pág.4 Procedimientos:______________________________________________pág.4-5 Resultados:__________________________________________________pág.5-6 Desarrollo de preguntas:_______________________________________pág.6-7 Conclusión:__________________________________________________pág.8
INTRODUCCIÓN 2
El ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico, este constituye el material genético de los organismos, además es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados. El ADN es la sustancia química donde se almacenan las instrucciones que dirigen el desarrollo de un huevo hasta formar un organismo adulto, que mantienen su funcionamiento y que permite la herencia. Es una molécula de longitud gigantesca, que está formada por agregación de tres tipos desustancias: azúcares, llamados desoxirribosas, el ácido fosfórico, y bases nitrogenadas de cuatro tipos, la adenina, la guanina, la timina y la citosina. Los azúcares y los ácidos fosfóricos se unen lineal y alternativamente, formando dos largas cadenas que se enrollan en hélice. Las bases nitrogenadas se encuentran en el interior de esta doble hélice y forman una estructura similar a los peldaños de una escalera. Se unen a las cadenas mediante un enlace con los azúcares. Cada peldaño está formado por la unión de dos bases, formando los pares de bases anteriormente mencionados; pero estos emparejamientos sólo pueden darse entre la adenina y la timina o entre la citosina y la guanina.
Este experimento de laboratorio se lleva a cabo con el objetivo de demostrar varias interrogantes con respecto al ADN, nuestros objetivos son (1) Utilizar técnicas básicas para extraer el ADN de un tejido vegetal y animal, para así poder (2) Observar la estructura fibrilar del ADN y con esto (3) Aprender a extraer ADN de cosas básicas como lo son las frutas, verduras o carnes.
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Materiales -
2 trozos de tela para poder filtrar (gaza) 1 juguera o minipimer Alcohol de 96° (helado) Sal de mesa Agua destilada lava lozas líquido 1 plátano (nuestro tejido vegetal) 1 pana de pollo (nuestro tejido animal) Tubos de ensayo 1 embudo 2 Vasos precipitado 1 varilla de vidrio
Procedimientos: 1) En la minipimer verter 20 ml de agua destilada y luego poner el tejido vegetal o animal y revolver (para formar una especie de papilla) 2) En un vaso precipitado mezclar 10 ml. de lava lozas con 10 gr. de sal de mesa y luego agregar 20 ml. De agua destilada. 3) Agregar al vaso precipitado la mezcla homogénea del tejido vegetal o animal y revolver todo (la mezcla del lava lozas con la sal el agua destilada y la mezcla del tejido animal/vegetal) suavemente con la varilla de vidrio durante 5 minutos sin generar espuma. 4) Filtrar la mezcla obtenida anteriormente en un vaso a través del embudo con la gaza o tela para filtrar, esto durante 5 minutos aproximadamente. 5) Distribuir la mezcla filtrada en los tubos de ensayo (1/3 de la capacidad de estos). 6) Agregar un volumen equivalente de alcohol de 96° bien frío. Esta etapa es crucial, y se debe inclinar levemente el tubo y muy lento 4
y despacio dejar escurrir el alcohol sobre la mezcla de manera de formar una segunda capa por encima de la mezcla. 7) Esperar 10 minutos sin mezclar las capas y observar el ADN que precipita en la interface de las capas y llega hasta la superficie. 8) En último lugar ordenar y dejar todo limpio. Resultados
(Imagen 1 ) Extracción ADN :pana de pollo(izquierda) y plátano (derecha)
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En nuestro experimento podemos observar claramente como el ADN precipito tanto en la pana de pollo como en el plátano (imagen 1).Además se notan las interfaces donde se ven claramente distintas
capas. Se puede observar el precipitado
blanco del ADN en la capa de alcohol. En el tubo de ensayo donde ese encuentra la extracción de ADN del plátano, el ADN tiene apariencia de una sustancia mucosa blanca y filamentosa, una apariencia alargada y ondulada, se ven 3 capas la de más abajo es de un color crema, la que le sigue es más amarilla y finalmente se encuentra la capa del alcohol donde se encuentra el ADN precipitado. Mientras que en
el
tubo de ensayo de la pana de pollo el ADN se ve filamentoso, con un color
más
rosa
y
en
mayor
cantidad que en el del plátano, se ve mucho más compacto, también se aprecian 3 capas donde la de abajo es de un color rosa o piel, le sigue
una
amarillenta manchitas
capa
de
con
color
más
pequeñas
blancas
y
posteriormente viene la capa de alcohol con el ADN precipitado.
Explicación de procesos -¿Para qué se utiliza el lava lozas? El lava lozas utilizado en el experimento tiene como función destruir las membranas celulares del tejido que estemos utilizando, ya que el lava 6
lozas disuelve las grasas, que es el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las células ( recordar que las membranas están formadas de lípidos específicamente de fosfolípidos) Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. -¿Para qué se utiliza la sal? Debido a su estructura química la sal actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que se separen más fácil del ADN. También ayuda a desintegrar la membrana plasmática. -¿Para qué se utiliza el alcohol? Se usa alcohol para que el ADN precipite en la interface entre el alcohol y el agua permitiéndonos ver claramente el ADN. Además el alcohol permite que el ADN se separe de otros componentes y bajen a la solución acuosa permitiendo ver mucho más clara las fibras de ácido desoxirribonucleico. -¿Por qué se muele el tejido vegetal o animal? El tejido vegetal y animal se muele para que así las células se rompan y pueda salir el ADN que se encuentra adentro de ellas, así rompiendo paredess celulares, membrana y organelos que protegen a la gran molécula de ADN. -¿Todos los seres vivos poseen ADN?
SÍ, todos los seres vivos poseen ADN puesto que todos los seres vivos estamos compuestos de células y toda célula posee material genético ya sea una bacteria, planta o animal. Además es la molécula que controla todos los procesos vitales para los seres vivos, además de ser el principal constituyente de los cromosomas celulares. -Compara las preparaciones obtenidas a partir de diferentes frutas o verduras. ¿Tienen todas las mismas cantidades de ADN? 7
No, todas tienen distintas cantidades de ADN y lo pudimos apreciar en los tubos de ensayo de nuestros compañeros en donde la cantidad de ADN precipitado de la zanahoria (imagen 4)no era igual a la cantidad de DNA del plátano de nosotros(imagen 3) y lo mismo pasaba con la lechuga(imagen 2). La cantidad de ADN de las muestras en los tubos de ensayo de la zanahoria y la lechuga eran menor que la cantidad de material genético del plátano.
(Imagen 2) Extracción (Imagen 3) Extracción (Imagen 4) Extracción de
de
de
ADN de Lechuga CONCLUSIÓN
ADN del Plátano
ADN de la Zanahoria
Gracias a este experimento logramos comprobar la presencia de ADN en las células de un tejido vegetal y animal en nuestro caso el plátano y la pana de pollo , comprobando que pueden ser aisladas del resto de las sustancia. Y que para lógralo podemos utilizar simples utensilios de uso domésticos. Además aprendimos que para poder aislar el ADN de una célula vegetal primero debemos romper la pared celular, luego la 8
membrana plasmática y finalmente la carioteca(a través del lava lozas , la minipimer y la sal) obteniendo el ADN disperso en los restos de la célula original. En resumen observamos cómo de manera fácil podemos conseguir aislar la molécula más protegida por los seres vivos: el ADN. Por otro lado, también pudimos analizar cómo el resto delas moléculas: proteínas y grasas quedan en suspensión separadas del ADN.
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