Efecto de la concentración de enzima y del pH sobre la velocidad de reacción

Gamboa Contreras Alain Pérez Navarro Gabriel "e##i$n 4 Razo Vázquez Dalia Lupita

Grupo: 4Q!

%N"&%&'&( P(L%&)CN%C( NAC%(NAL *"C'*LA NAC%(NAL D* C%*NC%A" +%(L,G%CA" Laboratorio -e +ioqu.mi#a “EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE ENZIMA Y DEL pH SOBRE LA VELOCIDAD DE REACCIÓN

INTRODUCCIÓN

vez2 vez2 manten mantenien ien-o -o los -emás -emás parám parámetr etros os #onstantes

*N/%A" 0 C%N)&%CA *N/%1&%CA **C&( D*L p8 Las enzimas son molé#ulas molé#ulas -e naturaleza naturaleza  &o-as  &o-as las enzimas poseen un valor -e p8 protei#a2 que #atalizan una 3ama amplia -e $ptimo en el #ual la a#tivi-a- es má;ima< rea# rea##i #ion ones es biol biol$3 $3i# i#as as *sta *stass molé molé#u #ula lass por por en#i en#ima ma o por por -eba -eba=o =o -e este este p8 la aumentan aumentan #onsi-era #onsi-erablem blemente ente la velo#i-a velo#i-aa#ti a#tivi vi-a -a- -ism -ismin inu5 u5e e brus brus#a #ame ment nte e Los Los -e rea## rea##i$n i$n22 -ismin -isminu5e u5en-o n-o la ener3 ener3.a .a -e e6e#to e6e#toss son: son: -esnat -esnatura uraliz liza#i a#i$n $n prote protei#a i#a22 a#tiva#i$n 5 6a#ilitan-o la trans6orma#i$n -e #amb #a mbio io en la ioni io niza za#i #i$n $n -e 3rup 3r upos os -e sustrato en uno o varios pro-u#tos pro-u#tos resi-uos -e aminoá#i-os  &ubo No +lan PR(+L*A" Las enzimas  &ubo impli#a-os en la #o poseen una   & ? ! @ 4  B #atál #atálisi isis2 s2 #ambi #ambio o en la sele#tivi-a- a un "a#arosa        ioniza#i$n -e 3rupos -el !  mlE sustrato sustra sustrato2 to2 mo-i7# mo-i7#a#i a#i$n $n esp espe#. e#.7#o 7#o 5 la Re3ula-or en la a7ni-a- -e la -e a#tivi-a-e p8F p8 p8 p8 p8 p8 p8 enzima 5 el sustrato #itratos F F F F F F  ésta éstass se puepue-e e !   @ 4  B  C(NC*N&RAC%,N D* mo-i7#ar #on mlE *N/%A -iversos 6a#tores A3ua mlE        #omo la Prein#uba  minutos a temperatura ambiente La velo# lo#i-ai-a- -e una una #i$n temp temper erat atur ura2 a2 el rea## rea##i$n i$n enzimá enzimáti# ti#a a es *nzima p82 la ? #on#entra#i$n -e        -ire#tamente mi#ro3ra propor#ional a la la enzi enzima ma 5 -el -el mos H mlE #on# #on#e entra ntra##i$n -e la sustrato2 %n#uba#i$  minutos a temperatura ambiente enzima a #ualquier utilizan-o n # o n # e n t r a # i $ n -e in9ibi-ores2 in9ibi-ores2 et#  sustrato Cuan-o ml aumenta la #anti-a- -e La #inéti#a @2I enzima enzima22 las molé#u molé#ula lass DN" enzimáti#a %na#tiva#i J  ml @2I DN" a#tuarán abar#a el estu-io $n  in-epen-i in-epen-ientem entemente ente en -e la velo velo#i #i-a -aml solu#i$n para -e las rea##iones enzi t r a n s 6 o r m a r m ás enzimáti#as2 ma sustrato en un intervalo #onsi-eran #onsi-eran-o -o los Desarrollo  minutos a K!  C -e tiempo 6a#t 6a#tor ores es que que la -e #olor Colo#ar en baMo -e 9ielo 5 -iluir #on a6e#tan 5 Dilu#i$n OBJETIVOS ! ml -e a3ua -estila-a requ requie iere re que que se Leer en un espe#tro6ot$metro espe#tro6ot$m etro a 4 nm reali#e el estu-io >"ometer er una rea## rea##i$n i$n -e un 6a#tor a la Absorben ! ! 4 4 K ?  >"omet enzimáti#a a a -i6erente -i6erentess #ia ! @? !  !? ?@ ? enzimáti# AzO#ar  ?? ?! K @? !K ! re-u#tor    B  E   ?? ?!  Velo#i-a- @? ! K !   B K '%E

Grupo: 4Q! valores -e p82 para as. observar el #ambio sobre la ioniza#i$n -e la enzima 5 -el sustrato2 mani6están-olo -e una 6orma 3rá7#a >Demostrar -e 6orma e;perimental 5 me-iante una 3rá7#a que una rea##i$n enzimáti#a está #on-i#iona-a -ire#tamente por la #on#entra#i$n -e enzima

Gamboa Contreras Alain Pérez Navarro Gabriel "e##i$n 4 Razo Vázquez Dalia Lupita

RESULTADOS (pH)

V*L(C%DAD -e rea##i$n2 se requiere trans6ormar nuevamente esos -atos -e #on#entra#i$n2 en uni-a-es interna#ionales o uni-a-es -e invertasa *sto se obtiene -ivi-ien-o los moles -e azO#ar re-u#tor entre el nOmero -e pro-u#tos -e la 9i-r$lisis por el tiempo -e in#uba#i$n -e la rea##i$n Para este #aso en parti#ular2 la 6$rmula es la si3uiente:

Resultados (concentac!"n de en#!$a)

'ni-a-es -e invertasa F moles -e azO#ar re-u#tor H ! pro-u#tosE  minutos -e in#uba#i$nE

DISCUSIÓN La #urva tipo nos permite interpolar los -atos -e absorben#ia que obtenemos -e los problemas 5 trans6ormarlos en moles -e azO#ar re-u#tor2 pero2 #omo se está realizan-o el estu-io -e la inuen#ia -el p8 5 -e la #on#entra#i$n -e la enzima sobre la +lan#  &ubo No PR(+L*A" o   & ? ! @ 4  "a#arosa       !  mlE Re3ula-or -e a#etatos         p8 4 mlE A3ua mlE  K   B  Prein#uba#i  minutos a temperatura ambiente $n *nzima ?  ? ! @ 4  mi#ro3ram os H mlE %n#uba#i$n  minutos a temperatura ambiente  ml @2I %na#tiva#i$ DN"  ml @2I DN" n J  ml enzi ma Desarrollo  minutos a K!  C -e #olor Colo#ar en baMo -e 9ielo 5 -iluir Dilu#i$n #on ! ml -e a3ua -estila-a Leer en un espe#tro6ot$metro a 4 nm Absorben#i @K 4!  B BB B a  B B   AzO#ar re-u#tor ?? 4K @   4 E Velo#i-a- ?? 4K @   4 '%E   Con#entra# i$n -e   ? ? ! ! enzima

p8 Las enzimas2 al ser molé#ulas -e naturaleza protei#a2 están sus#eptibles a los #ambios -e p82 el #uál pue-e inuir en las intera##iones i$ni#as -e la prote.na Las enzimas poseen un sitio a#tivo2 el #ual es espe#.7#o para un sustrato2 5 en él a#tOan una serie -e resi-uos -e aminoá#i-os que2 al su6rir una protona#i$n o una -esprotona#i$n pue-en #ambiar su arre3lo espa#ial 5 5a no tener la a7ni-a- por el sustrato o no permitir la uni$n entre la enzima 5 el sustrato  &o-as las enzimas tienen un valor -e p8 $ptimo en el #uál su a#tivi-a- es má;ima Grá7#amente2 se observa un as#enso en la velo#i-a- -e la rea##i$n al aumentar el p82 9asta al#anzar el p8 $ptimo2 -espués -e este valor la velo#i-a- -es#ien-e Dentro -e la 3rá7#a se observa una zona en 6orma -e #ampana que muestra un ran3o $ptimo 5 la zona má;ima -e la a#tivi-a- -e la invertasa *l punto má;imo -e la #ampana2 representa el p8 $ptimo -e la enzima2 en el la-o izquier-o -e la #ampana2 -e 6orma as#en-ente se en#uentra el p8 sub$ptimo 5 en el la-o -ere#9o se observa un -e#live2 que in-i#a que la a#tivi-a- -e la invertasa -isminu5e -espués -el valor $ptimo2 -ebi-o a la ioniza#i$n 5 a #ambios estru#turales en la enzima 5 el sustrato

Con#entra#i$n -e enzima

Grupo: 4Q! La velo#i-a- -e la rea##i$n enzimáti#a va a estar #on-i#iona-a por la #on#entra#i$n -e la enzima2 -ebi-o a que #uan-o se presentan más molé#ulas -e este #ataliza-or biol$3i#o en solu#i$n que #ontiene sustrato2 #a-a molé#ula va a a#tuar in-epen-ientemente 5 van a trans6ormar una ma5or #anti-a- -e sustrato en pro-u#tos2 en una menor #anti-a- -e tiempo "i la #on#entra#i$n -e enzima se eleva al -oble2 la velo#i-a- lo 9ará también2 as. respe#tivamente

Gamboa Contreras Alain Pérez Navarro Gabriel "e##i$n 4 Razo Vázquez Dalia Lupita •

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Grá7#amente se observa un #omportamiento as#en-ente2 #on ten-en#ia lineal2 que muestra #laramente que2 al aumentar la #on#entra#i$n -e enzima2 aumenta la velo#i-a- -e rea##i$n Por lo tanto: La #on#entra#i$n -e enzima es -ire#tamente propor#ional a la velo#i-a- -e la rea##i$n *ste #omportamiento as#en-ente va a estar #on-i#iona-o i3ualmente por la #on#entra#i$n -el sustrato2 -ebi-o a que mientras e;ista sustrato en solu#i$n la velo#i-a- aumentará por la #on#entra#i$n -e enzimaE2 en tanto que2 si 5a no 9a5 sustrato para la rea##i$n2 la velo#i-a- va a -es#en-er -e una manera brus#a

CONCLUSIÓN •

•

A través -e la #urva tipo -e azO#ares re-u#tores po-emos interpolar 5 trans6ormar le#turas -e absorben#ia -e los problemas en mi#romoles -e azO#ar re-u#tor Para realizar un estu-io -e #inéti#a enzimáti#a se -ebe variar el 6a#tor a estu-iar 5 mantener to-os los parámetros que restan #onstantes

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Ca-a enzima tiene un valor -e p8 en el #uál su a#tivi-a- es má;ima 5 -espués -e este valor2 la velo#i-a-e#aerá -e manera brus#a *l p8 pue-e mo-i7#ar 5 ionizar tanto a la enzima #omo al sustrato2 a6e#tan-o la a7ni-a-2 el arre3lo espa#ial 5 la uni$n entre ellos Para realizar estu-ios representativos se -eberá traba=ar #on un valor -e p8 menor al $ptimo2 evitan-o as. el -es#enso brus#o La velo#i-a- -e rea##i$n es -ire#tamente propor#ional a la #on#entra#i$n -e enzima La ten-en#ia -e la velo#i-a- #on respe#to a la #on#entra#i$n -e enzima será as#en-ente 9asta que se a3ote el sustrato2 posteriormente la velo#i-a- -e#aerá

RE%ERENCIAS >9ttp:HHs3peiztuamm;H7lesHusersHuamiHs9 oH&emaSbSp8p-6 >Nelson2 Davi- L TLe9nin3er2 PR%NC%P%(" D* +%(Q'%%CAU 2 B e-2 e-itorial (me3a2 *spaMa Pp !4 W ! >9ttp:HHla3una6me-i#unamm;HXevazquezH 4@Hvelo#i-a-Y!rea##ion Y!enzimati#a49tml >9ttp:HHu#oesH-ptosHbioquimi#aIbiolI molHp-6sH@!Y!%NV*R&A"AY!C%N YC@YK&%CAp-6 >9ttp:HH-epa6quimunamm;Ham5-Har#9ivero H?4*N/%A"S!44p-6