Guia HistologIa-2010

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA Departamento Académico de Ciencias Morfológicas

GUÍA DE PRÁCTICAS DE HISTOLOGÍA

3er. Año de Medicina LIMA-PERÚ 2010

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HISTOLOGÍA GENERAL CAPÍTULO 1 TÉCNICA HISTOLÓGICA Se entiende por técnica histológica el conjunto de procedimientos para el estudio microscópico de las células, tejidos u órganos. El estudio de las células, tejidos u órganos, puede hacerse "in vivo" y "postmortem". 1.- ESTUDIO "IN VIVO" Consiste en la observación microscópica de elementos vivos. Puede hacerse utilizando o no la coloración vital. 1.1.- Estudio "in vivo" sin coloración vital.Se realiza, por ejemplo, colocando una gotita de sangre recién extraída entre porta y cubreobjetos. Se observará las células sanguíneas: glóbulos rojos y glóbulos blancos (en éstos últimos se distinguen mitocondrias). En el estudio de elementos vivos y tejidos sin colorear, se utiliza el microscopio de contraste de fase. 1.2.- Estudio "in vivo" con coloración vital.La coloración vital consiste en el empleo de ciertos colorantes no tóxicos (verde Jano, rojo neutro, azul de trypan, etc.) que actúan respetando la vida de la célula. El estudio "in vivo" puede ser intravital y supravital. COLORACIÓN INTRAVITAL.- Consiste en la inyección de colorantes vitales en el animal vivo. Ejm. Para estudiar los histiocitos** se inyecta a un animal (conejo o rata) por vía intraperitoneal o endovenosa una solución al 1% de azul de trypan (coloide electronegativo). Luego de la tercera inyección (4 cm3 c/2 días) se sacrifica al animal, tomándose muestras de diferentes órganos (hígado, bazo, médula ósea, ganglios, pulmones, peritoneo, etc.). En los cortes histológicos se observan unos elementos de color azul: son los histocitos que han incorporado a su citoplasma la sustancia inyectada, cuando el animal estuvo vivo. COLORACIÓN SUPRAVITAL.- Consiste en poner células libres de organismos superiores (espermatozoides, leucocitos, etc.) o trocitos de tejidos de un animal recientemente sacrificado en contacto con colorantes vitales.

Ej. : Coloque una gota de sangre recién extraída y añada una gota de solución

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-3verde de Jano; cubra con una laminilla (cubreobjetos). Se observará en el citoplasma de los leucocitos las mitocondrias teñidas de color verde. 2.- EXAMEN "POST-MORTEM" Este procedimiento de estudio histológico requiere la muerte previa del ser vivo. Diversos son los métodos de estudio, aquí sólo se anotará el de mayor uso en los laboratorios. Comprende: Fijación, Corte Coloración.

2.1.- Fijación: La fijación consiste en someter al citoplasma a la acción de los fijadores. Los órganos seccionados en pequeñas porciones (5mm) son sumergidos en el líquido fijador. La fijación puede durar minutos, horas o días; varía con relación al fijador empleado y al tamaño de las piezas. Transcurrido el tiempo de fijación, se efectúa el lavado de las piezas en agua1 a fin de eliminar los restos del fijador. FIJADORES.- Reciben este nombre, diversas sustancias que actuando sobre los prótidos celulares permiten la estabilización de sus estructuras. Por lo general los fijadores son sustancias químicas que actúan precipitando las grandes moléculas proteicas que constituyen la principal parte de los tejidos. Los fijadores pueden ser simples y los denominados mezclas fijadoras. Fijadores simples.- Son soluciones acuosas (la mayoría) de una sola sustancia. Se anotará algunos de ellos: Formol o formalina.- Es de uso generalizado y permite la mayor parte de estudios de rutina en Histología. Se le emplea en solución al 10, 15 y 20%. Alcohol metílico.- Muy usado en técnica hematológica. Alcohol etílico.- Se utiliza el de 95° y el absoluto. Bicromato de potasio.- Se emplea en solución al 3%. Las mezclas fijadoras.- Resultan de la asociación de varias sustancias y llevan el nombre de la persona que hizo la mezcla. Citaremos las de mayor uso: Zenker.- Es la mezcla de bicromato de potasio y bicloruro de mercurio a la que 1

Cuando se utiliza el fijador de Bouin, las piezas pasan directamente al alcohol (70°).

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-4se agrega, inmediatamente antes de su uso, 5cc. de ácido acético glacial por cada 100cc. Bicromato de potasio……………………8.5 g Bicloruro de mercurio…………………...5.0 g SOLUCIÓN STOCK Sulfato de sodio…………………………..1.0 g ESTABLE Agua destilada…………………………….100 cm3 Para el uso del fijador Zenker, se procede así: Zenker stock………………………………95 cm3 Ácido acético glacial……………………..5 cm3 El tiempo de fijación con Zenker es de 4 a 10 horas, de acuerdo al tamaño de las piezas. Se recomienda continuar la fijación en bicromato de potasio al 3% por 24 horas. Después de la fijación se procede a un lavado prolongado en agua corriente de doce horas por lo menos. Los órganos que no van a ser procesados se guardan en alcohol de 70°. Los cortes de los órganos que han sido fijados con mezclas que contengan mercurio deben ser tratados, antes de ser colorados, con una solución yodoyodurada y luego por hiposulfito de sodio, con el fin de eliminar el precipitado de mercurio. Helly.- A la solución Stock de Zenker (95 cm3), se agrega 5 cm3 de formol neutro, antes de su uso. El tiempo de fijación es de 24 horas. Las piezas fijadas son trasladadas directamente al alcohol de 80° para iniciar la deshidratación. El Bouin es un excelente fijador que posee un alto grado de penetración, por lo cual su uso está muy extendido en los laboratorios de Histología. Carnoy.- Es un magnífico fijador; algunos la utilizan en los trabajos de rutina. Su uso permite rapidez en el procedimiento, pues al mismo tiempo que se está efectuando la fijación, se comienza la deshidratación. Su composición es la siguiente: Alcohol absoluto........................ 60 cm3 Cloroformo.................................. 30 cm3 Ácido acético glacial.................. 10 cm3 La fijación dura de 3 a 4 horas, de acuerdo al tamaño de las piezas. Al término de la fijación se pasa directamente al alcohol absoluto.

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-52.2.- Corte: Los cortes de los órganos a estudiar y deben ser de pocas micras de espesor y grosor uniforme. Con tal fin se emplean tres métodos: inclusión en parafina, inclusión en celoidina y método de congelación. INCLUSIÓN EN PARAFINA.- Comprende las siguientes fases: Deshidratación Impregnación por un disolvente de la parafina Penetración de la parafina Formación del bloque a) Deshidratación.- Para llevar a cabo la deshidratación de las piezas fijadas, se les hace pasar por una batería de alcoholes de grado creciente hasta llegar al alcohol absoluto. b) Impregnación por un disolvente de la parafina.- Se utiliza el xilol. Tiene por objeto eliminar el alcohol y facilitar la penetración de la parafina en las piezas que se van a incluir. c) Penetración de la parafina.- Se sumergen las piezas en parafina líquida fundida en la estufa a 56°C. Antes de colocar las piezas en parafina líquida, se les hace pasar por una mezcla de xilol-parafina. d) Formación de bloque.- En moldes “ad hoc” se vierte parafina e inmediatamente se colocan las piezas orientándolas convenientemente. Al enfriarse la parafina, quedará formado un bloque en el que están incluidos los fragmentos de órganos que se van a cortar. INCLUSIÓN EN CELOIDINA.- Las fases son las mismas que las de las descritas en el método anterior con la diferencia que en lugar de parafina se emplea celoidina y, como disolvente de ésta, se usa una mezcla de alcohol-éter. MÉTODO DE CONGELACIÓN.- Es el método más rápido. Consiste en colocar sobre la platina del micrótomo, un trocito de órgano ya fijado con una gota de agua, y hacer pasar una corriente de anhídrido carbónico. Este compuesto al expandirse y evaporarse produce un brusco descenso de temperatura y congela el agua, adquiriendo el tejido una dureza tal, que permite el corte por la cuchilla del micrótomo. En Histoquímica se utiliza un aparato conocido con el nombre de criostato, que consiste en un micrótomo que está dentro de una cámara refrigerada a -25°C. Los mandos para ejecutar los cortes están por fuera. 2.3.- Coloración Sólo se anotará la coloración más usada en los laboratorios de Histología, esto es,

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-6la coloración con hematoxilina-eosina (H-E), aplicada a los cortes de parafina. a) Extensión y adhesión de los cortes al portaobjetos.- Los cortes se extienden depositándolos en un recipiente conteniendo agua a 45°C y luego son adheridos a las láminas portaobjetos. Mediante la extensión se logra que la superficie de los cortes sea perfectamente plana. b) Desparafinización.- Se emplea el xilol que es un disolvente de la parafina. c) Hidratación.- Se lleva a cabo haciéndolos pasar por una batería de alcoholes de grado decreciente (100°, 95°, 80°, 70°) y finalización en agua. d) Coloración con hematoxilina.- Se colocan las láminas en solución acuosa de hematoxilina durante 3 a 4 minutos. La hematoxilina es un colorante básico que tiñe los núcleos, nucleolos, ergastoplasma y elementos tisulares, de un color azul oscuro (morado). e) Viraje.- Se llevan las láminas a un recipiente con agua corriente alcalinizada con carbonato de litio. f) Coloración con Eosina.- Se hace actuar una solución acuosa de eosina por espacio de 1 ó 2 minutos; luego se lava con agua para sustraer el exceso de colorante. La Eosina es un colorante ácido y tiñe el citoplasma y a otros elementos tisulares de un color rosado. g) Diferenciación.- Se utiliza el alcohol de 80°. Mediante la diferenciación los diferentes elementos acidófilos del preparado, adquieren el tono adecuado. h) Deshidratación.- Se utiliza la batería de alcoholes de grado creciente (90°, 95°, 100°). i) Diafanización o aclaramiento.- Se coloca sobre las láminas 1 ó 2 gotas de esencia de clavo (opcional). Transcurridos 5 ó 10 minutos se vuelca la esencia de clavo y se lava con xilol. j) Montaje.- Se coloca una gota de bálsamo de Canadá sobre el preparado (acabado de pasar por xilol) y se cubre inmediatamente con una laminilla (cubreobjetos).

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-7PRÁCTICA Nº 1 CITOLOGÍA CÉLULAS EPITELIALES PLANAS Frotis de labio humano.- Preparado N°1 Coloración: H-E. Se observan células planas aisladas o en grupo (colgajos) provenientes al extracto superficial del epitelio poliestratificado plano no cornificado de la mucosa oral. Los núcleos aparecen teñidos de color azul oscuro por la hematoxilina, y el citoplasma de color rosado por la Eosina. En el citoplasma de algunas células se puede observar la presencia de finas formaciones basófilas; pueden corresponder a precipitaciones (artificio) de la hematoxilina. ERGASTOPLASMA Corte de páncreas.- Preparado N°67 Coloración: H-E En la zona basal del citoplasma de las células que conforman los adenómeros del páncreas exocrino, se observa el ergastoplasma, teñido de color azul oscuro por la hematoxilina. Químicamente está constituido por RNA. COMPLEJO DE GOLGI Corte de epidídimo de rata.- Preparado N°3 Coloración: método de Aoyama (impregnación con nitrato de plata) - hematoxilina (núcleos). En la zona supranuclear del citoplasma de las células epiteliales cilíndricas, se observa el complejo o Aparato de Golgi como una formación de color negro que semeja una red. Glucógeno Corte de hígado de rata.- Preparado especial Coloración: Carmín de Best - hematoxilina (núcleos). En el citoplasma de las células hepáticas (hepatocitos) se observa el glucógeno teñido de color rojo. El glucógeno se tiñe también con el método del PAS.

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-8Lámina Especial ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (DNA) Corte de Ganglio Linfático.- Preparado Especial Coloración: Reacción histoquímica para DNA (reacción de Feulgen). El DNA nuclear aparece de color magenta (rojo). · Reacción de Feulgen.- Es una reacción histoquímica específica para identificar DNA. Consiste en someter a los cortes a una hidrólisis con HCl N con el fin de extraer las purinas, y dejar expuestos los grupos aldehídos de la desoxirribosa, los cuales al reaccionar con el reactivo de Schiff devuelven el color magenta de la fucsina básica. Durante la hidrólisis ácida, el RNA es extraído, pero no así el DNA. La reacción es positiva únicamente en la cromatina nuclear. MITOSIS Corte raíz (cofia) de cebolla.- Preparado N°2 Coloración: H-E Esquematice los cuatro estadíos o fases de la mitosis: profase, metafase, anafase y telofase.

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CAPÍTULO 2 TEJIDO EPITELIAL PRÁCTICA Nº2 EPITELIOS SIMPLES O MONOESTRATIFICADOS EPITELIO MONOESTRATIFICADO PLANO Extensión de mesenterio de sapo. Preparado N°6 El mesenterio de sapo se trata con una solución de nitrato de plata y expuesto a la acción de la luz. La plata es reducida y precipita a nivel de los espacios intercelulares. Se observan células planas de forma poligonal dispuestas en una sola capa, a semejanza de las losetas de un piso. Los contornos celulares (interlíneas celulares) se ven de color pardo oscuro. En algunas interlíneas celulares se notan engrosamientos que dan un aspecto arrosariado. Estos engrosamientos representan artificios de preparación, o sea, mayor precipitación de plata a nivel de dichos espacios. Debajo de la capa de las células epiteliales planas (mesotelio) se visualiza por transparencias vasos sanguíneos (capilares) pertenecientes al tejido conjuntivo. Localización.- El epitelio monoestratificado plano está localizado en: revestimiento interno de los vasos sanguíneos, linfáticos y corazón (endotelio), revestimiento de cavidades internas que no se abren al exterior, tales como peritoneo, pleura y pericardio (mesotelio), rete testis, segmento delgado del asa de Henle (riñón), hoja parietal de la cápsula de Bowman del corpúsculo de Malpighi (riñón).

EPITELIO MONOESTRATIFICADO CÚBICO Corte de glándula tiroides.- Preparado N°96 Coloración: H-E Las células epiteliales que delimitan los folículos tiroides están dispuestas en una sola capa y presentan núcleo redondeado. Los folículos tiroideos contienen una sustancia llamada coloide, la que aparece teñida de color rojo. EPITELIO MONOESTRATIFICADO CILÍNDRICO Corte transversal de yeyuno-íleon.- Preparado N°56 Coloración: H-E Dos clases de células se encuentran formando el epitelio intestinal: células con "chapa estriada" o absorbentes y células caliciformes.

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- 10 EPITELIO PSEUDOESTRATIFICADO Corte transversal de tráquea.- Preparado N°71 Coloración: H-E Todas las células que conforman el epitelio pseudoestratificado están en contacto con la membrana basal. Los núcleos de las células, situados más próximos a la membrana basal, corresponden a células cúbicas poliédricas, las que no llegan alcanzar la superficie. Los núcleos de las células situados más próximos a la superficie, corresponden a células cilíndricas; estas células alcanzan la superficie y presentan cilios (cilios vibrátiles o cinetocilios) en su borde libre. El citoplasma de las células caliciformes aparece claro debido que la eosina no lo tiñe. Localización.- El epitelio pseudoestratificado está localizado en: las fosas nasales (mucosa respiratoria), laringe, (rinofaringe), tráquea y grandes bronquios.

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- 11 PRÁCTICA Nº3 EPITELIOS POLIESTRATIFICADOS

EPITELIO POLIESTRATIFICADO PLANO NO CORNIFICADO Corte transversal de esófago.- Preparado N°51 Coloración: H-E Las células que forman este epitelio se encuentran dispuestas en varias capas superpuestas y ordenadas según su forma: Las de la capa profunda (primer estrato) son cilíndricas y forman la capa denominada capa basal. Su citoplasma es rico en RNA, de allí que sean basófilas. Las de la capa media, son cúbicas y poliédricas, las que van aplanándose a medida que se acercan a la superficie. Las de capa superficial (último estrato) son planas. Localización.- El epitelio poliestratificado plano no cornificado se encuentra en: la porción supradiafragmática del tubo digestivo (boca, orofaringe, esófago), vagina, uretra femenina, fosa navicular de la uretra masculina, laringe (cuerdas vocales inferiores). EPITELIO POLIESTRATIFICADO PLANO CORNIFICADO Corte de pulpejo de dedo.- Preparado N°41 Coloración: H-E Las células epiteliales se encuentran dispuestas en varias capas superpuestas y ordenadas según su forma (véase lo anotado para el preparado anterior). Se aprecia una transición gradual de la basofilia a la acidofilia, del estrato basal a la superficie. Las células superficiales están queratinizadas formando el estrato córneo de la epidermis de la piel. Sus núcleos se han desintegrado y desaparecido; son células muertas que se desprenden continuamente. Localización.- El epitelio poliestratificado plano cornificado se encuentra constituyendo la epidermis de la piel. EPITELIO POLIMORFO Corte transversal de vejiga. Preparado N°77 Coloración: H-E Las células de este epitelio están dispuestas en varios estratos superpuestos pero no guardan esa ordenación tan manifiesta que se ha visto en el epitelio poliestratificado plano.

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- 12 Las células del estrato profundo y medio ostentan sus núcleos de forma redondeada y ovoide; son células cúbicas, poliédricas y "en raqueta". Las células de capa superficial conservan la forma poliédrica; sus núcleos tienden a ser esféricos. La forma de estas células depende del estado de distensión o de retracción del órgano. Las células superficiales del epitelio urinario, presentan una condensación citoplasmática periférica que aparece teñida con intensidad algo mayor, es una condensación citoplasmática que sirve para evitar el pasaje al interior de las células, de sustancias tóxicas contenidas en la orina. Localización.- El epitelio polimorfo o de transición, se encuentran en el tracto urinario: pelvis renal, uréter, vejiga y uretra prostática.

EPITELIO POLIESTRATIFICADO CILÍNDRICO Corte de pene. Preparado N°84 Coloración: H-E Esta variedad de epitelio está muy limitada en el hombre. Se observa en la uretra peneana, conjuntiva palpebral, parte del epitelio de la mucosa de la faringe, laringe y epiglotis, epitelio olfatorio y en el esófago fetal, transitoriamente. Las células superficiales son cilíndricas, pueden o no presentar cilios, las demás células son cúbicas. La porción nuclear abarca los 3/4 ó 4/5 parte de la capa epitelial.

TRANSICIÓN DE EPITELIOS Corte longitudinal de cardias.- Preparado N°52 Coloración: H-E En algunas zonas del organismo se observa el cambio brusco de un tipo de epitelio a otro; este ocurre, por ejemplo, en el cardias y en el cuello uterino. En el corte de cardias se observa como el epitelio poliestratificado plano no cornificado del esófago a nivel del cardias (porción inicial del estómago), cambia bruscamente a epitelio monoestratificado cilíndrico. Observe: ¿Cómo aparece teñido el citoplasma de las células del epitelio de la mucosa del estómago? ¿Por qué?

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CAPÍTULO 3 TEJIDO CONJUNTIVO 1.- CÉLULAS DEL TEJIDO CONJUNTIVO 1.1.- Fibroblastos.- Constituye uno de los tipos celulares más numerosos; tiene forma de huso, su núcleo es oval o esférico y se tiñe ligeramente. 1.2.- Histiocitos o macrófagos.- Son tan numerosos como los fibroblastos. Sus núcleos aparecen teñidos un poco más oscuros que el de los fibroblastos. 1.3.- Mastocitos.- También llamadas células cebadas o mastzellen, son células que se caracterizan por presentar en su citoplasma abundante gránulos gruesos que se tiñen metacromáticamente con azul de toluidina. 1.4.- Células plasmáticas.- Su citoplasma es intensamente basófilo (rico en RNA); cerca del núcleo se observa una zona más clara, corresponde al lugar que ocupa el complejo de Golgi y el centriolo. El núcleo se sitúa excéntricamente, es redondo, pequeño y se caracteriza, por que la cromatina se dispone en granos gruesos que se adhieren a la membrana nuclear en tal forma, que el núcleo toma el aspecto de "rueda de carreta". 1.5.- Células adiposas.- Son elementos de gran tamaño (40-100 m) se caracterizan porque su citoplasma está casi totalmente ocupado por una gran vacuola de grasa triglicéridos que rechaza el núcleo hacia la periferia. En los preparados histológicos corrientes, coloreados con H-E, las células adiposas presentan el aspecto de un "anillo engastado" debido a que la grasa ha sido disuelta por el xilol. La grasa se colorea con Sudan III, Sudan IV o Rojo Escarlata, Sudan negro B y otros. 1.6.- Células pigmentarias: melanóforos.- Son células que presentan prolongaciones citoplasmáticas y que contiene finos gránulos de una sustancia de color pardo oscuro (melanina). Las células pigmentarias se encuentran en la piamadre y en la capa media del ojo o úvea. 1.7.- Leucocitos.- En el tejido conjuntivo adulto se encuentran linfocitos, neutrófilos y eosinófilos.

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- 14 2.- SUSTANCIA INTERCELULAR La sustancia intercelular está constituida por la porción forme (fibras) y la porción amorfa o sustancia fundamental. 2.1.- Porción forme.- Se distinguen tres clases de fibras conjuntivas: colágenas, reticulares y elásticas. 2.2.- Porción amorfa.- Llamada también sustancia fundamental, es el otro componente de la sustancia intercelular; en el seno de ésta, se disponen las células y las fibras conjuntivas. De la sustancia fundamental amorfa se han aislado compuestos de elevado peso molecular denominados glucosaminoglucanos (GAG's) (antes llamados mucopolisacáridos) y que se encuentran unidos a proteínas, formando complejos. Físicamente se hallan en estado de sol o de gel.

3.- REACCIÓN DEL PAS (PERIODIC ACID-SCHIFF) La reacción histoquímica del PAS se utiliza en el estudio histoquímico de los carbohidratos. El ácido peryódico es un oxidante enérgico que al actuar sobre las uniones 1,2 glicol (-CHOH-CHOH) y alfa aminoalcohol (-CHOH-CHNH2) de algunos carbohidratos, forman grupos aldehídos los que son evidenciados en las secciones de los tejidos, mediante el reactivo de Schiff (reactivo que identifica grupos reductores). Las siguientes sustancias y estructuras histológicas son PAS positivo: glucógeno, mucoproteínas, fibras reticulares, membrana basal.

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- 15 PRÁCTICA Nº4 CÉLULAS Y FIBRAS DEL TEJIDO CONJUNTIVO CÉLULAS Y FIBRAS Extensión de mesenterio de rana.- Preparado N°9 Coloración: Fucsina-resorcina, fucsina ácida y hematoxilina. Fibroblastos en gran número. Células cebadas. Destacan por su gran tamaño y por los gránulos gruesos, que llenan el citoplasma. Linfocitos. Son células de una 7 a 9 micras. El núcleo es redondo y ocupa casi todo el citoplasma: su cromatina está muy condensada. El citoplasma prácticamente no se distingue en las secciones histológicas. Células adiposas (en algunos preparados no se observan). La grasa contenida en el citoplasma ha sido disuelta por el xilol, apareciendo como esferas vacías. Las fibras colágenas aparecen formando haces, tiñiéndose de color rojo por la fucsina ácida. Las fibras elásticas se presentan como finos cordones que se ramifican y anastomosan, coloreándose de color azul oscuro por la fucsina-resorcina. HISTIOCITOS O MACRÓFAGOS Corte de hígado y bazo. Preparado N°65 Coloración intravital con azul de trypan. Una rata recibió una inyección interdiaria de una solución de azul de trypan (1%) por vía intraperitoneal, durante 6 días. Luego fue sacrificada. Los cortes se colorearon con Kernechtrot (tiñe al núcleo de color rojo). En el citoplasma de algunas células se observan finos gránulos azules, corresponden al azul de trypan inyectado que, los macrófagos incorporaron a su citoplasma cuando el animal estuvo vivo. Se demuestra así, la propiedad de coloidopexia. En algunos histiocitos el núcleo no se ve, debido a que la sección de la célula ha sido superficial, no interesando el núcleo.

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- 16 MACRÓFAGOS Corte de ganglio mediastinal antracótico Coloración: H-E La antracosis proviene de la inhalación de finas partículas de carbón, que son fagocitadas por los macrófagos que se encuentran en los ganglios linfáticos del mediastino y en los septos alveolares del pulmón. Los macrófagos se ven de color negro debido a que éstos han fagocitado las partículas de carbón que el sujeto inhaló en vida. Las numerosas células de forma redondeada que aparecen teñidas de azul oscuro, son linfocitos. CÉLULAS PLASMÁTICAS Corte de cuello uterino.- Preparado especial Coloración con Gallocianina La lámina propia de la mucosa del cuello uterino presenta un proceso inflamatorio (cervicitis) donde se observan numerosas células plasmáticas, las cuales se caracterizan por tener forma ovoide o redondeada, con citoplasma intensamente basófilo debido al gran desarrollo del ergastoplasma (RER). La zona clara que se observa cerca al núcleo, corresponde al lugar que ocupa el aparato de Golgi. El núcleo se sitúa en una posición excéntrica y la cromatina se dispone en gránulos gruesos que, dispuestos radialmente, recuerda a una "rueda de carreta". FIBRAS RETICULARES Corte de hígado humano. Preparado N°64 Impregnación argéntica. Se observan entre los cordones de hepatocitos delgadas fibras de color pardo negruzco que corresponden a las fibras reticulares.

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- 17 PRÁCTICA Nº5 TEJIDOS CONJUNTIVOS TEJIDO MESENQUIMAL Corte de embrión de cerdo. Preparado N°27 Coloración: H-E Las células son de forma estrellada con prolongaciones citoplasmáticas delgadas que se enlazan entre sí formando en conjunto con retículo o malla. La sustancia intercelular es abundante y se encuentra ocupando los espacios del retículo; se tiñe muy débilmente con la eosina (aparece clara). Localización.- Es el tejido de relleno, no especializado, de las primeras semanas de la vida embrionaria.

TEJIDO MUCOIDE Corte de cordón umbilical.- Preparado N°10 Coloración: H-E Las células (fibroblastos) son de forma estrellada con prolongaciones citoplasmáticas delgadas que se enlazan entre sí formando un retículo de mallas anchas. Los espacios intercelulares están llenos de abundante sustancia conocida como gelatina de Wharton; con la coloración H-E se tiñe debidamente (aparece clara). A veces puede observarse hendiduras en la gelatina, esto es debido a retracciones que se producen por la fijación. El número y grosor de las fibras colágenas del cordón umbilical varían según el tiempo de gestación. Al recorrer el preparado se observan una vena y dos arterias. En la periferia del cordón se ve un epitelio monoestratificado cúbico (epitelio del amnios). Estos elementos no deben ser incluidos en el esquema. Localización.- Cordón umbilical, humor vítreo del ojo. En el diente adulto (pulpa), se encuentra un tejido similar al tejido conjuntivo mucoso. TEJIDO CONJUNTIVO LAXO Corte de pulpejo de dedo.- Preparado N°41 Coloración: H-E Enfoque en la zona subyacente al epitelio (epidermis). Esta zona representa la dermis papilar de la piel y está constituida por tejido conjuntivo laxo. Los fibroblastos o fibrocitos son abundantes. Su citoplasma es poco visible, observándose la mayoría de las veces solamente el núcleo.

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- 18 Las fibras colágenas son delgadas no muy numerosas, de trayecto más o menos ondulado y en conjunto forman una trama laxa: la sustancia fundamental no se distinguen bien en los preparados de rutina. Se observan gran número de vasos sanguíneos; éstos están revestidos por una capa de células planas (endotelio); en su luz se ven hematíes. Localización.- Dermis papilar; submucosa de diversos órganos (esófago, estómago). TEJIDO CONJUNTIVO DENSO, DISPUESTO IRREGULARMENTE. Corte de pulpejo de dedo.- Preparado N°41 Coloración: H-E. TEJIDO CONJUNTIVO DENSO.- Los elementos son los mismos que en el tejido conjuntivo laxo, pero las fibras colágenas predominan ostensiblemente sobre los demás elementos. En el tejido conjuntivo denso se distinguen dos variedades o subtipos: tejido conjuntivo denso dispuesto regularmente (modelado) y tejido conjuntivo denso dispuesto irregularmente (no-modelado), según que las fibras colágenas estén o no dispuestas ordenadamente. Además en el primero, de acuerdo a la dirección de las fibras, se distinguen dos variedades: a) cuando las fibras se disponen paralelamente en una dirección (tipo tendón) y b) cuando las fibras se disponen en dos direcciones, entrecruzándose en ángulo (tipo aponeurosis). Enfoque en la zona situada inmediatamente por debajo de la dermis papilar, esta zona representa la dermis reticular de la piel y está constituida por tejido conjuntivo denso no modelado. Las fibras colágenas predominan ostensiblemente sobre los demás componentes; se agrupan en haces gruesos y compactos que forman en conjunto un fieltro fibroso. Los fibroblastos no son tan numerosos como en el tejido conjuntivo laxo. Vasos sanguíneos. Localización.- dermis reticular o profunda. Corion de la mucosa de la región dorsal de la lengua; periostio, pericondrio, cápsula de algunos órganos (bazo, testículo).

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- 19 TEJIDO CONJUNTIVO DENSO, DISPUESTO REGULARMENTE. Corte longitudinal de tendón.- Preparado N°11 Coloración: H-E Las células son una variedad de fibroblastos pero su forma es tan diferente que se les da el nombre de células tendinosas, se disponen en series lineales entre los haces de fibras colágenas. Las fibras colágenas están agrupadas en haces gruesos y paralelos entre sí en una sola dirección. TEJIDO RETICULAR Corte de ganglio linfático.- Preparado N° 34 Impregnación argéntica Las células reticulares (no se distinguen muy bien), son de forma estrellada con finas prolongaciones que se enlazan entre sí, formando una malla con las fibras argirófilas. Las fibras reticulares se ramifican y se disponen en redes, están adosadas íntimamente a las células reticulares. Los espacios del retículo están ocupados por linfocitos, los que no aparecen teñidos. Localización.- Forma el estroma (armazón) de los órganos hematopoyéticos (ganglios linfáticos, bazo, médula ósea). TEJIDO CONJUNTIVO ADIPOSO Corte de piel delgada.- Preparado N° 12 Coloración: Hematoxilina- Sudán IV Observe como la grasa que está ocupando casi la totalidad del citoplasma, aparece de color rojo. Localización.- Debajo de la piel con excepción de la del pene y párpados; alrededor de los riñones y suprarrenales; epiplón, mesenterio, mama, en la planta del pie, en las manos y en las nalgas; en la cavidad orbitaria, en la mejilla.

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- 20 PRÁCTICA Nº6 TEJIDO CARTILAGINOSO Y ÓSEO CARTÍLAGO HIALINO Corte de tráquea de adulto.- Preparado N°71 Coloración: H-E Las células cartilaginosas o condrocitos se encuentran alojadas en unas cavidades llamadas condroplastos. En los preparados corrientes casi siempre aparecen retraídas. Los condrocitos están reunidos en grupos de 2, 4 y 8 formando los llamados grupos isógenos. La sustancia intercelular tiene aspecto homogéneo. Las fibras colágenas no se ven (están enmascaradas) debido a que tienen el mismo índice de refracción que la porción amorfa. Las células cartilaginosas están rodeadas de una banda de sustancia intercelular intensamente basófila, es la cápsula. Rodeando a una célula o a un grupo de células cartilaginosas con sus cápsulas, se observa una zona de sustancia intercelular de menor basofilia que la cápsula, conocida con el nombre de área territorial. Llámase área interterritorial, la sustancia intercelular cartilaginosa de escasa basofilia (zona acidófila) situada entre las zonas territoriales. Rodeando al cartílago está el pericondrio (tejido conjuntivo denso). Localización.- En el embrión constituye las piezas esqueléticas durante gran parte del desarrollo. En el adulto se encuentra en las vías respiratorias (fosas nasales, laringe, tráquea y bronquios), en la superficie articular de los huesos; extremo anterior de las costillas. CARTÍLAGO ELÁSTICO Corte pabellón de oreja de perro.- Preparado N°13 Coloración: fucsina-resorcina-picrofucsina. Los condrocitos se encuentran contenidos en los condroplastos, son más numerosos que en el cartílago hialino por lo que aparecen más juntos. La sustancia intercelular está recorrida por numerosas fibras elásticas que en conjunto forman una red; la fucsina-resorcina las colorea de azul oscuro. También hay fibras colágenas, pero en menor proporción. Localización.- Pabellón de la oreja, conducto auditivo externo, trompa de Eustaquio, epiglotis.

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- 21 CARTÍLAGO FIBROSO. Corte de menisco intraarticular de rodilla.- Preparado N°31 Coloración: H-E Las células están encerradas en los condroplastos limitados por la cápsula. En la mayor parte de los condrocitos el citoplasma está retraído dejando un espacio (artificio) entre la célula y la pared del condroplasto. La sustancia intercelular aparece recorrida por haces gruesos y compactos de fibras colágenas. Localización.- Discos intervertebrales, rodete glenoideo del hombro y de la cadera, así como los meniscos intraarticulares de las articulaciones temporomaxilar y de la rodilla; fibrocartílago interpúblico. NOTA.- El cartílago fibroso carece de pericondrio, por eso es que nunca se presenta aislado, sino que se confunde gradualmente con el cartílago hialino o tejido conjuntivo denso. TEJIDO ÓSEO HUESO COMPACTO Corte transversal de diáfisis de fémur.- Preparado N°14 (Las secciones fueron depositadas en un Petri conteniendo violeta de Dalia). La unidad estructural del hueso compacto es el osteón, osteona o sistema de Havers. Los conductos de Havers, aparecen como orificios grandes, irregularmente circulares y penetrados por el colorante. Los osteoplastos o lagunas óseas están dispuestos concéntricamente alrededor de los conductos de Havers; se ven como orificios pequeños, aspecto lenticular. De estas cavidades parten una serie de conductillos de trayecto ondulado y que se anastomosan con los conductillos vecinos, son los canalículos óseos o conductos calcóforos. Las laminillas óseas representan la sustancia intercelular. Según su situación se distinguen cuatro sistemas o clases de laminillas: haversianas, intersticiales, circunferenciales internas y circunferenciales externas. Cada osteón esta limitado por una línea de cemento (estrato no fibrilar).

HUESO COMPACTO Corte longitudinal de diáfisis de fémur.- Preparado N°15 Las secciones fueron depositadas en un Petri contenido violeta de Dalia.

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- 22 Los conductos de Havers, aparecen cortados longitudinalmente, teniendo una dirección más o menos paralela al eje mayor del hueso. Los conductos de Havers anastomóticos llevan una dirección oblicua o transversal. Los osteoplastos, siguen una orientación paralela a los conductos de Havers. Los conductos calcóforos parten de estas cavidades y tienen un trayecto ondulado, anastomosándose con los conductos vecino, pertenecientes a un mismo sistema de Havers. Las laminillas óseas (sustancia intercelular) también están orientadas paralelamente a los conductos de Havers.

HUESO COMPACTO DESCALCIFICADO Corte transversal de diáfisis de conejo joven (hueso fresco) Preparado N°16. Coloración: H-E Los conductos de Havers se ven como orificios grandes, irregularmente circulares, conteniendo vasos sanguíneos, linfáticos y nervios (estos dos últimos no se distinguen en el preparado). Los osteoplastos se encuentran ocupados por los osteocitos. La sustancia fundamental orgánica se presenta homogénea y teñida de color rojo. En el borde interno del canal medular (en algunos preparados) se notan unas excavaciones o depresiones en las cuales se encuentran unas células multinucleadas de gran tamaño; corresponden a las lagunas de Howship y a los osteoclastos, respectivamente. Rodeando al hueso, y sólo en una pequeña zona, se ve el periostio. En algunos preparados se distinguen los conductos de Volkman. Estos conductos parten del periostio o de la cavidad medular, terminando en un conducto de Havers. En el conducto medular, se observa gran cantidad de células, corresponden a células formadoras de los diferentes elementos figurados de a sangre (médula ósea roja). NOTA.- Todos los huesos del organismo (largos, planos y cortos) contienen tejido óseo compacto y esponjoso.

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- 23 PRÁCTICA Nº7 OSIFICACIÓN La osificación es el proceso mediante el cual se forma el tejido óseo. Se describirá los dos tipos principales de osificación: la intramembranosa o directa y la endocondral o indirecta. OSIFICACIÓN INTRAMEMBRANOSA Corte de hueso plano de cráneo de feto humano.- Preparado N°18 Coloración: H-E Algunas células del tejido mesenquimal se han diferenciado transformándose en osteoblastos. Estas células son identificadas fácilmente por la gran basófila de su citoplasma (rico en RNA). Las trabéculas óseas representan la sustancia osteoide calcificada. Se les observan de color azul oscuro teñidas por la hematoxilina. La sustancia osteoide, aparece como una fina formación acidófila adyacente a la superficie de las trabéculas óseas. En algunos preparados puede observarse lagunas de Howship y osteoclastos. Las lagunas de Howship aparecen como excavaciones en los bordes de las trabéculas óseas. Los osteoclastos son células multinucleadas que se les encuentra en las lagunas de Howship. NOTA.- El primer hueso que se forma, ya por osificación intramembranosa como endocondral, es de tipo esponjoso. OSIFICACIÓN ENDOCONDRAL Corte longitudinal de fémur de feto humano.- Preparado N°17 Coloración: H-E En este preparado, además de la osificación endocondral, observaremos nuevamente la osificación intramembranosa a nivel de la futura diáfisis. Recuerde que la mayor parte de los huesos del esqueleto se forman mediante ambos tipos de osificación. Osificación endocondral Recorriendo el preparado desde un extremo hacia el centro, se observa las siguientes zonas. Zona del cartílago ordinario.- Presenta los caracteres del cartílago normal,

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- 24 notándose gran aumento del número de condrocitos. Zona del cartílago seriado.- Los condrocitos se agrupan y se disponen formando hileras en series lineales, paralelas entre sí. Zona del cartílago hipertrófico o vesículoso.- Los condroplastos se han ensanchado, formándose verdaderas vesículas. Trabéculos directrices de osificación.- Representan restos de la sustancia fundamental calcificada. Aparecen teñidas de color azul-violeta oscuro característico. Los osteoblastos provenientes del brote conjuntivo-vascular, se adosan a los bordes de estas trabéculas que comienzan a depositar sustancia fundamental orgánica ósea (osteoide). La sustancia osteoide se impregna de sales de calcio, formándose así las trabéculas óseas. En algunos preparados se observa lagunas de Howship y osteoclastos. Entre las trabéculas directrices se distinguen los vasos osificantes numerosas células jóvenes hematopoyéticas constituyentes de la médula ósea primitiva. Osificación intramembranosa Enfocar en la zona diafisiaria. Debemos recordar que, en la diáfisis de los huesos largos, el tejido que rodea al cartílago a nivel de la futura diáfisis, es mesenquimal. Algunas veces se designa a este proceso con el nombre de osificación pericondral o periostal. Las células mesenquimales que rodean al modelo cartilaginoso a nivel de la diáfisis se diferencian transformándose en osteoblastos. Los osteoblastos se distinguen por su intensa basofilia; se disponen en una fila única (aspecto epitelioide) y elaboran la sustancia osteoide. La sustancia osteoide aparece como una capa fina y poco teñida (rosa pálido) que se observa en los bordes de las trabéculas óseas.

CAPÍTULO 4

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TEJIDO MUSCULAR PRÁCTICA Nº8 TEJIDO MUSCULAR TEJIDO MUSCULAR LISO Corte de yeyuno íleon.- Preparado N°56 Coloración: H-E En la zona interna de la capa muscular, se observa fibras musculares lisas cortadas longitudinalmente; el núcleo ocupa una posición central. En la zona externa de la capa muscular, se observa fibras musculares lisas cortadas transversalmente, de diámetro variable. El núcleo que ocupa una posición central, se ve en unas secciones y en otros no. ¿Por qué? TEJIDO MUSCULAR ESTRIADO ESQUELÉTICO Corte de lengua.- Preparado N°46 Coloración: H-E Las fibras musculares aparecen cortadas en diferentes sentidos: longitudinal, transversal y oblicuo. Las fibras cortadas longitudinalmente, se ven como cintas angostas de bordes paralelos con varios núcleos situados periféricamente. Moviendo suavemente el micrométrico y cerrando un poco el diafragma, es posible observar en algunos preparados, una fina estriación transversal, determinada por la disposición regularmente alterna de los discos claros (I) y oscuros (A). Las secciones transversales de las fibras, se observan como superficies redondeadas o poligonales con ángulos romos, de tamaño uniforme; sus núcleos están situados periféricamente. Las secciones transversales de las fibras musculares estriadas se ven ocupadas por unos pequeñísimos campos poligonales delimitados por sarcoplasma (campos de Cohnheim). Los campos de Cohnheim representan las secciones transversales de haces de miofibrillas ('columnitas de Kölliker'). El escaso tejido conjuntivo situado entre las fibras musculares, a las que separa y une, para formar los haces musculares, recibe el nombre de endomisio. Rodeando a los haces musculares está el perimisio, constituido también por tejido conjuntivo. TEJIDO MUSCULAR ESTRIADO ESQUELÉTICO Corte de lengua.- Preparado N°19 Coloración: Hematoxilina férrica

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- 26 La descripción es igual a la del preparado anterior. Aquí solamente se anotará lo siguiente: En las fibras musculares cortadas longitudinalmente, se aprecia nítidamente los discos claros (discos I) y los discos oscuros (discos A) que se alteran regularmente. Concepto a grabar.- El tejido muscular estriado está constituido por fibras musculares que poseen estriación transversal y núcleos situados periféricamente. TEJIDO MUSCULAR CARDÍACO Corte de corazón.- Preparado N°20 Coloración: H-E Las fibras musculares aparecen cortadas en diversos sentidos: longitudinalmente, transversal y oblicuo; esto se debe a que las fibras del miocardio siguen diversas direcciones. En las secciones longitudinales se observa que las sarcómeras con sus discos I y A, no aparecen claramente delimitadas, como en las fibras musculares esqueléticas. Los núcleos son grandes, ovalados, tendiendo a adoptar la forma cuadrangular; su posición es central. Trate de localizar los discos intercalares, que son estructuras típicas del miocardio. Las secciones transversales aparecen como superficies redondeadas o poligonales con bordes romos en las que al núcleo ocupa una posición central. Las miofibrillas muestran una disposición radial. En las fibras musculares se observa tejido conjuntivo laxo intersticial escaso y con numerosos capilares sanguíneos. Coloraciones especiales Se proyectaran microfotografías de preparados teñidos con coloraciones especiales, tales como Mallory, Van Gleson y otras. Coloración de Mallory.- Se usa para teñir el colágeno. Se emplea dos soluciones: Solución de fucsina ácida y solución de azul de anilina-orange G, conteniendo ácido fosfotúngstico. Resultados: Fibras colágenas, de color azul Tejido muscular y núcleos de color rojo. Coloración de Van Gieson.- Se utiliza para teñir el colágeno. Las soluciones que se emplean son: Solución de fucsina ácida y solución de ácido pícrico (solución de picro-fucsina). Las fibras colágenas aparecen teñidas de color rojo brillante y el músculo y epitelio

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- 27 de color amarillo. Coloración simultánea para DNA y RNA.- Se utilizan los colorantes verde de metilo y pironina. El verde metilo tiñe de color verde el DNA y la pironina de color ladrillo el RNA.

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CAPÍTULO 5 TEJIDO NERVIOSO Se estudiará la célula nerviosa (neurona) y el tejido de sostén (neuroglía). LA NEURONA La parte de las células nerviosas que contiene el núcleo se denomina cuerpo celular o soma y la parte que rodea al núcleo se denomina pericárion; la prolongación que emerge de una elevación, cónica del cuerpo celular, se llama cilindro eje, axón o fibra nerviosa.

PRÁCTICA Nº9 NEURONAS NEURONAS MULTIPOLARES DE FORMA ESTRELLADA Corte de médula espinal, Motoneuronas.- Preparado N°21 Coloración: H-E Enfoque el asta anterior de la sustancia gris. Las neuronas aparecen poligonales, presentando numerosas prolongaciones citoplasmáticas (dendritas). Los núcleos son esféricos, típicamente vesiculosos con finas partículas de cromatina y con un nucleolo prominente. Entre las neuronas se observan numerosas fibras nerviosas y células de tamaño pequeño, corresponden a células de la neuroglía. Concepto a fijar.- Las neuronas de la cabeza del asta anterior son denominadas motoneuronas; sus cilindros ejes, luego de abandonar la médula espinal, constituyen la raíz anterior o motora de los nervios raquídeos, terminando en los músculos esqueléticos. NEURONAS MULTIPOLARES DE FORMA PERIFORME (CÉLULA DE PURKINJE) Corte de cerebelo, Sustancia Tigroide.- Preparado N°23 Coloración: H-E Las células de Purkinje son de forma ovoide, presentando en uno de los polos numerosas prolongaciones citoplasmáticas (dendritas). El núcleo es voluminoso y presenta nucleolo bien teñido.

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- 29 NEURONAS MULTIPOLARES DE FORMA PIRAMIDAL Corte de cerebro, Células Piramidales.- Preparado N°23 Coloración: H-E Las grandes células piramidales aparecen de forma triangular con su base orientada a la medular y su vértice hacia la superficie, constituyendo la prolongación dendrítica principal (prolongación dendrítica ascendente). Los colaterales horizontales que nacen de la prolongación dendrítica ascendente y las prolongaciones dendríticas que nacen de la base de las células piramidales, no se ven en los preparados teñidos en H-E. Concepto a fijar.- Los cilindros-ejes de las neuronas piramidales van a constituir el haz piramidal motor, que termina haciendo sinapsis con las motoneuronas de la cabeza del asta anterior. NEURONAS PSEUDOMONOPOLARES Corte de ganglio espinal, C. Pseudomonopolares.- Preparado N°29 Coloración: H-E Las células ganglionares son de forma esférica y variado tamaño. Presentan un núcleo y un nucleolo característicos. La prolongación neurítica única, rara vez se ve. Envolviendo a cada célula ganglionar se ve una cubierta formada por células aplanadas; son las células envolventes, capsulares o pericelulares, consideradas por Del Río Ortega como un tipo de glía. NOTA.- En el citoplasma de algunas neuronas de la médula espinal, ganglios y bulbo, se puede observar la presencia de un pigmento de inclusión, de color café amarillento, se trata de lipofucsina (lipocromo) y, su presencia está en relación con el proceso de envejecimiento. GRÁNULOS DE NISSL O SUSTANCIA TIGROIDE Corte de médula espinal.- Preparado N°22 Coloración: H-E Los gránulos de Nissl aparecen como masas pequeñas teñidas de color azul oscuro. Ellos se distribuyen en el citoplasma y en las dendritas. El segmento inicial de (cono axónico) axón está desprovisto de gránulos de Nissl. El núcleo presenta un prominente nucleolo y una fina malla de cromatina. Entre las neuronas se observa unas células pequeñas, corresponden a células de la neurología.

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- 30 PRÁCTICA Nº10 NEUROGLIA ASTROCITOS Y OLIGODENDROCITOS Corte de circunvolución cerebral humana.- Preparado N°26 Tinción: método cromoargéntico de Golgi. Los astrocitos aparecen de color negro, de cuyo cuerpo parten numerosas prolongaciones que se ramifican y anastomosan dando el aspecto de arañas. Se distinguen los astrocitos protoplasmáticos y los astrocitos fibriales. a) Los astrocitos protoplasmáticos presentan una estructura esponjosa y poseen numerosas prolongaciones gruesas y cortas. b) Los astrocitos fibrilares poseen estructura fibrilar y presentan prolongaciones largas y delgadas. c) Se puede ver como una de las prolongaciones de los astrocitos terminan en un pequeño vaso sanguíneo, constituyendo lo que se le conoce con el nombre de aparato chupador de Cajal. Los oligodendrocitos se ven como pequeños cuerpos redondeados con 2, 3 ó 4 prolongaciones (recuerde que está observando en un solo plano). Los vasos sanguíneos aparecen de color negro.

HISTOLOGÍA ESPECIAL PRÁCTICA 1 SISTEMA NERVIOSO MENINGES Corte de circunvolución cerebral humana.- Preparado N°25 Coloración: H-E Se distingue la leptomeninge (piamadre y aracnoides) y la paquimeninge o duramadre. La piamadre está íntimamente adherida al cerebro, estando constituida por tejido conjuntivo laxo que contiene numerosos vasos sanguíneos. La aracnoides (parte externa de la loptomeninge), es avascular; está parcialmente separada de la pía por el espacio subaracnoideo, el que está atravesado por finos tabiques conjuntivos (trabéculos aracnoideas) que unen a la pía con la aracnoides. Se observan células mesoteliales que tapizan la superficie externa de la pía y los tabiques aracnoideos.

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- 31 La duramadre es la meninge más externa, constituida por tejido conjuntivo denso, se observan grandes vasos sanguíneos. Entre la duramadre y aracnoides, se encuentra un espacio virtual: el espacio subdural. PLEXOS COROIDEOS Corte de plexos coroideos.- Preparado Nº28 Coloración: H-E Los plexos coroideos están constituidos por una simple capa de epitelio cúbico o cilíndrico y tejido conjuntivo plial ricamente vascularizado. Note los repliegues y dobleces de la tela coroidea, y los numerosos capilares en el tejido conjuntivo plial. NERVIO Corte transversal de nervio.- Preparado N°30 Coloración: H-E Epineuro.- Tejido conjuntivo fibrilar laxo intersticial, con vasos sanguíneos que rodean al nervio. Perineuro.- Tejido conjuntivo que partiendo del epineuro, rodea y separa los fascículos de fibras nerviosas. Endoneuro.- Finos tractos conjuntivos que parten del perineuro y que envuelven a las fibras nerviosas o a pequeños grupos de éstos. Los núcleos que se observan pertenecen a las células de Schwann y a fibroblastos del tejido conjuntivo. Las secciones de las fibras nerviosas aparecen como conductillos huecos, debido a que la mielina ha sido disuelta por el xilol. GANGLIO ESPINAL Corte longitudinal de ganglio espinal.- Preparado N°29 Coloración: H-E El ganglio espinal está envuelto en una cápsula de tejido conjuntivo. Las células nerviosas ganglionares corresponden a neuronas pseudomonopolares, las que están rodeadas por células aplanadas (células pericelulares). Entre las células ganglionares se encuentran fibras nerviosas mielínicas, que presentan las prolongaciones del soma neuronal y que funcionalmente corresponden al axón y a la dendrita.

Concepto a fijar.- Las neuronas de los ganglios raquídeos, representan la primera neurona (protoneurona) de la vía sensitiva.

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- 32 TERMINACIONES NERVIOSAS EN EL TEJIDO CONJUNTIVO CORPÚSCULO DE MEISSNER Corte de pulpejo de dedo.- Preparado N°41 Coloración: H-E Los corpúsculos de Meissner están situados en las papilas dérmicas y son estructuras que recogen la sensibilidad táctil. Son de forma ovoide, estando formados por células conjuntivas aplanadas y envueltos por una cápsula de tejido conjuntivo. Los corpúsculos de Meissner están en relación con una fibra nerviosa. CORPÚSCULO DE VATER-PACINI Corte de pulpejo de dedo.- Preparado N°41 Coloración: H-E Los corpúsculos de Vater-Pacini están situados en la parte interna de la dermis profunda y en la hipodermis; son aparatos que recogen la sensibilidad de presión superficial. Son de forma redondeada, de gran tamaño (algunos como la cabeza de un alfiler). En la parte central se observa, el bulbo el cual está rodeado por laminillas de tejido conjuntivo; estas laminillas recuerdan los anillos concéntricos de un tronco de árbol recién cortado. El bulbo está en relación con una fibra nerviosa.

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PRÁCTICA 2 SANGRE La sangre puede ser considerada como un tipo de tejido conjuntivo constituido por células libres (elementos formes) y una sustancia intercelular líquida (plasma). La sangre, como la mayor parte de los tejidos conjuntivos, se origina del mesénquima. Entre las células se distinguen los glóbulos rojos o eritrocitos (G. erythrós, rojo), los glóbulos blancos o leucocitos (G. leukós, blanco) y las plaquetas. El plasma es una solución de coloides y cristaloides. Está compuesto de 90% de agua y 10% de sustancias sólidas. Recuento globular y Fórmula leucocitaria Se trata de determinar el número de glóbulos rojos y de glóbulos blancos contenidos en un milímetro cúbico de sangre (recuento globular) y, establecer el porcentaje de los distintos tipos de leucocitos (Fórmula leucocitaria). Material y métodos Material

1. Pipetas de dilución.- Se utiliza dos pipetas, una para glóbulos rojos y otra para glóbulos blancos (Fig. 1). En las pipetas se distinguen dos partes: una capilar y otra ampular. La parte capilar equivale a 1 (unidad arbitraria) estando dividida en 10 partes iguales. La parte ampular de la pipeta para rojos equivale a 100 y la de blancos a 10, de ahí que, en la parte superior lleven un enlace con las marcas 101 y 11, respectivamente. Las pipetas contienen en su parte ampular un pequeño agitador de vidrio que sirve para asegurar una mezcla homogénea entre la sangre y el líquido de dilución. A las pipetas se les adapta un tubo de goma que, en uno de sus extremos, lleva una boquilla de plástico que sirve para aspirar.

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Fig. 1 Pipetas de dilución. Para glóbulos rojos. Para glóbulos blancos

2. Líquidos de dilución.- Se utiliza dos soluciones: una para glóbulos rojos y otra para glóbulos blancos. a) Para glóbulos blancos.- Se emplea una solución de ácido acético al 1% (líquido de Turk) a la que se le añade unas gotas de azul de metileno; esta solución produce hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) y colorea débilmente el núcleo de los leucocitos, lo que facilita su identificación. b) Para glóbulos rojos.- La solución es isotónica y tiene por objeto retardar los fenómenos de hemólisis. Se emplea la solución fisiológica del ClNa al 0.9% o al líquido de Hayem (solución isotónica de sulfito de sodio y bicloruro de mercurio). Cámara cuentaglóbulos.- Existen diversos modelos. Se describirá la cámara de Neubauer (Fig. 2) que es la que se va a utilizar en la práctica. La cámara es de cristal y está atravesada por dos surcos profundos que delimitan tres zonas: una central donde se encuentra grabada la cuadrícula y dos laterales que presentan las bandas de apoyo para colocar la laminilla cubreobjeto.

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Fig. 2 Cámara de Neubauer.

Fig. 3 Cuadrícula total de la cámara cuentaglóbulos. Retículo de Thoma al centro. El retículo de Thoma, consiste en un cuadrado que mide 1 mm por lado. Está dividido mediante rayas dobles y paralelas en 25 'cuadrados medianos' y cada uno de éstos, a su vez, está dividido por rayas simples y paralelas en 16 'cuadrados pequeños'; es en este retículo donde se cuentan los glóbulos rojos. En los cuatro ángulos del retículo de Thoma existen cuatro retículos adicionales, también de 1 mm de lado, cada uno dividido por rayas simples y paralelas, en 16 cuadrados. En los retículos adicionales se cuentan los glóbulos blancos. Las dos bandas de apoyo sobrepasan 0.1 mm de la superficie central, de tal forma que, cuando se coloca la laminilla cubreobjeto, queda un espacio de 0.1 mm entre la superficie central y cara inferior del cubreobjeto (altura de la cámara).

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- 36 Concepto a fijar.- El retículo de Thoma está dividido en 400 'cuadrados pequeños' ('cuadraditos') iguales, reunidos en grupos de 25 'cuadrados medianos'. Método Obtención de la sangre.- La muestra de sangre se obtiene corrientemente por punción del pulpejo de un dedo, mediante una lanceta descartable. También se puede utilizar la sangre extraída de una vena, recogida en un frasco con oxalato de amonio (anticoagulante). Frote o frotis.- Con una lámina portaobjeto se recoge una pequeña gota de sangre, haciéndose la extensión con otro portaobjeto que, debe ser colocado inclinado, formando un ángulo de 45°, tal como lo muestra la Fig. 4. La película de sangre debe ser delgada y de grosor uniforme, y sus bordes deben quedar a algunos milímetros del borde de la lámina portaobjeto. Carga de las pipetas: a) Glóbulos rojos.- Se aspira sangre hasta la marca 0.5 de la pipeta y luego con el líquido de dilución, se lleva hasta la marca 101 (dilución 1:200). b) Glóbulos blancos.- Se aspira sangre hasta la marca 0.5 de la pipeta para glóbulos blancos y luego, con el líquido de dilución se lleva hasta la marca 11 (dilución 1:20).

Fig. 4. Forma de hacer el frotis. Carga de la cámara.- Las primeras gotas de la pipeta se desechan. Se deposita entonces una gota de sangre diluida justo a nivel del borde del cubreobjeto para que la gota se extienda, por capilaridad, sobre la superficie central donde se encuentra el retículo; se deja sedimentar por un tiempo de 2 ó 3 minutos en posición horizontal. La suspensión no debe caer en los surcos de la cámara.

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- 37 Recuento a) Glóbulos rojos.- Observando con el objetivo de mayor aumento (40x y ocular 10x) se cuentan los glóbulos en 80 'cuadrados pequeños' repartidos en 5 'cuadrados medianos', ubicados en distintas zonas del retículo (los situados diagonalmente, o los 'cuadrados medianos' de los cuatro ángulos del retículo, y el cuadrado central). La figura 5 muestra un 'cuadrado mediano' con glóbulos rojos. Al contarse los glóbulos se excluyen los situados en las líneas superior e izquierda pero se cuentan los que se hallan sobre las líneas inferior y derecha de los cuadrados.

Fig. 5 "Un cuadrado mediano" (400x) (1/25 mm2) del Retículo de Thoma

Cálculo.- Para conocer el número de glóbulos rojos contenidos en 1 mm3 de sangre, se hace el siguiente cálculo: El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos de los 5 cuadrados medianos, se multiplica por 5, por 10 y por 200. Se multiplica por 5, porque se ha contado únicamente la 1/5 parte del mm2. Se multiplica por 10 para obtener el número de elementos en 1 mm3, considerando que la altura de la cámara es de 0.1 mm. Se multiplica por 200, porque es el título de la dilución (1:200).

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- 38 Se anotará un ejemplo: Supongamos que se han contenido 450 glóbulos rojos en los 5 'cuadrados medianos'. Tenemos: Número de hematíes = 450 x (5 x 10 x 200) Número de hematíes = 450,000 x 10,000 Resultado: 4'500,000 hematíes x mm3 Regla práctica.- Al resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos rojos en los 5 'cuadrados medianos', se agrega 4 ceros. a) Glóbulos blancos.- Empleando el objetivo de menor aumento y el ocular de 10x, se cuentan los glóbulos blancos en los retículos adicionales. Cálculo.- El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos blancos en los 4 retículos adicionales, se divide por 4 y se multiplica por 10 y por 20. Se divide por 4, puesto que se han contado 4 mm. Se multiplica por 10, para obtener el número de elementos en 1 mm3, considerando que la altura de la cámara es de 0.1 mm. Se multiplica por 20, porque es el título de la dilución(1/20), Ejemplo: Supongamos que se han contado 156 glóbulos blancos en los 4 retículos adicionales (38, 40, 36, 42), Tenemos: N° de leucocitos = 156 x 10 x 10 = 156 x 100 = 78 x 100 2 2 Resultado: 7,800 leucocitos por mm3 Regla práctica.- El resultado obtenido de la cuenta de los glóbulos blancos en los 4 mm2, se divide por 2 y se agrega 2 ceros. Coloración.- Los extendidos de sangre se tiñen con los colorantes de Leishman 2 o Wright, que son derivados del Romanowsky. Para colorear un frotis de sangre se procede así: 1. Se cubre el frotis con el colorante3, dejándolo actuar durante 3 minutos. 2. Se agrega con un gotero agua destilada tamponada.

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Compuestos formados por la unión de colorantes ácidos (eosina) y básicos (azul de metileno). El azul de metileno está parcialmente oxidado (azul). 3

La fijación la realiza el solvente del colorante(alcohol metílico).

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- 39 3. Transcurridos 3 ó 4 minutos se lava el extendido con agua corriente, dejándole secar espontáneamente.

Fig. 6 Determinación de la Fórmula leucocitaria. Se cuentan 50 glóbulos blancos en cada borde del frotis. Se recorre el reparado en la forma que indica la línea quebrada. Fórmula leucocitaria.- Expresa el porcentaje de cada una de las distintas clases de leucocitos. Se determina identificando y contando 100 glóbulos blancos (50 en cada borde) de un frotis coloreado, y recorriendo el campo en línea quebrada, tal como lo indica la Fig. 6. Frotis de la sangre humana Coloración Wright.- Preparado N°32 El colorante Wright está compuesto de una mezcla de eosina amarilla, azul de metileno, violeta de metileno y azul de metileno. Para preparar la solución, la mezcla se disuelve en alcohol metílico. En la identificación de las distintas células sanguíneas debe consultarse láminas de microfotografías, impresas en colores. Los dibujos de las células sanguíneas en el Cuaderno de Trabajos Prácticos deben ser hechos con el mayor esmero y cuidado, procurando dar el color y tono adecuado al citoplasma y núcleo. Igualmente es importante guardar la proporción de las medidas entre las diversas células tomando como referencia el tamaño de un glóbulo rojo (7 a 8 u). Enfoque en un borde del frotis utilizando el objetivo de inmersión. La identificación de las diferentes clases de leucocitos debe hacerse con objetivo de inmersión. Observación:

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- 40 1. Glóbulos rojos.- Su diámetro medio es de 7. 5 micras. Llamados también eritrocitos o hematíes, son células anucleadas fácilmente reconocibles por su acidofilia, se tiñen de color rojo. Se observa una zona clara central que insensiblemente se continúa con la zona periférica de la célula, teñida más intensamente. 2. Glóbulos blancos.- Su diámetro varía de 9 a 20 micras. Granulocitos.- Llamados también leucocitos, poseen núcleo poliformo, lobulado, por lo que se habla también de leucocitos polimorfonucleares. Se caracterizan porque su citoplasma contiene abundantes granulaciones específicas y, que de acuerdo con su comportamiento con los colorantes, se distinguen los siguientes tipos o clases: Neutrófilos.- de 9 a 12 u de tamaño. Su citoplasma está repleto de abundantes y finísimas granulaciones homogéneas que aparecen teñidas de color lila o rosa salmón. Este tipo de granulaciones liga tanto los colorantes ácidos como básicos, pero no en forma intensa. Se distinguen 4 tipos de neutrófilos: mielocitos, metamielocitos, abastonados y segmentados. En los mielocitos el núcleo es de forma oval o redonda (normalmente no se encuentran en sangre periférica). En los metamielocitos o juveniles, el núcleo presenta una pequeña escotadura. En los abastonados o cayados, la forma del núcleo es en banda o en cayado. Puede presentar un esbozo de segmentación pero sin llegar a la estrangulación. En los segmentados, el núcleo es lobulado, presentando dos, tres, cuatro o cinco lobulaciones, pero éstos están siempre unidos por filamentos de cromatina. El núcleo se tiñe intensamente de color violado con los colorantes básicos. El número de lobulaciones aumenta progresivamente al envejecer la célula.

Eosinófilos.- De 10 a 14 u de diámetro. Su citoplasma está lleno de granulaciones gruesas, redondeadas y de tamaño uniforme que aparecen teñidas de color rojo debido a su afinidad por los colorantes ácidos (acidofilia). El núcleo, por lo general, presenta 2 lobulaciones unidas por filamentos de cromatina tomando el aspecto del llamado núcleo "en alforja". Basófilos.- De 8 a 10 u de tamaño. El citoplasma contiene granulaciones grandes, toscas e irregulares teñidas de color azul oscuro por los colorantes básicos. El núcleo, muchas veces de forma redondeada, otras algo lobulado y está más o menos oculto por las granulaciones del citoplasma que lo enmascaran. Agranulocitos.- Se caracterizan por la ausencia en citoplasma de granulaciones específicas. Comprenden a los linfocitos y monocitos. Linfocitos.- De 7 a 10 u de tamaño. El núcleo es redondeado y casi ocupa la totalidad del citoplasma. Tiene una es-

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- 41 tructura compacta debido a que la cromatina está sumamente condensada, a veces presenta una ligera escotadura lateral, pero nunca está lobulado. El citoplasma es escaso, basófilo de color azul cielo claro, límpido y con escasas granulaciones azurófilas (granulaciones inespecíficas). En algunas células es tan escaso el citoplasma que únicamente el núcleo es distinguible. Monocitos.- De 10 a 20 u de tamaño. Son células cuyo núcleo presenta forma redondeada o reniforme, a veces con escotaduras que le dan el aspecto pseudolobulado). La cromatina del núcleo está finamente estructurada, constituye una malla un poco laxa, tiñiéndose con menor intensidad que el linfocito. El citoplasma es basófilo, de color azul grisáceo, azul terroso, pulverulento y con regular cantidad de finas granulaciones azurófilas. Plaquetas.- De 2 a 2 u de tamaño. Son pequeños discos aplanados de forma ovalada o redondeada que se observan dispersas y aglutinadas en masas irregulares. En cada una de ellas se distinguen dos zonas: una central (cromatómero) y de estructura granular, se tiñe de color violado o azul violado y otra zona periférica (hialómero) que consiste en un halo transparente de color azul muy pálido.4 Características diferenciales de linfocitos y monocitos Linfocito

Monocito

1. Núcleo: la cromatina está sumamen- 1. Núcleo: la cromatina constituye una te condensada, tiñéndose intensamalla un poco laxa, tiñéndose con mente. menor intensidad. 2. Citoplasma: basófilo, de color azul cielo claro, límpido.

2. Citoplasma: basófilo de color azul grisáceo, azul sucio.

3. Forma de núcleo: redondeado, a veces con una ligera escotadura lateral.

3. Forma de núcleo: redondeado, reniforme, pseudolobulado.

4. Granulaciones: azurófilas finas en poca cantidad.

4. Granulaciones: azurófilas extremadamente finas y en regular cantidad.

4

En algunos frotis puede observarse leucocitos degenerados. Estas células presentan pérdida de los detalles nucleares y de la estructura citoplasmática; hay disminución ostensible en la intensidad de la tinción. Las células aparecen de mayor tamaño que la normal.

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FORMULA LEUCOCITARIA (Normal)

Mielocitos

0%

Metamielocitos

0%

Abastonados

0a5%

Segmentados

60 a 70%

Eosinófilos

2a4%

Basófilos

0a1%

Linfocitos

20 a 30%

Monocitos

3a8%

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PRÁCTICA 3 APARATO CIRCULATORIO CORAZÓN.- FIBRAS MUSCULARES DE PURKINJE Corte de corazón humano.- Preparado N°20 Coloración: H-E Dibujo: menor aumento Endocardio.- Es la capa interna, se compone de una membrana delgada conjuntiva tapizada por endotelio. Se observa algunas fibras musculares lisas en esta capa. Miocardio.- Es la capa media, constituida por una variedad de tejido muscular estriado. Debajo del endocardio se observa la capa de fibras musculares de Purkinje, que se caracterizan por presentar las miofibrillas en la periferia. Los espacios vacíos que se observan corresponden al glucógeno que no se colorea con eosina. Para ver esta zona se debe realizar la reacción histoquímica del ácido peryódicoSchiff (PAS) al cual dará una coloración Magenta Epicardio.- Es la capa más externa, representa la hoja visceral del saco pericárdico, estando constituido por tejido conjuntivo laxo y revestido por mesotelio. ARTERIA Y VENAS Corte con paquete vásculo-nervioso braquial. Preparado N°39 Coloración: H-E Dibujo: menor aumento Arteria: Túnica interna o íntima (endoarteria). Formada por: (1) endotelio, (2) una capa subendotelial de tejido conjuntivo y (3) una membrana elástica interna (señala el límite entre la íntima y la media). Túnica media o muscular (mesoarteria). Está constituida por varias capas de fibras musculares lisas dispuestas circularmente. Entre las fibras musculares se observa pequeña cantidad de tejido conjuntivo fibrilar. Túnica externa o adventicia (periarteria). Constituida por tejido conjuntivo laxo que contiene fibras colágenas y elásticas. Una entre la media y la adventicia. Vena: Observe que el grosor de su pared es de menor grosor que la arteria correspondiente. Ausencia de la membrana elástica interna. Túnica interna o íntima (endovena). Está constituida por endotelio y tejido conjuntivo subendotelial.

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- 44 Túnica media o muscular (mesovena). Formada por fibras musculares lisas entre las cuales se observa tejido conjuntivo laxo intersticial. En relación con la arteria correspondiente, su grosor es menor. Túnica externa o adventicia (perivena). Está constituido por tejido conjuntivo fibrilar laxo por el cual transcurren vasos y nervios. Nervios.- Se observan secciones de nervios. ARTERIA ELÁSTICA Corte transversal de aorta. Preparado N°37 Coloración: fucsina-resorcina Túnica interna o íntima (endoarteria). Constituido por: (1) endotelio, (2) tejido conjuntivo subendotelial con fibras elásticas y (3) membrana elástica interna. Túnica media o muscular (mesoarteria). Constituida por membranas elásticas fenestradas* que transcurren espiralmente y que se anastomosan entre sí para formar redes. Túnica externa o adventicia (periarteria). Formada por tejido conjuntivo con fibras colágena y elásticas. Se observan vasos sanguíneos (vaso vasorum).

VENA TIPO CAVA INFERIOR Corte transversal de vena cava inferior. Preparado N°40 Coloración: H-E Dibujo: menor aumento Túnica interna o íntima (endovena). Constituida por: (1) endotelio, (2) capa subendotelial de tejido conjuntivo, conteniendo algunas fibras musculares lisas de orientación circular y oblicua. Túnica media (mesovena). Escasamente desarrollada; está formada por tejido conjuntivo fibrilar con escasas fibras musculares lisas de orientación circular. Túnica externa o adventicia (perivena). Es de gran desarrollo, forma parte de la pared; está constituida por haces de fibras musculares lisas orientadas en sentido longitudinal y que en el preparado, se ven cortadas transversalmente. Separando los haces de fibras musculares se observa tejido conjuntivo laxo. ___________ * Los pequeños espacios o huecos de las membranas elásticas fenestradas están ocupadas por fibras elásticas y fibras musculares lisas (no se ven).

ARTERIOLAS, VÉNULAS Y CAPILARES Corte de epiplón de perro. Preparado N°7

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- 45 Coloración: H-E Dibujo: mayor aumento Arteriolas (pequeñas arterias). Se caracterizan por su pared muscular relativamente gruesa con relación a su pequeño calibre. Vénulas (venas pequeñas). Consta de una capa endotelial revestida de tejido conjuntivo fibrilar. Capilares. Son los vasos de menor calibre y están constituidos por una sola capa de célula endoteliales planas. En este preparado los capilares sanguíneos presentan su luz ocupada por hematíes (se ven como puntos rojos). Algunas diferencias entre arteria y vena en un corte histológico Las arterias son de pared muscular más gruesa y calibre menor que las venas correspondientes. En los cortes transversales la luz arterial aparece por lo general redondeada con su borde interno ondulado5, en cambio las venas siempre tienden a colapsarse no presentando su borde interno al aspecto ondulado. Con frecuencia, en la luz de las venas, se observa un coágulo sanguíneo o sangre hemolizada. En las arterias no sucede así aparecen vacías.

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Resulta de la centración postmorten de la capa muscular.

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PRÁCTICA 4 ÓRGANOS LINFOIDEOS Tejido Linfoideo.- Está formado por el tejido reticular juntamente con gran cantidad de linfocitos. El tejido linfoideo o sustancia adenoidea forma los llamados órganos linfoideos. GANGLIO LINFÁTICO Corte ganglio linfático. Preparado N°33 Coloración: H-E Topografía: zona cortical y zona medular. El Estroma (armazón) está formado por: la cápsula, tejido conjuntivo fibrilar que envuelve al ganglio, las trabéculas, finos tabiques conectivos que arrancan de la cápsula y se dirigen al interior del órgano donde se anastomosan entre sí, Fibras de reticulina (en este preparado no se ven). El Parénquima, está representado por la sustancia adenoidea que ocupa las cavidades que quedan entre los trabéculas. La sustancia adenoidea, según la zona del ganglio, se disponen de dos formas diferentes: a) En la zona cortical se dispone en forma redondeada, constituyendo los folículos o nódulos linfáticos. En cada nódulo linfático se distingue: Una zona central (centro germinal) de aspecto claro, formado principalmente por linfoblastos (células jóvenes de gran tamaño y con mayor cantidad de citoplasma que los linfocitos). Una zona periférica de aspecto oscuro formada por linfocitos (células adultas de escaso citoplasma y núcleo muy rico en cromatina). b) En la zona medular, la sustancia adenoidea se dispone en cordones constituyendo los cordones linfáticos. Estos se anastomosan entre sí y con los nódulos linfáticos, forman en conjunto, un plexo de mallas anchas. Los Senos Linfáticos representan el espacio entre las trabéculas conjuntivas y las formaciones adenoideas. Los senos linfáticos son fagocitarios (tienen macrófagos). Según la situación de los senos linfáticos se distinguen: el seno marginal o subcapsular, los senos perinodulares y los senos modulares. Filio del ganglio. Se ven vasos sanguíneos y en algunos preparados se distingue el linfático aferente.

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- 47 GANGLIO LINFÁTICO.- FIBRAS DE RETICULINA Corte de ganglio linfático. Preparado N°14 Coloración: Hilder (impregnación argéntica) El estroma (armazón) del tejido linfoideo o sustancia asenoidea (nódulos y cordones linfáticos) está constituido por fibras de reticulina que se ramifican y anastomosan formando una red, continuándose con el tejido conectivo de las trabéculas. Nótese como las fibras de reticulina de la sustancia adenoidea envuelve a los senos linfáticos (esto se ve muy bien en el seno marginal). GANGLIO LINFÁTICO. MACRÓFAGOS Corte de ganglio mediastinal antracético Coloración: H-E Ganglio antracótico es aquel que contiene partículas de carbón como resultado de la fagocitosis efectuada por los macrófagos. El ganglio que representamos perteneció a un sujeto de edad avanzada. Los macrófagos aparecen de color negro debido a que éstos han fagocitado las partículas de carbón que el sujeto inhaló en vida. Utilizando el lente de menor aumento el alumno debe hacer un reconocimiento de la zona cortical y de la zona medular. BAZO Corte de bazo humano. Preparado N°35 Coloración: H-E Topografía: pulpa blanca y pulpa roja. El Estroma, está constituida por: la cápsula, es fibromuscular y su superficie externa está tapizada por mesotelio, las trabéculas, gruesos tabiques conectivos que parten de la cápsula, se anastomosan en el interior del órgano y forman un sistema de cavidades incompletas, Fibras de reticulina (no se ven en este preparado). El Parénquima, está representado por la sustancia adenoidea que constituye la pulpa esplénica y que ocupa las cavidades formadas por las trabéculas. La sustancia adenoidea o tejido linfoideo se disponen nódulos o folículos (corpúsculos de Malpighi) y en cordones (cordones de Billroth). Los corpúsculos de Malpighi o nódulos esplénicos se encuentran diseminados irregularmente; en cada uso de ellos se ve una arteriola (arteriola central). El con-

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- 48 junto de estos corpúsculos constituye la pulpa blanca. Los cordones de Billroth, son formaciones trabeculares de tejido linfoideo de estructura laxa, esponjosa que se ramifica y anastomosan formando espacios lagunares irregulares (senos venosos). Senos venosos o capilares simosoides esplénicos.- Son sistemas de lagunas sanguíneas, irregulares, anastomosadas entre sí y delimitadas por los cordones de Billroth. La pared de los senos venosos está revestida interiormente por células fagocitarias (macrófagos) pertenecientes al sistema fagocítico monocitario (antes RES). La pulpa roja del bazo está formada por los cordones de Billiroth y los senos venosos. Vascularización del bazo.- En las trabéculas conjuntivas se observan cortes de arterias y venas. Cerca de los corpúsculos de Malpighi están las arterias envainadas o de Schweigger-Seidel o elipsoides. Estas arterias se caracterizan por haber perdido la capa media rodeándose de una vaina constituida por un sincitio celular cuyos núcleos están orientados concéntricamente.

BAZO Corte de bazo humano, Preparado N°36 Impregnación argéntica (Wilder) El estroma (armazón) de la sustancia adenoidea (corpúsculo de Malpighi y cordones de Billroth) está formado por fibras de reticulina que se ramifican y anastomosan en red.

Timo Corte de timo Coloración: H-E El timo se presenta dividido en lobulillos de forma poligonal. Cada lobulillo está constituido por: Zona cortical.- Gran número de células redondeadas denominadas timocitos (linfocitos) y células epiteliales reticulares (difícil distinguirlas por la gran cantidad de timocitos). Zona medular.- Formada por timocitos (no tan numerosos) como en la zona cortical y células epiteliales reticulares, estas últimas forman un sincitio. Se observan formaciones redondeadas acidófilas que reciben el nombre de corpúsculos de Hall. NOTA.- Las células epiteliales reticulares del timo son de origen endodérmico y no tienen la propiedad de coloidopexia ni fagocitosis.

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PRÁCTICA 5 PIEL Y ANEXOS PIEL GRUESA Corte de pulpejo de dedo. Preparado N°41 Coloración: H-E La piel consta de dos capas: epidermis y dermis. Epidermis.- Está constituida por un epitelio poliestratificado plano cornificado. Se distinguen los siguientes estratos: Estrato basal.- Formado por una sola capa de células cilíndricas que se implantan perpendicularmente en la membrana basal. Se observan frecuentemente figuras mitóticas y finos gránulos de melanina. Estrato espinoso.- Formado por varias capas de células poliédricas; las que presentan los llamados "puentes intercelulares" que le dan a estas células un aspecto espinoso. Algunas veces se incluye al estrato basal y al espinoso en uno solo con el nombre de estrato de Malpighi. Estrato granuloso.- Formado por las dos o tres capas de células romboidales o fusiformes; su citoplasma contiene gránulos de queratohialina. Estrato lúcido.- Constituido por células aplanadas. Aparece como una banda homogénea de color rojo; los núcleos han degenerado. Estrato córneo.- Consta de varias capas de células que han perdido sus núcleos (células muertas) y que están cargadas de queratina. Los espacios vacíos de forma lenticular que se observan en este estrato corresponden al lugar que ocupaban los núcleos. Las células más superficiales se descaman constantemente, constituyendo la capa descamante. Dermis; está situada debajo de la epidermis, estando constituido por tejido conjuntivo fibrilar. La dermis presenta elevaciones más o menos de forma cónica que hacen entrantes en la epidermis, con las papilas dérmicas. En la dermis se puede distinguir dos zonas que se continúan sin demarcación precisa: la zona papilar y la zona reticular. La zona papilar, es la parte de la dermis situada inmediatamente debajo de la epidermis, representada por las papilas dérmicas y constituida por tejido conjuntivo laxo. Las fibras colágena forman finos haces de trayecto ondulante; se observan gran cantidad de elementos celulares (fibroblastos) y gran número de capilares sanguíneos. En las papilas se pueden observar los corpúsculos de Meissner.

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- 50 La zona reticular, situada a continuación de la zona papilar, con la que se continúa sin límite preciso de separación, está constituida por tejido adiposo. Las células adiposas se encuentran formando lobulillos adiposos apareciendo vacías en este preparado. Cuando el tejido adiposo alcanza un gran desarrollo recibe el nombre de panículo-adiposo. Glándulas Sudoríparas.- Es una glándula tubulosa simple apelotonada (glomerular) merocrina. Se distingue la parte secretora y el conducto excretor. La porción secretora es glomerular, está situada inmediatamente debajo de la dermis, en la hipodermia y se halla revestida por un epitelio simple de células cúbicas o cilíndricas. Esta porción por hallarse arrollada (apelotonada sobre sí misma), en los cortes aparecen pequeños acúmulos de secciones transversales u oblicuas. El citoplasma de estas células se tiñe menos que el de las células que forman el conducto excretor. La porción excretora o conducto excretor comienza en el glomérulo de la glándula y es de diámetro menor que la secretora. Se consideran dos segmentos: El segmento profundo formado por dos capas de células cúbicas, atraviesa la dermis con ligeras ondulaciones llegando hasta la epidermis. El citoplasma de las células aparece más teñido que el de las células de la porción secretora. El segmento superficial que carece de pared propia, asciende en espiral a través de la epidermis hasta alcanzar la superficie de la piel. En el estrato córneo se observan unos espacios claros redondeados, son los poros sudoríparos y corresponden a los orificios de salida de los conductos excretores de las glándulas sudoríparas.

PIEL DELGADA Corte de piel de abdomen. Preparado N°42 Coloración: H-E Epidermis.- Epitelio poliestratificado plano cornificado. El estrato lúcido comúnmente está ausente en este tipo de piel. Compare el estrato córneo con el de la piel gruesa. Dermis.- Dermis papilar y dermis reticular. Hipodermis

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- 51 PIEL DELGADA Corte de cuero cabelludo. Preparado N°43 En este preparado se estudiará los pelos, las glándulas sebáceas y el músculo erector del pelo que en conjunto se les conoce con el nombre de aparato pilosebáceo. PELOS.- Están formados por células epiteliales queratinizadas, en cada uno de ellos se distingue: El tallo, porción libre que sale de la superficie cutánea. La raíz, porción enclavada en la piel y contenida en el folículo piloso. La raíz termina en un abultamiento llamado bulbo piloso en cuya concavidad inferior penetra el tejido conjuntivo de la dermis formando la papila del pelo. En un pelo (tallo) se distingue de dentro a fuera, tres capas: 1. La sustancia medular o médula 2. La sustancia cortical o corteza y 3. La cutícula del pelo.

El folículo piloso se encuentra en la dermis profunda, está constituido por las vainas de la raíz de pelo y el saco fibroso. Las vainas de la raíz del pelo son dependencia de la epidermis y son en número de dos: una interna y otra externa. La vaina radicular externa es una simple prolongación del estrato germinativo (estratos basal y espinoso). El saco fibroso, es una formación conjuntiva de la dermis que representa la cubierta más externa del folículo piloso. Glándulas sebáceas.- Se distinguen por su color rosa claro con que se tiñen. El citoplasma de las células granulares aparece vacío debido a que la grasa contenida ha sido disuelta por el xilol. El conducto excretor de la glándula sebácea posee epitelio poliestratificado plano y desemboca en el folículo piloso (cuello del folículo), continuándose con la vaina de la raíz externa. El músculo erector del pelo, es músculo liso, se le observa como bandas oblicuas de color rojo. Sus puntos de inserción son: la zona papilar de la dermis y de la dermis y el saco fibroso del folículo piloso. Glándulas sudoríparas (véase al respecto lo anotado anteriormente). Se observan arterias, venas y capilares nerviosos.

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- 52 UÑA Corte longitudinal de la tercera falange de un feto humano. Preparado N°45 Coloración: H-E La uña está constituida por una lámina (varias capas de células planas cornificadas sin núcleo en la que se distingue el cuerpo, la raíz y el borde libre de la uña). El cuerpo ungueal es la porción más extensa y que reposa sobre el lecho ungueal. La raíz de la uña es la porción proximal que descansa sobre la matriz ungueal y está recubierta por el pliegue ungueal proximal El borde libre es la porción distal de la uña no adherida y esta separada de la piel subyacente por el surco sub ungueal. El lecho ungueal.- Está constituido por epitelio y corion. El epitelio está formado por los estratos basal y espinoso de la epidermis. El corion está ricamente vascularizado. La matriz ungueal es la parte del lecho ungueal sobre la cual reposa la raíz de la uña. En esta zona el estrato espinoso alcanza gran desarrollo (es más grueso). Pliegue ungueal proximal.- Es la porción de la epidermis que recubre la raíz de la uña. Eponiquio.- Es una delgada laminilla córnea proveniente del pliegue ungular proximal que cubre una pequeñísima porción del cuerpo de la uña. Hiponiquio.- La capa córnea de la piel subyacente al borde de la uña, al reflejarse por debajo de ésta, constituye un hiponiquio.

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PRÁCTICA 6 MUCOSAS Las mucosas son membranas que revisten cavidades que se abren al exterior. Están constituidas por epitelio y corion, recorriendo la mayor parte de las veces, por glándulas que mantienen constantemente húmeda la superficie. Se llama corion o lámina propia al tejido conjuntivo subyacente al epitelio. SEROSAS Las serosas son formaciones masodérmicas que revisten cavidades cerradas al exterior. Están constituidas por dos capas: mesotelio y tejido conjuntivo laxo, tipo membranoso.

MESENTERIO DE RANA (EXTENSIÓN DE) Impregnación argéntica El mesenterio es un repliegue peritoneal que fija el intestino delgado a la pared posterior del abdomen. Está formado por dos hojas mesoteliales que encierran tejido conjuntivo laxo, tipo membranoso. Se observa el mesotelio formado por una sola capa de células planas de forma poligonal dispuestas a semejanza de las losetas de un piso. Por transparencia se observan capilares sanguíneas del tejido conjuntivo.

EPIPLÓN Corte de epiplón de rata Coloración intravital con azul de trypan. Los núcleos fueron teñidos de color rojo con Nuclear Fast Red (Kernechtrot). El epiplón, dependencia del peritoneo está constituido por un armazón conjuntiva revestida por células mesoteliales. En el tejido conjuntivo se observan gran cantidad de células adiposas, fibroblastos, macrófagos así como también arteriolas, vénulas y capilares (sanguíneos y linfáticos).

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PRÁCTICA 7 APARATO DIGESTIVO: BOCA El aparato digestivo comprende: tubo digestivo y glándulas anexas al tubo digestivo. El tubo digestivo, es una porción supradiafragmática (boca-estómago), está revestido por epitelio poliestratificado plano no cornificado, en cambio en su porción infradiafragmático (estómago-recto) el epitelio es monoestratificado cilíndrico. Las células del intestino son de dos clases: células con "chapa estriada" o absorbentes y células caliciformes. En el intestino delgado hay un gran predominio de las células con "chapa" sobre las caliciformes mientras que en el intestino grueso las células predominantes son las caliciformes.

LABIO HUMANO Corte arteroposterior de labio superior. Preparado N°45 Coloración: H-E Límite cutáneo-mucoso.- Distinga la parte cutánea (revestida por epitelio poliestratificado, plano cornificado) y la parte mucosa roja del labio, revestida por epitelio poliestratificado plano no cornificado. Note las elevaciones altas de corion (papilar) que se insinúan en el epitelio. La parte cutánea.- Está constituido por piel y sus anexos (pelos y folículos pilosos, glándulas sebáceas, músculo arreotor del pelo y glándulas sudoríparas). La parte mucosa.- Está constituida por epitelio poliestratificado plano no cornificado y lámina propia en la cual se observa las glándulas labiales (pequeñas glándulas salivales). Estas glándulas son mayormente mucosas. Al recorrer el preparado se observan cortes de vasos sanguíneos (capilares, arterias, venas), nervios y secciones de fibras musculares estriadas. LENGUA Corte de lengua humana, en la región de la punta. Preparado N°46. Coloración: H-E Mucosa lingual.- Está formada por epitelio poliestratificado plano no cornificado y láminas propia o corion. El corion está formado por tejido conjuntivo denso y presenta elevaciones o ramificaciones que se insinúan en el epitelio suprayacente. Estas elevaciones del corion se llaman papilas dérmicas siendo más numerosas y de mayor tamaño en la región del dorso de la lengua (dato para diferenciar la región dorsal de la ventral). Distinga la mucosa lingual del dorso, de la mucosa lingual de la región ventral.

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- 55 Musculatura de la lengua.- Inmediatamente a continuación del corion de observa fibras musculares estriadas cortadas transversalmente, oblicuas y longitudinalmente (recuerde que los músculos linguales están orientados en diferentes direcciones: vertical, transversal y longitudinal). El tejido conjuntivo intersticial situado entre las fibras musculares, contiene células adiposas, vasos sanguíneos y nervios. Las glándulas que se observan en esta región (punta) son mixtas (glándulas de Nhun). PAPILAS FILIFORMES Y FUNGIFORMES Corte de lengua de perro, en la región de la punta. Coloración: H-E Las papilas linguales son formaciones dermo-epidérmicas. Papilas filiformes.- son de forma cónicas Papilas fungiformes.- Presentan la forma característica, redondeada o aplanada y el epitelio que las recubre se adelgaza, a diferencia de lo que ocurre en las papilas filiformes en las que el epitelio se engruesa. PAPILA CALCIFORME Corte de lengua humana en la región de la "V" lingual Coloración: H-E La papila calciforme se encuentra rodeada por el surco circunvalador, valle o fosa. Las paredes que forman el antedicho surco reciben el nombre de muralla. Los botones o corpúsculos gustativos.- Se encuentran en el epitelio que reviste la muralla, Las células sostén y neuroepiteliales aparecen teñidas débilmente. Distinga el poro gustativo. En el corion se observa gran número de acinis glandulares serosos, son las glándulas de V. Ebner. En esta zona se ven vasos linfáticos. PALADAR BLANDO Corte parcial de paladar blando. Preparado N°47 Coloración: H-E Mucosa bucal en la región palatina.- Está formada por: Epitelio poliestratificado plano no cornificado y Corion recorrido por numerosas glándulas mucosas (glándulas palatinas).

Mucosa respiratoria.- Se encuentra revistiendo la cara dorsal del paladar blando y está constituido por:

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- 56 Epitelio pseudoestratificado cilíndrico ciliado con células calciformes. En algunas zonas de este epitelio se observan glándulas intraepiteliales (agrupación de células calciformes). Corion recorrido por numerosas glándulas mucosas (glándulas palatinas). Fibras musculares esqueléticas Se observa en la lámina propia de algunos preparados infiltración linfocitaria. AMÍGDALA PALATINA Corte de amígdala humana. Preparado N°48 Coloración: H-E Mucosa faríngea.- Formada por epitelio poliestratificado plano no cornificado y corion. El epitelio está intensamente infiltrado por linfocitos. Folículos linfoideos.- Sumergidos en el corion de la mucosa bucofaríngea. Están muy próximos entre sí (en algunos sitios se fusionan) y se distinguen paralelamente a la superficie de las criptas amigdalinas. Las criptas amigdalinas.- Están tapizadas por el epitelio poliestratificado plano de la mucosa bucofaríngea. Glándulas mucosas

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PRÁCTICA 8 APARATO DIGESTIVO: ODONTOGÉNESIS ESBOZO DE DIENTE Corte frontal de cabeza de feto humano (corte de mascarilla) Coloración: H-E Epitelio gingival, formado por epitelio poliestratificado plano. Lámina dentaria.- Placa epitelial que surge del epitelio gingival profundizándose en el mesénquima subyacente. Órgano de esmalte.- Se diferencia de la lámina o cresta dentaria. Tiene la forma de un saco con dos paredes: una externa, o capa externa del órgano del esmalte y otra interna o capa interna del órgano del esmalte. Entre las dos capas se encuentra la gelatina o pulpa del esmalte. Formado por células estrelladas con prolongaciones citoplasmáticas anastomóticas que forman en conjunto un retículo epitelial. Papila dentaria.- Está formada por el tejido mesenquimal que ocupa la cavidad del órgano del esmalte.

ESBOZO DE DIENTE (UN ESTADIO MÁS AVANZADO) Corte frontal de cabeza de feto humano Coloración: H-E Órgano del esmalte.- Se aprecia como las células de la capa interna del esmalte han adoptado forma cilíndrica recibiendo el nombre de adamantoblastos, ameloblastos o ganoblastos. Las células de la gelatina del órgano del esmalte se condensan y aplanan en la proximidad de los adamantoblastos constituyendo el secreto intermedio. El epitelio externo del órgano del esmalte está constituido por células cúbicas o aplanadas. Resumiendo, el órgano del esmalte está formado por: Epitelio interno (adamantoblastos, formadores de esmalte). Estrato intermedio. Gelatina o pulpa del esmalte y Epitelio externo. El órgano del esmalte tiene por función elaborar el esmalte y servir de molde para el futuro diente.

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- 58 Papila dentaria.- Algunas células de la papila dentaria, cercanas al esmalte, se diferencian en odontoblastos (se distinguen por su gran basofilia). Saco dentario.- Tejido conjuntivo que rodea al órgano del esmalte y a la pulpa dentaria. ESBOZO DE DIENTE MÁS AVANZADO Corte frontal de cabeza. Preparado N°60 Coloración: H-E Órgano del esmalte (véase descripción del preparado anterior). Los odontoblastos son células basófilas y que presentan en un extremo una prolongación citoplasmática denominada fibrilla dentaria o fibra de Tomes. La dentina se toma mediante un proceso similar al de la calcificación intramembranosa. Aparece como una franja rosada por dentro del esmalte. Se distingue también la predentina (se observa de color rosa pálido). En algunos preparados la papila se ha retraído formándose un espacio artificial.

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PRÁCTICA 9

Glándulas Salivales Antes de observar los preparados de las glándulas anexas al tubo digestivo, es imprescindible tener un conocimiento, elemental pero preciso, de la estructura de las glándulas salivales. Estructura de las glándulas salivales.- En las glándulas salivales hay que considerar: El adenómero o porción secretora El segmento intercalar o pasaje de Roll El conducto excreto-secretor o conducto estriado El conducto excretor propiamente dicho Adenómero.- Las células que constituyen el adenómero son de dos clases: serosas y mucosas. Si el adenómero está constituido únicamente por células serosas, el adenómero es seroso. Si el adenómero posee únicamente células mucosas, el adenómero es mucoso. Si el adenómero está formado por células serosas y células mucosas entonces el adenómero es mixto. Características estructurales de los adenómeros seroso y mucoso

Adenómero seroso

Adenómero mucoso

El citoplasma es basófilo, aparece bien teñido (se ve oscuro).

El citoplasma aparece débilmente teñido (se ve claro).

El núcleo es de forma redonda y situado cerca de la basal.

El núcleo es de forma aplanada, encontrándose retrasado hacia la basal. La luz del adenómero es mayor que la del adenómero seroso.

La luz del adenómero es muy pequeña.

Características estructurales de un adenómero mixto El adenómero mixto, las células serosas se disponen en la periferia de las células mucosas constituyendo en conjunto una especie de media luna que recibe el nombre de semiluna de Gianuzzi-Ebner (corrientemente se le dice semiluna de Gianuzzi).

Pieza intercalar.- Posee epitelio monoestratificado cébico o cúbico aplanado. Pe-

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- 60 queño calibre y luz pequeña. Conducto excreto-secretor.- Presenta las siguientes características: Epitelio monoestratificado El citoplasma de las células es fuertemente acidófilo (aparece teñido de color rojo por la eosina). Luz de gran tamaño. Conducto excretor propiamente dicho.- Posee las siguientes características: Epitelio monoestratificado cilíndrico, pseudoestratificado o poliestratificado, según el calibre del conductor. Luz grande. Clasificación de las glándulas salivales Atendiendo a su porción secretora, las glándulas salivales pueden ser: serosas, mucosas y mixtas, según tengan adenómero serosos, mucosos, mucosos o mixtos respectivamente Daremos algunos ejemplos; Son glándulas serosas puras, las glándulas de von Ebner, parótida y páncreas exocrino. Son glándulas mucosas puras, las glándulas de Weber (situadas en la base de la lengua), las glándulas esofágicas, las glándulas palatinas. Son glándulas mixtas, las glándulas de Nuhn (situadas en la punta de la lengua), las glándulas submaxilar y sublingual.

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- 61 Glándulas salival parótida Corte de parótida humana.- Preparado N° 59. Coloración H-E Adenómeros serosos.- El citoplasma de las células del adenómero aparece bien teñido (basófilo, se ve oscura). El núcleo es de forma redondeada y situado cerca de la basal. La luz es muy pequeña. Conductos secretores.- se distinguen Fácilmente. Tienen epitelio monoestratificado cúbico o cilíndrico: el citoplasma aparece teñido de color rojo o rosado (acidófilo); luz grande: Los conductos secretores se encuentran dentro de un lobulillo glandular (junto a los adenómeros) se llaman conductos excretores intralobulillares (son numerosos) y, aquellos que se hallan en el tejido conjuntivo que separa los lobulillos glandulares, reciben el nombre de conductores excretores interlobulillares (son de mayor calibre y algunos pueden presentar epitelio estratificado). Tejido conjuntivo interlobulillar.- Contiene vasos sanguíneos células adiposas y conductores excretores interlobulillares. GLÁNDULAS SALIVAL SUBMAXILAR Corte submaxilar.- Preparado N° 60. Coloración: H-E. Adenómero seroso (la mayoría), mucosos y mixtos: glándulas seromucosa. Adenómero mucosos (véase lo anotado anteriormente en parótida). Adenómeros mucosos.- El citoplasma de las células que forman el adenómero mucoso aparece débilmente teñido, el núcleo es de forma mayor que la del adenómero mucosos es posible distinguir en su periferia las células en cesta o de Boll. Adenómeros mixtos.- Las células serosas se disponen en la periferia de las células mucosas constituyendo una especie de media luz que recibe el nombre semiluna de Giannuzzi. Conductores excretores.- Intra- o interlobulillares.

Tejido conjuntivo interlobulillar.- Contiene vasos sanguíneos y conductos excretores interlobulillares. GLÁNDULA SALIVAL SUBLINGUAL Corte sublingual.- Preparado N° 61. Coloración H-E Adenómeros mucosos (la mayoría) serosas y mixtos: glándula mucosa serosa. Conductos excretores.- Se distinguen conductos excretores intra e interlobulillares.

Tejido conjuntivo interlobulillar.- conteniendo vasos sanguíneos y conductos excretores interlobulillares.

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PRÁCTICA 10 APARATO DIGESTIVO: TUBO DIGESTIVO ESÓFAGO Corte transversal de esófago en su tercio medio. Preparado N°51. Coloración: H-E Mucosa formada por: Epitelio poliestratificado plano no cornificado. Corion o lámina propia En algunos casos la lámina propia presenta glándulas predominantemente en sus porciones inicial y terminal; son las llamadas glándulas cardiales esofágicas (mucosas) denominadas así, por su semejanza con las glándulas cardiales del estómago. Muscularis mucosae o muscular de la mucosa.- Capa formada por fibras musculares lisas orientadas longitudinalmente. Esta capa se engruesa distalmente. Submucosa.- Constituida por tejido conjuntivo laxo conteniendo vasos sanguíneos, nervios, y glándulas esofágicas (mucoserosas) que están dispuestas más frecuentemente en las porciones inicial y terminal y son consideradas como una continuación de las glándulas salivares menores de la orofaringe. Muscular.- Está formada por fibras musculares dispuestas en dos capas: circular interna y longitudinal externa (CILE). La capa muscular proximal del esófago, en un segmento corto (aproximadamente 5%), está constituida por fibras musculares estriadas, inmediatamente distal a estas el músculo liso y el estriado se mezclan, predominando el músculo liso, y en su mitad inferior está compuesta solamente por fibras lisas. Adventicia.- Tejido conjuntivo que rodea al esófago. CARDIAS Corte longitudinal de cardias de perro. Preparado N°52 Coloración: H-E En la zona del esófago: Mucosa esofágica en la región cardial. Está formada por: Epitelio poliestratificado plano no cornificado y Corion con glándulas esofágicas cardiales. Las glándulas cardiales esofágicas son glándulas tubulares simples formadas por una sola clase de células, del tipo de células cervicales mucosas que forman las glándulas cardiales del estómago. Muscularis mucosae.- Fibras musculares lisas de disposición longitudinal. Esta capa es más gruesa que su correspondiente en el estómago.

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- 63 Submucosa.- Tejido conjuntivo laxo conteniendo glándulas mucoserosas (glándulas esofágicas). Muscular.- CILE (circular interna y longitudinal externa). Las fibras circulares internas aparecen cortadas transversalmente y las fibras longitudinales externas se ven cortadas longitudinalmente (recuerde la orientación del corte del preparado, longitudinal). Adventicia. En la zona del estómago: Mucosa gástrica en la región cardial.- Está constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico con células mucinógenas en su totalidad. El citoplasma de las células aparece claro (no se tiñe con la eosina). Observe como el epitelio se invagina y forma las criptas o fosetas gástricas. Se puede encontrar glándulas quísticas con epitelio mucinógeno. Este hallazgo no se encuentra usualmente en la mucosa del píloro. Corion con glándulas cardiales. Las glándulas cardiales son tubulares simples o ramificadas formadas por células del tipo de las células cervicales mucosas de las glándulas fúndicas. A medida que se alejan de la unión gastro-esofágica aparecen entre las células mucosas de las glándulas cardiales, las células principales y parietales que se van haciendo más numerosas. En esta forma hacen su aparición las glándulas fúndicas (Véase lo anotado en el preparado siguiente). Muscularis mucosae.- Fibras musculares lisas en capas circular interna y longitudinal externa. Submucosa.- Tejido conjuntivo laxo. No hay glándulas. Muscular.- Longitudinal externa, circular media, oblicua interna. Serosa.-

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ESTÓMAGO (REGIÓN FÚNDICA) Corte de estómago de perro a nivel del fondo. Preparado N°53 Coloración: H-E Mucosa gástrica.- Está formada por: Epitelio monoestratificado cilíndrico constituido por células mucinógenas. El epitelio presenta invaginaciones de poca profundidad llamadas criptas o fosetas gástricas. Corion recorrido por numerosas glándulas fúndicas. El tejido conjuntivo situado entre las glándulas (corion interglandular) es escaso debido a que las glándulas fúndicas están dispuestas muy juntas unas de otras. Las glándulas fúndicas.- Son glándulas tubulosas o ramificadas de trayecto tortuoso que se abren en el fondo de las fosetas gástricas. Están constituidas principalmente- por tres clases de células: células principales, células parietales y células cervicales mucosas. Las células principales o adelomorfas. Se llaman principales por ser las más numerosas e importantes de las glándulas fúndicas; son las que forman la luz glandular. El nombre de adelomorfas quiere decir sin forma precisa (a, sin; delos, preciso; morfos, forma) y, en los preparados corrientes coloreados con HE los límites de estas células son poco precisos. Las células principales elaboran pepsinógeno y otras enzimas digestivas. Las células parietales o delomorfas. Se llaman parietales porque residen en la periferia de la glándula no alcanzando la luz glándula. El nombre de delomorfas significa con forma precisa. El citoplasma de estas células se tiñe intensamente con los colorantes ácidos, en este caso con la eosina, aparece de color rojo lo que contrasta, con el citoplasma de las células principales que es basófilo. Las células parietales elaboran el HCl y el factor intrínseco. Las células cervicales mucosas se encuentran en la región del cuello de las glándulas fúndicas; aparecen claras a causa que la mucina no se tiñe con la eosina. Muscularis mucosae.- Delgada capa de fibras musculares lisas. Submucosa.- Formada por tejido conjuntivo laxo.- Plexo de Meissner.

Muscular.- Se distinguen por tres capas:

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- 65 Una interna oblicua Una media circular Una externa longitudinal En algunas zonas del preparado los haces musculares corren en diversas direcciones de manera que resulta difícil una separación de la capa muscular en capas de orientación definida. El Plexo de Auerbach está situado entre las capas circular interna y longitudinal externa. Serosa.- Consiste en una capa de tejido conjuntivo laxo, tipo membranoso cubierto por una capa única de células mesoteliales planas. Vasos sanguíneos. PÍLORO Corte longitudinal de píloro. Preparado N°54 Observación en la zona del estómago Mucosa gástrica en la región pilórica.- Está constituida por: Epitelio monoestratificado por células mucinógenas. Criptas gástricas profundas. Frecuentemente se encuentran células parietales, ya sea aisladas o en pequeños grupos en especial cercanamente a la mucosa fúndica. Corion en el que están sumergidas las glándulas pilóricas. El tejido conjuntivo situado entre las glándulas pilóricas (corion interglandular) es más abundante que en la región fúndica, a esto se debe que las glándulas están más separadas y no tan juntas unas de otras como ocurre en la región fúndica. Hay infiltración linfocitaria. En algunos preparados se ven folículos linfoides primarios (agregados de linfocitos pequeños). Las glándulas pilóricas son glándulas tubulosas simples o ramificadas de trayecto bastante tortuoso, razón por la cual en el preparado aparecen con frecuencia cortados transversal y oblicuamente. Las glándulas pilóricas desembocan en el fondo de las criptas gástricas. Están constituidas por una sola clase de células, semejante a las células cervicales mucosas de las glándulas fúndicas. Muscularis mucosae.- Delgada capa de fibras musculares lisas. Submucosa.- Tejido conjuntivo laxo.- Plexo de Meissner. Muscular.- La musculatura se engruesa a expensas de las capas interna y media con el objeto de formar el esfínter pilórico. Plexo de Auerbach. Serosa Observación en la zona inicial del intestino delgado

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- 66 Mucosa intestinal en la región inicial del duodeno.- Está formada por: Epitelio monoestratificado cilíndrico constituido por células con "chapa estriada" y células caliciformes. El epitelio se invagina y forma las criptas o glándulas de Lieberkuhn. Corion con infiltración linfocitaria. Vellosidades intestinales de baja altura (Véase lo anotado en el preparado siguiente). Muscularis mucosae.- Delgada capa de fibras musculares lisas. Submucosa.- tejido conjuntivo laxo donde se encuentran las glándulas duodenales o glándulas de Brunner. Estas glándulas son alveolares y están constituidas por células mucosas.

Muscular.- CILE. El Plexo de Auerbach está situado entre las capas circular interna y longitudinal externa. Serosa DUODENO Corte transversal de duodeno.- Preparado 56. Coloración: H-E Mucosa.- Está constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico formado por células con "chapa estriada" (mayoría) y las células caliciformes (minoría). Atravesando el epitelio se puede observar linfocitos. Corion con infiltración linfocitaria. Las vellosidades intestinales son prolongaciones digitiformes de la mucosa. Se encuentran cubriendo toda la superficie interna del intestino. En el corion de la vellosidad se observa delgadas fibras musculares lisas que siguen la orientación del eje de la vellosidad, constituyen el músculo motor de la vellosidad de Bruke además se observan capilares sanguíneos y un vaso linfático: quílifero central (difícil de distinguir). Muscularis mucosae.- Delgada capa de fibras musculares lisas. Submucosa.- Está constituida por tejido conjuntivo laxo donde se encuentran las glándulas de Bruner, vasos sanguíneos y plexo de Meissner. Las glándulas de Brunner son glándulas túbulo-alveolares ramificadas estando formadas por una sola clase de células, tipo mucosa análoga a las células de las glándulas pilóricas. Desembocan en el fondo de las criptas intestinales después de atravesar la muscularis mucosae y el corion. A menudo se extienden a través de

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- 67 Muscular.- CILE. Plexo mientérico de Auerbach. Serosa YEYUNO-ÍLEON Corte transversal de íleon.- Preparado N° 56. Coloración: H-E La descripción de este preparado es análoga a la del duodeno con una sola diferencia: NO EXISTEN GLÁNDULAS. Intestino Grueso Corte transversal de colon.- Preparado N° 57. Coloración H-E Mucosa constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico formado por células caliciformes (mayoría) y células con "chapa estriada" (minoría). Las glándulas de Lieberkuhn son muy numerosas y están situadas muy próximas entre sí. Corion o lámina propia. Infiltración linfocitaria. Muscularis mucosae constituido por una delgada capa de fibras musculares lisas. Submucosa: formada por tejido conjuntivo laxo. Vasos sanguíneos, Plexo de Meissner. Muscular.- CILE. El Plexo de Auerbach está situado entre las capas circular interna y longitudinal externa. Serosa APÉNDICE VERMICULAR Corte transversal de apéndice vermicular humana. Preparado N° 58. Coloración: H-E Mucosa constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico formado por células caliciformes (mayoría) células con "chapa estriada" (minoría). Las glándulas de Lieberkuhn son escasas y poco desarrolladas. Corion infiltrado intensamente por linfocitos, observándose numerosos folículos linfoideos secundarios muy próximos unos de otros. Muscularis mucosae.- Fibras musculares lisas.

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- 68 Submucosa.- La parte de tejido conjuntivo de la submucosa, subyacente a la muscularis mucosae aparece infiltrada por linfocitos. Muscular.- CILE. Plexo mientérico de Aurbach. Serosa Nota.- En la luz del órgano puede observarse restos de sustancias alimenticias. Estudio de preparados especiales de tubo digestivo CÉLULAS DE PANETH Corte de intestino delgado Coloración: H-E En el fondo de las glándulas de Lieberkuhn se observan las células de Paneth. Estas células presentan en su citoplasma gránulos acidófilos. CÉLULAS ARGENTAFINES Corte de intestino delgado Impregnación por la plata En el fondo de las glándulas de Lieberkuhn se observan algunas células en cuyo citoplasma se distinguen gránulos de color negro.

Las células argentafines de tracto gastro intestinal (células de Kultschitsky) secretan 5 hidroxitriptamina o serotonina. REGIÓN FÚNDICA DEL ESTÓMAGO Coloración: PAS Observe el epitelio de la mucosa del fúndica. Observe las células de las glándulas fúndicas. Las células del revestimiento epitelial y las cervicales mucosas son PAS positivas.

Intestino delgado Coloración: PAS Observe el epitelio de la mucosa del intestino delgado. Observe las glándulas de Lieberkuhn. Las células calciformes son PAS positivo.

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PRÁCTICA 11 GLÁNDULAS ANEXAS PÁNCREAS Corte de páncreas.- Preparado N° 67.

Coloración: H-E

El páncreas es una glándula constituida por una porción exocrina (páncreas exocrino) y una porción endocrina (páncreas endocrino). Páncreas exocrino.Adenómeros serosos. En las células de estos adenómeros se distinguen dos zonas: Zona basal, intensamente basófila (ergatoplasma bien desarrollado). Zona apical acidófila (gránulos de cimógeno). En la luz de los adenómeros se observan las células centroacinosas. Conductos intercalares.- Pequeños conductos con epitelio monoestratificado cúbico aplanado. Conductos estriados.- No se distinguen. Conductos excretores interlobulillares.- Situados en el tejido conjuntivo interlobulillar. El epitelio es monoestratificado cúbico cilíndrico y está rodeado de una envoltura recia de tejido conjuntivo denso. Páncreas endocrino.- Está representado por los islotes de Langerhans. Los islotes de Langerhans son conglomerados de células de forma esférica u ovoidea diseminadas irregularmente entre los adenómeros de la porción exocrina. Las células son pequeñas y aparecen poco coloreadas agrupándose en forma de cordones. Hay numerosos capilares sanguíneos (sinusoides). En los preparados coloreados con H-E no se puede distinguir los diferentes tipos de células. HÍGADO DE CERDO Preparado Nº62 Coloración: H-E Lobulillo hepático.- Se encuentran bien delimitados por el gran desarrollo del tejido perilobulillar que es dependencia del tejido conjuntivo de la cápsula de Glisson. Los hepatocitos son de forma poliédrica, se disponen en láminas formadas por una sola capa. En los cortes aparecen como cordones ordenados radialmente al-

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- 71 rededor de la vena del lobulillo (vena centrolubulillar). Entre los cordones de hepatocitos se hallan situados los capilares sinusoides hepáticos que también están dispuestos radialmente y se les ve convergiendo desde la periferia hacia la vena centrolobulillar. Capilares biliares.- o canalículos biliares intralobulillares (véase el preparado con fosfatasa alcalina). Espacios porta o de Kiernan: Tejido conjuntivo (dependencia de la cápsula de Glisson) Arteriola, rama de la arteria hepática. Vena, rama de la vena porta. Conductillos biliares (uno o dos) Capilares linfáticos Recuerde que: La arteria es pequeña y rica en fibras musculares lisas. La vena es muy grande (con relación a la arteria) y pobre en fibras musculares. El conductillo biliar posee un epitelio monoestratificado cúbico o cilíndrico, según sea el calibre. El capilar linfático, frecuentemente se ve coloreado; su endotelio son células sumamente aplanadas. VESÍCULA BILIAR.Corte de vesícula biliar. Coloración: H-E Mucosa.- Constituida por epitelio monoestratificado cilíndrico y lámina propia. Las células cilíndricas se presentan débilmente teñidas, tienen un borde estriado que no siempre se distingue bajo el microscopio de luz. En la lámina propia se distinguen algunas fibras musculares vías provenientes de la capa muscular. No hay glándulas ni muscularis mucosae. Fibromuscular.- Constituida por una delgada capa de fibras musculares lisas organizadas irregularmente entre las cuales hay tejido conjuntivo laxo intersticial, tejido que condensa por fuera de la muscular formando una gruesa capa denominada perimuscular. Serosa o adventicia

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PRÁCTICA 12 APARATO RESPIRATORIO FOSAS NASALES Corte frontal de cabeza de feto (corte de mascarilla). Preparado N° 50. Coloración H-E. Las fosas nasales comprenden tres regiones: vestibular, respiratoria y olfatoria. El vestíbulo (no se ve) esta tapizado por epitelio poliestratificado plano cornificado. Posee vibrisas (pelos), glándulas sebáceas y sudoríparas. La mucosa de la región respiratoria se le conoce con los nombres de membrana pituitaria o membrana de Schneider, está constituida por: a) Epitelio pseudoestratificado cilíndrico con células caliciformes y, b) Corion o lámina propia con gran cantidad de vasos sanguíneos y glándulas mixtas. La mucosa olfatoria está situada en la parte superior de las fosas nasales. En la mayor parte de los preparados está destruida. Su estructura se estudiará en el preparado siguiente. Esqueleto de las fosas nasales (tabique nasal y cornete). MUCOSA OLFATORIA Corte de fosas nasales de perro Coloración: H-E La mucosa olfatoria se compone de: Epitelio está constituido por tres tipos de células; células basales, de sostén y olfativas. Las células de sostén son las más numerosas, de forma cilíndrica, presentan núcleos ovales situándose todos en un mismo plano. Las regiones apicales de estas células al unirse con las vecinas forman en conjunto la membrana limitante olfatoria. Las células olfativas están ubicadas entre las células de sostén. Los núcleos son redondeados; se encuentran situados a diferentes alturas y más profundamente que los de las células de sostén. Las células basales están situadas cerca de la membrana basal; sus núcleos son redondeados.

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- 73 Corion o lámina propia conteniendo glándulas de Bowman y filetes nerviosos correspondientes al I par craneal, el nervio olfatorio. Las glándulas de Bowman son tubulares ramificadas simples con células secretoras, tipo seroso; el conducto excretor se abre en la superficie epitelial. LARINGE Corte longitudinal de laringe al nivel de cuerdas vocales.- Preparado N° 70. Coloración: H-E Mucosa laríngea constituida por: Epitelio poliestratificado cilíndrico ciliado, pseudoestratificado o poliestratificado plano, según la zona. Corion rico en fibras elásticas. Se observan glándulas mixtas. Infiltración leucocitaria. En las regiones de unión de los epitelios pseudoestratificado o poliestratificado plano se puede observar glándulas mixtas. Infiltración leucocitaria. Cartílago hialino rodeado por el periocondrio. Fibras musculares estriadas pertenecientes a los músculos de laringe. En el preparado se observa como los músculos internos del tiro-aritenoideo hacen una elevación en la zona de la mucosa tapizada por epitelio poliestratificado plano, en la cuerda vocal inferior. Cuerdas vocales.- Son dos: la cuerda vocal superior o inferior o verdadera.

falsa y la cuerda vocal

La cuerda vocal superior está formada por un pliegue de la mucosa laríngea el epitelio es pesudoestratificado cilíndrico ciliado. La cuerda vocal inferior está formada por una elevación de la mucosa laringea originada por haces de fibras musculares estriadas del fascículo interno del músculo tiro-arantoideo. El epitelio de la mucosa de la cuerda vocal inferior es poliestratificado plano y el cordón no posee glándulas. El espacio limitado por ambas cuerdas vocales constituye el ventrículo de la laringe o de Morgani.

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- 74 EPLIGLOTIS Corte sagital de epiglotis.- Preparado N° 69. Coloración: H-E Mucosa de la superficie lingual.- Está compuesta por: Epitelio poliestratificado plano no cornificado y Corion o lámina propia. Nótese que el corion es papilífero y presenta infiltración linfocitaria. Cartílago elástico.- En este preparado se puede distinguir las fibras elásticas coloreadas por la eosina. Mucosa de la superficie respiratoria.- Está formada por: Epitelio poliestratificado plano y poliestratificado cilíndrico. Corion o lámina propia. Nótese que el corion no presenta papilas. TRÁQUEA Corte transversal de tráquea.- Preparado N° 71. Coloración: H-E Túnica interna o mucosa constituida por: Epitelio pesudoestratificado cilíndrico ciliado con células caliciformes. Corion o Lámina propia conteniendo fibras elásticas. La mucosa de la tráquea en la zona posterior (donde falta cartílago) presenta pliegues. La parte profunda de la mucosa se considera como submucosa, en la cual se encuentran glándulas mixtas.

Túnica media compuesta por tejido conjuntivo rico en fibras elásticas. Anillos cartilaginosos de la variedad hialina, en forma de " C " cuyos extremos libres están unidos por medio de fibras musculares lisas orientadas principalmente en sentido transversal (músculo transverso de la tráquea). Túnica externa o adventicia formada por tejido conjuntivo conteniendo vasos y nervios. Nota.- La estructura histológica de los bronquios extrapulmonares es idéntica a la de la tráquea.

PULMÓN Corte de pulmón.Coloración: H-E

Preparado N° 72.

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- 75 Sistema bronquial intrapulmonar Bronquios primarios de primer orden o de distribución (diámetro superior a 5 mm). No se ven en el preparado están formados por: Mucosa con pliegues, formada por epitelio pesudoestratificado cilíndrico ciliado con células caliciformes y corion. Fibroeslástica constituida por tejido conjuntivo rico en fibras colagénas y elásticas. En esta capa se observa: a) cartílago hialino dispuesto en placas; b) fibras lisas en orientación circular; c) glándulas mixtas. Adventicia: capa de tejido que envuelve el bronquio. Bronquios secundarios de segundo orden o interlobulillares (diámetro de 1.5 a 5 mm). Se estructura en la siguiente; Mucosa, constituida por epitelio pesudoestratificado cilíndrico ciliado con células caliciformes y corion. El epitelio es más bajo que el del bronquio primario. Fibroelástica, en la cual se observa a) cartílago hialino dispuesto en pequeñas placas; b) músculo liso desarrollado; c) glándulas escasas o faltas. Adventicia: tejido conjuntivo que envuelve al bronquio. Bronquiolo intralobulillar o bronquiolo propiamente dicho (diámetro: menor de 1.56 mm). Carece de cartílago y glándulas. Su estructura histológica es la siguiente: Mucosa, constituida por epitelio monoestratificado cilíndrico ciliado con escasas caliciformes, y corion. La mucosa presenta numerosos pliegues lo cual hace que la luz se vea festoneada. Fibroelástica. El músculo ha alcanzado gran desarrollo llegando a formar un anillo continúo, es el músculo bronquial o de Reisseisen. Bronquiolo terminal. (Diámetro: 5 mm). Está formado por dos capas: Mucosa, constituida por epitelio monoestratificado cilíndrico ciliado o cúbico sin células caliciformes y corion. Presenta luz regular o irregular pero no festoneada. Fibroelástica, compuesta por tejido conjuntivo y músculo de Reisseinsen.

Bronquiolo respiratorio. Se caracteriza por presentar su pared parcialmente alveolozada. El epitelio de revestimiento (en las zonas desprovistas de alvéolos) es monoestratificado cúbico o plano; hay escasas fibras musculares lisas.

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- 76 Conductos alveolares. Están constituidos por tres o cuatro alvéolos reunidos en forma de sáculo y que desembocan en la luz del conducto o corredor central como "las celdas en el corredor de una cárcel". Sacos alveolares. Están constituidos por tres o cuatro alvéolos reunidos en forma de sáculo y que desembocan en la luz de un tubo corto. Alvéolos. Aparecen como espacios poligonales que se agrupan en formas diversas, dando en conjunto un aspecto de encaje. Están delimitadas por delgadísimos tabiques que constituyen la pared alveolar o septos interalveolares. Pleura visceral Constituida por tejido conjuntivo laxo, tipo membranoso, rico en fibras elásticas recubierto por una hoja de células mesoteliales (en algunos preparados la sección no le ha interesado). Irrigación En la adventicia de los bronquios y de los bronquiolos se observa el corte de una arteria, rama de la arteria pulmonar. PULMÓN.- FIBRAS ELÁSTICAS Corte de pulmón de adulto Coloración: fucsina-resorcina En la pared alveolar se ven abundantes fibras elásticas. Aparecen teñidas de color azul oscuro. En el tejido conjuntivo subpleural se observan numerosas fibras elásticas. En el corion y en la fibroelástica de los bronquios y bronquiolos se observan fibras elásticas. PULMÓN.- FIBRAS DE RETICULINA Corte de pulmón de adulto.- Preparado N° 73. Coloración: Impregnación argéntica. En la pared alveolar se aprecia gran cantidad de fibras de reticulina dispuestas en una intrincada red.

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- 77 Pulmón inyectado A un conejo se le inyectó tinta china a través de la arteria pulmonar. Los cortes fueron coloreados con H-E. En la pared de los alvéolos pulmonares se encuentran una apretada red decapilares sanguíneos. Es a nivel de estos capilares que se realiza el fenómeno de la hematosis.

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PRÁCTICA 13 APARATO URINARIO RIÑÓN Corte de riñón humano.- Preparado N° 74. Coloración: H-E Zona cortical.- En esta zona se distingue: la pars convuluta y la pars radiata. La pars convoluta aparece bien teñida, en ella podemos a la vez distinguir una angosta zona superficial situada inmediatamente debajo de la cápsula en donde se encuentran únicamente tubos contorneados, es la zona llamada cortex corticis y una zona situada más profundamente, el laberinto, donde se encuentran los corpúsculos de Malpighi, tubos contorneados y segmentos de las ramas ascendientes del asa de Henle. En el pars convuluta se nota la ausencia de tejido conjuntivo intersticial. El estroma de esta región (cortex cortéis y laberinto renal) está formado por fibras de reticulina. La pars radiata aparece menos teñida que la pars convuluta, está constituida por los rayos medulares o pirámides de Ferrein que son prolongaciones que la medular envía hacia la cápsula sin llegar a alcanzarla (se detiene en la cortex corticia). En la pars radiata se encuentran segmentos de las ramas ascendentes y descendentes del asa de Henle, segmentos rectos del tubo contorneado proximal y porciones iniciales de los tubos colectores. A continuación se anotará los diferentes elementos que constituyen el nefrón y nefrona: Corpúsculo de Malpighi.- Son formaciones esféricas situadas en el laberinto, estando constituidos por: El glomérulo, formado por un conjunto de capilares arteriales dispuestos en forma de ovillo. Se ven los núcleos de las células endoteliales. La cápsula de Bowman, formada por dos hojas: una visceral adherida al ovillo vascular y otra parietal que es reflejo de la visceral; ambas hojas poseen epitelio monoestratificado plano6 y delimitan un espacio que en los preparados es amplio pero que "in vivo" es virtual. En algunos sectores se observa como el epitelio de la hoja parietal de la cápsula de Bowman se continúa con el epitelio del tubo urinario. Tubos contorneados (tubos flexuosos). - Se encuentran en la cortex corticis y en el laberinto renal. Los tubos contorneados son dos: proximal y distal.

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Las células epiteliales planas de la hoja parietal de la cápsula de Bowman corresponden a los podocitos (M/E).

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- 79 El tubo contorneado proximal (TCP) está formado por células piramidales truncadas anchas que en la región apical presentan una diferenciación citoplasmática conocida con el nombre de "ribete en cepillo" (no se observa en estos preparados a consecuencia de la inadecuada fijación de estas células). Su citoplasma es intensamente acidófilo y los núcleos son redondeados. Al corte transversal, el TCP presenta una luz amplia irregular o desflecada (esto se debe a la destrucción postmortem de la zona apical). El número de núcleos es de 3 a 4 (dato muy importante porque en la práctica sirve para hacer el diagnóstico diferencial con un tubo contorneado distal, cortado transversalmente). El tubo contorneado distal (TCD) posee células menos anchas que las del tubo contorneado proximal. No posee "ribete en cepillo". Su citoplasma es acidófilo y los núcleos son redondeados. Al corte transversal presenta una luz amplia con bordes regulares (la zona apical de estas células no se desintegran con tanta facilidad como la de los tubos contorneados proximales) el número de núcleos es de 5 a 8 (recuerde que las células son menos anchas que las del tubo contorneado proximal y, que por consiguiente, los núcleos están situados más próximos entre sí). Asa descendente o delgada de Henle.- Se encuentran en los rayos medulares y en la zona medular. Posee epitelio monoestratificado plano. Asa ascendente o gruesa de Henle.- Se le encuentra en la zona medular, en los rayos medulares y en el laberinto renal. Posee un epitelio monoestratificado cúbico, el citoplasma de las células aparece teñido (ligeramente menos teñido que el tubo contorneado distal). Tubos colectores.- Transcurren por la parte axil de los rayos medulares. Están constituidos por células cúbicas o cilíndricas de citoplasma claro. Zona medular.- Está formada por las pirámides renales o de Malpighi. Las pirámides de Malpighi son superficies triangulares delimitadas a ambos lados por las columnas renales o de Bertin. La base de cada pirámide está en contacto con la cortical y el vértice termina en hilio donde forma la papila renal. La pirámide Malpighi se encuentra constituida por un gran número de tubos colectores y los segmentos delgados y gruesos de las asas de Henle. Los tubos colectores de la medular (tubos de Bellini, conductos papilares) son de gran diámetro, las células son cúbicas o cilíndricas de citoplasma claro y núcleo redondeado. Estas células presentan en su borde libre una condensación citoplasmática típica. Entre los cortes de tubos de la medular hay regular cantidad de tejido conjuntivo conteniendo capilares sanguíneos.

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- 80 Revistiendo a la papila renal se encuentra epitelio polimorfo. Vascularización.- Se observan cortes de arterias y venas. Cápsula.- Rodeando la superficie del órgano se encuentra tejido conjuntivo conteniendo vasos sanguíneos. RIÑÓN. COLORACIÓN PAS Zona cortical Observe la membrana basal de los capilares y de la cápsula de Bowman de los corpúsculos de Malpighi. Observe la membrana basal de los tubos contorneados. En los T.C.P. se observa el "ribete de cepillo", intensamente teñido. Observe el aparato yuxtaglomerular formado por las células YG y la mácula densa. Las células yuxtaglomerulares se localizan en la pared de la arteria aferente inmediatamente antes de su ingreso al glomérulo. En su citoplasma se observan gránulos PAS positivos. La mácula densa representa un engrosamiento de la pared de T.C.P. o segmento grueso del asa gruesa de Henle, a nivel de la raíz del glómerulo, cercano de las células de YG. Zona medular Observe la membrana basal de los tubos colectores y los segmentos delgados y grueso del asa de Henle. Regular cantidad de tejido conjuntivo, vasos sanguíneos. RIÑÓN INYECTADO A una rata recién sacrificada se le inyectó tinta china por la arteria renal. Observe los capilares del glomérulo y la capilarización de la arteria eferente alrededor de los tubos contorneados. Observe las arterias rectas en la zona medular.

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- 81 URÉTER Corte transversal de uréter.- Preparado N° 76 Coloración: H-E Mucosa: constituida por: Epitelio de transición. Las células superficiales en su borde libre presentan una condensación citoplasmática. La condensación citoplasmática es un medio de defensa celular, hace impermeable a las células, impidiendo que las sustancias extrañas contenidas en la orina sean absorbidas por las células. Corion o lámina propia, compuesta por tejido conjuntivo laxo. Muscular.- Está formado por fibras musculares lisas dispuestas en dos capas: longitudinal interna y circular externa (LICE). Las fibras musculares de la capa interna llevan una dirección longitudinal (aparecen cortadas transversalmente); las fibras de la capa externa están formadas por fibras circulares (aparecen cortadas longitudinalmente). En el tercio inferior del uréter (porción terminal que la abre) se agrega una tercera capa de fibras musculares lisas, de orientación circular. Adventicia.- Compuesta por tejido laxo por el que transcurren vasos y nervios. VEJIGA Corte de vejiga urinaria a nivel del fondo.- Preparado N° 77 Coloración: H-E Mucosa, constituida por: Epitelio polimorfo.- Las células superficiales de forma poligonal presentan en su borde libre una condensación citoplasmática. Corion compuesto por tejido conjuntivo laxo. Muscular.- Está compuesto por fibras musculares lisas dispuestas en tres capas; longitudinalmente interna, circular media y longitudinal externa. Las fibras de estas tres capas forman en conjunto, una masa muscular plexiforme, razón por la cual dichas capas son de delimitación imprecisa. Serosa.- Capa de células monoteliales planas y un estroma conjuntivo. La parte del fondo (superior) de la vejiga está cubierta por peritoneo (serosa) el resto del órgano presenta adventicia.

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PRÁCTICA 14 GLÁNDULAS ENDOCRINAS HIPÓFISIS Corte de hipófisis humana.- Preparado N° 97 Coloración: H-E Con el lente de menor aumento distinga: La adenohipófisis (pars distalis, para tuberalis y para intermedia). La neurohipófisis (pars nerviosa, tallo, infundibulum y eminencia media). La glándula está envuelta por una membrana conjuntiva (cápsula) que rodea a la glándula; es una expansión de la piamadre. En la adenohipófisis se reconocen dos tipos de células: cromófilas y cromófobas, según tengan o no afinidad por los colorantes. Dentro de las primeras se distinguen a su vez: células acidófilas (células alfa) y células basófilas (células beta). La pars intermedia, está constituida por cordones de células que presentan una débil basofilia, delimitan folículos que están ocupados por una sustancia coloide. Es estroma de la adenohipófisis está constituida por fibras de reticulina, que envuelven numerosos capilares sanguíneos tipo sinusoide. La neurohipófisis, consta de células llamadas pituicitos (glía) y fibras nerviosas y capilares. Nota.- Utilizando coloraciones especiales se pueden distinguir dos tipos de células acidófilas y tres tipos de células basófilas. A cada tipo de células de la hipófisis corresponde la secreción de una determinada hormona. GLÁNDULA SUPRARRENAL Corte de suprarrenal humano.- Preparado N° 98 Coloración: H-E Con el lente de menor aumento distinga la corteza y la médula suprarrenal. Tejido conjuntivo (cápsula) que rodea el órgano y envía al interior finos tabiques, por el cual transcurren vasos sanguíneos. Corteza suprarrenal. Se distinguen tres zonas: glomerular, fascicular y reticular. La zona glomerular es la zona angosta, está formada por cordones de células cilíndricas que le dan el aspecto glomerular. Secretan hormonas denominadas mineral corticoides. La zona fascicular es las más amplia, está formada por cordones de recto células poliédricas que, en el citoplasma presentan vacuolas, dándole el aspecto de esponja (espongiocitos). Secretan hormonas denominadas glucocorticoides.

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- 83 La zona reticular consta de cordones celulares ramificados y anastomóticas. Secretan progesterona, estrógenos y testosterona. Médula suprarrenal.- Está constituida por cordones de células anastomóticas. Entre estos cordones se observan capilares y vénulas de regular tamaño. Las células en su mayoría corresponden a los feocromocitos llamados así por presentar la reacción cromafín esto es, que se tiñen de color pardo por los fijadores que contienen ácido crónico. Ocasionalmente se encuentran neuronas de tipo ganglionar. Los feocromocitos elaboran las catecolaminas (adrenalina y noradrenalina). TIROIDES Corte de glándula tiroides.- Preparado N° 96 Coloración: H-E Cápsula. Tejido conjuntivo fibroso que rodea al órgano y en lo que finos tabiques que dividen a la glándula en lobulillos. Observe la rica red de capilares. Folículos tiroideos.- Formaciones redondeadas de diámetro variable delimitados por epitelio monoestratificado cúbico. La altura de estas células puede variar con la actividad glandular. Los folículos están ocupados por una sustancia acidófila, el coloide donde se encuentra almacenada la hormona tiroxina. Al lado de las células foliculares se encuentran las células "C " o parafoliculares que secretan la hormona calcitonina. (Vea en una microfotografía la posición de estas células). Note la rica vascularización de la glándula tiroides.

PARATIROIDES Corte de glándula paratiroides.- Preparado N° 98 Coloración: H-E Cápsula.- Fina capa de tejido conjuntivo que rodea a la glándula y envía delgados tabiques al interior del órgano. El parénquima está formado de gruesos cordones de células epiteliales (células principales) que están íntimamente asociados con los capilares. Antes de la pubertad, aparece entre las células principales otro tipo de células, las células oxifilas, las que se distinguen por su intensa acidófilia. La hormona secretada por la paratiroides se llama paratohormona.

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PRÁCTICA 15 APARATO GENITAL MASCULINO TESTÍCULO ADULTO Corte del testículo humano.- Preparado N° 76 Coloración: H-E Albugínea o cápsula fibrosa que rodea al testículo. Inmediatamente por debajo de la cápsula se halla una delgada copa de tejido conjuntivo laxo rica en vasos sanguíneos, es la túnica vasculosa. En el borde superior y posterior del testículo, la albugínea aumenta de grosor y forma el mediastino del testículo o cuerpo de Highmore del cual irradian al interior del órgano delgados tabiques de tejido conjuntivo, los tabiques testiculares. Tubos seminíferos.- Aparecen cortados transversalmente y oblicuamente. La pared de estos tubos está constituida por un epitelio de estructura compleja, el epitelio germinativo revestido por fuera por una membrana basal delgada y anhista. El epitelio del tubo seminífero está constituido por varias capas de células superpuestas entre las cuales se distinguen: Las células seminales (espermatogonias, espermatocito de I orden, espermatocito de II orden y espermátides). Las células de Sertoli. Se distinguen por un núcleo grande, vesticuloso (aparecen claro) y un nucleolo grande. De una manera general podemos decir que, las espermatogenias se encuentran situadas profundamente, cerca de la membrana basal, las espermatocitos ocupan la zona intermedia y, las espermátides el estrato superficial, las espermatogonias poseen núcleos redondeados con cromatina dispuesta en finos gránulos o en pequeñas placas. Las células de Sertoli (elementos de sostén y nutrición) son células de gran tamaño de forma piramidal con su base apoyada en la basal. Ellas llegan a alcanzar la superficie. En los preparados se les distingue por su núcleo pobre de cromatina (se ve claro), de forma ovoide con un nucleolo ostensible. Aplicados a la superficie del epitelio germinal y ocupando la luz de algunos tubos somníferos, se observan manojos de espermatozoides con sus colas dirigidas hacia el centro del conducto. Red de Haller o rete testis.- Los conductillos constituyen la rete testis aparecen como esculpidos en el cuerpo de Higmore, están tapizados por epitelio monoestratificado plano ó cúbico.

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- 85 Tejido conjuntivo intersticial.- Separando los conductos seminíferos se halla tejido conjuntivo intersticial (estroma) conteniendo vasos sanguíneos. Células intersticiales o de Leydig.- Se encuentran en el tejido conjuntivo intersticial, aisladas o formando pequeños grupos compactos cerca de los capilares sanguíneos. Son de forma ovoidea o pliédrica con citoplasma bien teñido y núcleo redondeado. Las células intersticiales representan la glándula testicular endocrina que elabora la hormona testosterona. EPIDÍDIMO Coloración: H-E El conducto epididimario es uno solo, al corte de la impresión de ser muchos pero esto se debe a las flexuosidades que describe en su trayecto. Albugínea o cápsula fibrosa que rodea al órgano. Cortes transversales y oblicuos del conducto epididimario. En cada uno de ellos se observa: Una membrana basal, bien nítida. Epitelio pseudoestratificado cilíndrico con estereocilios (no tienen movimiento). Entre las secciones de los tubos encontrados hay tejido conjuntivo laxo conteniendo, vasos sanguíneos y fibras musculares lisas circulares (escasas). CONDUCTO DEFERENTE Corte transversal de conducto deferente.- Preparado N° 80 Coloración: H-E Mucosa, constituida por: Epitelio pseudoestratificado cilíndrico ciliado, es más bajo que el del epidídimo.- En algunas zonas el epitelio es monoestratificado cilíndrico, sin cilios. Corion formado por tejido conjuntivo muy celular, con abundantes fibras elásticas. Nótese que la mucosa presenta algunos pliegues. Esto se debe a la gran cantidad de fibras elásticas en el corion y a la gruesa capa muscular. Muscular.- Es la capa más gruesa, las fibras musculares lisas se disponen en tres capas: longitudinal, circular media y longitudinal externa. Adventicia.- Tejido conjuntivo laxo por el que transcurre vasos y nervios. VESÍCULA SEMINAL Corte de vesícula seminal.- Preparado N° 81 Coloración: H-E

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- 86 Mucosa, constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico. El epitelio de la vesícula seminal presenta grandes variaciones individuales que dependen de la edad y del estado funcional. Corion muy celular, con fibras elásticas. La mucosa presenta numerosos pliegues que se ramifican y anastomosan entre sí delimitando fosetas o criptas. Esto da lugar a que la luz del órgano sea irregular, anfractuosa. Muscular, es más delgada que en el conducto deferente, las fibras musculares lisas se dirigen en todas direcciones y forman en conjunto una masa muscular plexiforme. Adventicia.- Tejido conjuntivo laxo que contiene vasos sanguíneos. PRÓSTATA Corte transversal de próstata de joven.- Preparado N° 82 Coloración: H-E La próstata es un conglomerado de varias glándulas túbulo-alveolares ramificadas. Alvéolos secretores.- Alvéolos glandulares, aparecen como grandes cavidades revestidas por epitelio monoestratificado cúbico o cilíndrico, pueden haber células basales. El citoplasma de las células secretoras se tiñe debidamente. La luz de los alvéolos glandulares aparece muy irregular en los cortes, esto es debido a que el epitelio y el tejido conjuntivo subyacente forman pliegues que sobresalen en la cavidad glandular. En la luz de algunos alvéolos glandulares se observa una sustancia de color rosado, es el producto de secreción de las células que revisten los alvéolos glandulares. La secreción de la próstata es líquida, turbia, opalina, débilmente alcalina y a ella se debe, en gran parte, el olor característico del semen. Conductos excretores.- Presentan una luz más estrecha, están tapizados por epitelio monoestratificado cilíndrico. El citoplasma de las células se tiñe más intensamente que el de los alvéolos glandulares.

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- 87 Estroma.- Está constituido por tejido conjuntivo denso rico en fibras elásticas y con regular cantidad de fibras musculares lisas. Por fuera, el tejido conjuntivo forma la cápsula. PRÓSTATA Corte de próstata de viejo. Preparo N° 83 Coloración H-E La descripción es similar a la que acabamos de hacer para el preparado anterior. Únicamente se anotará lo siguiente: En la luz de algunos alvéolos glandulares se hallan unas concreciones prostáticas o piedras de la próstata. Las concreciones prostáticas resultan de la condensación y calcificación de la secreción prostática; aparecen predominantemente en los ancianos. La uretra prostática no ha sido interesada en el corte. PENE Corte transversal de pene de un niño del cuerpo del órgano. Preparado N° 34. Coloración: H-E Piel.- Comprende: epidermis y dermis. La hipodermis sobre la que descansa la piel es muy laxa. En algunos preparados la piel se ha desprendido de los planos profundos. Se observan los vasos dorsales peneanos y cortes transversales de los nervios. Cuerpos cavernosos.- Son pares y están situados dorsalmente. Están constituidos por tejido eréctil formado por amplias lagunas venosas, separados por trabéculas conectivas y fibras musculares lisas. En el centro de cada cuerpo cavernoso se ven las arterias profundas o centrales de los cuerpos cavernosos. En el estado de flácidos, las lagunas venosas (venas cavernosas) permanecen cerradas debido al tono del músculo existente en las trabéculas, apareciendo como simples hendiduras. Durante la erección, las fibras musculares se relajan y las lagunas son inundadas con sangre arterial. Las arterias profundas (ramas de las arterias peneanas) corren longitudinalmente una en cada cuerpo cavernoso y terminan en unas arterias minúsculas, las arterias helicinas, que se abren directamente en las lagunas venosas. Cuerpo esponjoso.- Es impar y se halla situado debajo de los dos grupos cavernosos, circunda a la uretra cavernosa. Su estructura es análoga a la de los cuerpos cavernosos. La uretra cavernosa está rodeada por el cuerpo esponjoso. La mucosa presenta

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- 88 invaginaciones irregulares, son las lagunas de Morgani en el fondo de las cuales desembocan las glándulas ureterales o de Littré. Las glándulas de Littré son glándulas túbulo-acinosas, sus células son cilíndricas con citoplasma claro. La mucosa de la uretra cavernosa está constituida por epitelio poliestratificado y corion conteniendo las glándulas de Littré.

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PRÁCTICA 16 APARATO GENITAL FEMENINO OVARIO Corte de ovario humano.- Preparado N° 85 Coloración: H-E ZONA CORTICAL o zona parenquimal, es la capa periférica, amplia en las que se observan las siguientes estructuras: Epitelio germinativo. Se observan células cúbicas que rodea la superficie ovárica y se continúa con el peritoneo que tapiza el mesovario. Albugínea. Tejido conjuntivo sobre el que se apoya el epitelio germinativo. Folículos ováricos. Se les ve en diversos estadíos de evolución: Folículos primarios.- Llamados también folículos primordiales. Son los más numerosos, ocupan la zona superficial de la cortical y están constituidos por el óvulo (oocito) rodeado de una sola capa de células foliculares aplanadas el oocito presenta un núcleo vesiculoso y un nucleolo fácilmente visible. Folículos secundarios o en crecimiento.- Se caracterizan porque el oocito es más voluminoso, estando rodeado por una capa de células cilíndricas o varias capas de células foliculares poliédricas. Folículos maduros de De Graaf.- Son los más voluminosos presentan el aspecto de una gran vesícula. El tejido conjuntivo del estroma se diferencia alrededor del folículo de Graaf formando las tecas (interna y externa). La teca interna es rica en células y vasos sanguíneos y, la teca externa es pobre en células y rica en fibras. Por dentro de la teca está la granulosa con el cúmulo prolígero o cumulus oophorus con células foliculares, incluyendo la corona radiata que rodea al ovocito y hacen una prominencia en la cavidad folicular. Las células del cúmulo prolígero, más próximos al óvulo, se disponen a su alrededor constituyendo la corona radiata. Separando el ovocito, de las células de la corona radiata está la membrana pelucida, membrana anhista transparente constituida por mucopolisacáridos (glucosaminoglucanos). Finalmente se observa una gran cavidad delimitida por la granulosa, es la cavidad folicular. Las células de la granulosa y de la teca interna secretan principalmente estrógenos (foliculina). Folículos atrésicos.- Son los folículos (primordiales o en crecimiento) que han experimentado degeneración.

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- 90 El proceso degenerativo que experimenta la gran mayoría de los folículos primordiales o en crecimiento, se conoce con el nombre de atresia folicular. Durante la vida sexual de una mujer, solo unos pocos folículos alcanzan una madurez completa y llegan a la ovulación. Corpus albicans. Aparecen como pequeños cuerpos claros de estructura fibrilar representan restos cicatrices de cuerpo amarillo. El estroma ovárico está constituido por tejido intersticial rico en células que, en las secciones tiene el aspecto "arremolinado", característico. ZONA MEDULAR.- O zona vasculosa, es la zona central, angosta, constituida por tejido conjuntivo laxo que contiene vasos sanguíneos y nervios. MESOVARIO.- Constituido por tejido conjuntivo de la medular del ovario que contiene grandes vasos sanguíneos y tapizados por mesotelio peritoneal. OVARIO.- CUERPO AMARILLO Corte de ovario humano.- Preparado N° 86 Coloración: H-E El cuerpo amarillo (cuerpo lúteo) se origina por la luteinización de las células de la teca interna. Constituye una glándula endocrina transitoria que segrega la hormona progesterona o luteína. La estructura del cuerpo amarillo es la siguiente: Células luteínicas.- Las células luteínicas se disponen en cordones radiales anastomóticos que forman numerosos pliegues. Se distinguen: · Células teco-luteínicas.- Resultan de la transformación de las células de la teca interna; están situadas inmediatamente debajo de la cápsula. · Células granuloso-luteínicas.- Provienen de la granulosa; son células grandes con citoplasma ligeramente vacuolado. Capilares sinusoides.- Se encuentran entre los cordones celulares. Cápsula.- Envoltura conjuntiva proveniente de la teca externa. El aspecto general de cuerpo amarillo guarda cierta semejanza con las células de la corteza suprarrenal. Nota.- El estudio de las demás formaciones que se observan en este preparado, debe hacerse consultando lo anotado para el preparado anterior. El dibujo únicamente debe interesar al cuerpo amarillo.

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- 91 TROMPA UTERINA Corte transversal de trompa uterina, región medular.- Preparado N° 87. Coloración: H-E La mucosa presenta grandes pliegues que se ramifican y anastomosan entre sí. Está constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico ciliado con células mucinógenas. Lámina propia constituida por tejido conjuntivo laxo, muy celular y con numerosos vasos sanguíneos. La muscular está formada por fibras musculares lisas dispuestas en dos capas no bien delimitadas: circular interna y longitudinal externa. La serosa está constituida por una delgada capa de tejido conjuntivo conteniendo vasos sanguíneos y nervios y, tapizada por células mesoteliales del peritoneo. UTERO Endometrio en fase de crecimiento o estrogénica. Corte del útero a nivel del cuerpo del órgano. Preparado N° 88 Coloración: H-E Mucosa o endometrio, está constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico. Corion o lámina propia (estroma) muy celular, sin fibras colágenas y con numerosos vasos sanguíneos. Observe como de trecho en trecho el epitelio se invagina y hunde en el corion, formándose así las glándulas uterinas. Las glándulas uterinas son tubulares simples, de luz estrecha, tapizadas por epitelio monoestratificado cilíndrico (posee los mismos caracteres del epitelio de la mucosa). De trayecto rectilíneo en su comienzo, describen flexuosidades en la región profunda, terminando en fondos de saco que llegan cerca a la capa muscular; esto no explica porque en la región superficial aparecen cortadas longitudinalmente y, en la región profunda, oblicua y transversalmente. En esta fase de proliferación o crecimiento las glándulas uterinas son muy numerosas.

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- 92 La porción profunda de la mucosa uterina se conoce con el nombre de capa basal y la porción superficial recibe el nombre de capa funcional. En esta capa se distinguen a su vez las porciones compacta esponjosa, esto es, las porciones superficial y profunda de la zona funcional respectivamente. La zona funcional del endometrio es la que sufre las modificaciones durante el ciclo menstrual. Muscular o miometrio.- Alcanza gran desarrollo. Las fibras musculares lisas se entrecruzan en diversas direcciones. Se observan numerosas y grandes caras sanguíneas. Serosa adventicia, según la zona. ÚTERO Endometrio en fase secretora o pregestacional. Corte de útero humano a nivel del cuerpo del órgano. Preparado N° 89. Coloración: H-E Mucosa o Endometrio.- Está constituido por: Epitelio monoestratificado cilíndrico Corion, lámina propia (estroma) muy celular sin fibras colágenas y con numerosos y grandes vasos sanguíneos. Las glándulas uterinas en esta fase secretora son de trayecto tortuoso, de luz amplia y dilatada. Las paredes presentan numerosos pliegues que, al corte longitudinal, presentan el característico aspecto de borde de "serrucho" (dato para hacer el diagnóstico diferencial con el endometrio en fase de crecimiento). Las células se cargan de glucógeno y, en los últimos días de esta fase las glándulas comienzan a secretar. Muscular o miometrio (véase lo anotado para el preparado anterior). Serosa o adventicia, según la zona. CUELLO UTERINO.- ENDOCÉRVIX Y EXOCÉRVIX Corte de cuello uterino de mujer adulta. Preparado N° 90. Coloración: H-E Endocérvix.- La mucosa del endocérvix está constituida por: Epitelio monoestratificado cilíndrico. Las células son mucinógenas, con núcleo alargado situado cerca de la basal, el citoplasma aparece débilmente teñido. Corion, menos celular que el del cuerpo uterino, contiene glándulas.

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- 93 Las glándulas uterinas cervicales son tubulares simples ramificadas, están revestidas por células cilíndricas mucosas y presentan numerosas dilataciones y estrangulaciones.

Exocérvix.- La mucosa del exocérvix se compone de: Epitelio poliestratificado plano no cornificado, tipo vaginal. Corion papilífero conteniendo vasos sanguíneos. Observe como el epitelio monoestratificado cilíndrico del endocérvix cambia bruscamente a epitelio poliestratificado plano, este punto corresponde frecuentemente al orificio del cuello uterino. Muscular o miometrio.- Formada por fibras musculares lisas que llevan distintas direcciones. Adventicia VAGINA Corte longitudinal de vagina.- Preparado N° 91 Coloración: H-E Mucosa, formada por: Epitelio estratificado plano no cornificado. Corion o lámina propia, es amplio y papilífero. Contiene numerosos vasos sanguíneos. Hay infiltración linfocitaria. En la porción subyacente al epitelio, el corion es denso (tejido conjuntivo denso) mientras que en la región profunda es laxo (tejido conjuntivo laxo). Muscular, de poco espesor formada por fibras musculares lisas que se entrecruzan y aparecen cortadas longitudinalmente, oblicua o transversalmente. Adventicia, constituida por tejido conjuntivo denso que contiene vasos y nervios. PLACENTA Corte de placenta de 4 meses de gestación Coloración: H-E Decidua corial o fetal (porción fetal de la placenta). Está representada por las vellosidades coriales. Las vellosidades coriales tienen la siguiente estructura: Epitelio de revestimiento (epitelio corial) que consta de dos capas de células: una

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- 94 profunda de células cúbicas, la capa de Langhans o citotrofoblasto y, una superficial representada por una masa citoplasmática multinucleada, la capa sincitial ó sincitiotrofoblastos. En algunas zonas de la superficie de esta capa, se observan los denominados nodos sincitiales que son desprendimientos del sincitiotrofoblasto, algunos de los cuales ingresan a los espacios intervellosos ocupados por la sangre materna. Tejido conjuntivo mesenquimal (estroma de la vellosidad) rico en vasos sanguíneos. Decidua basal o materna (porción materna de la placenta).- Comprende el endometrio situado por debajo de la porción fetal de la placenta, estando constituido por las células deciduales. En la decidua basal se distinguen dos zonas: una interna, la compacta y otra externa, la esponjosa. Las células deciduales son elementos epitelioides que previenen de la transformación de las células conjuntivas del corion superficial (capa funcional) del endometrio. Membrana de la placenta.- Son dos: el amnios y el corion. El amnios está constituido por un epitelio cúbico simple y un estroma conjuntivo. El corion o lámina corial igualmente está constituido por el epitelio corial (citotrofoblasto y sincitiotrofoblasto) y un estroma de tejido mesenquimal. PLACENTA Corte de placenta de 6 meses de gestación.- Preparado N° 92 Coloración: H-E La descripción es similar a la que se acaba de hacer para el Preparado N° 92. A partir del 5° mes de gestación las células del citotrofoblasto disminuyen: en algunas vellosidades son escasas y en otras faltan. Nota.- En los últimos meses de gestación, el epitelio corial consta de una sola capa de células: la capa sincitial o sincitiotrofoblasto. CORDÓN UMBILICAL Corte transversal de cordón umbilical.- Preparado N° 93 Coloración: H-E Conductos glandulares intralobulillares.- Están tapizados por un epitelio monoestratificado cúbico. En está fase es difícil diferenciar los alvéolos secretores (adenómeros) de los conductos excretores intralobulillares, de allí que utilicemos el término conductos glandulares. Tejido conjuntivo intralobulillar.- Tejido conjuntivo laxo muy celular que se encuentra entre los conductos glandulares.

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- 95 Tejido conjuntivo interlobulillar.- Está formado por tejido conjuntivo denso, dividiendo a la glándula en lobulillos. En este tejido se encuentran vasos sanguíneos, linfáticos, conductos excretores interlobulillares y conductos galactóforos. GLÁNDULA MAMARIA, FASE DE CRECIMIENTO Corte de glándula mamaria humana a los 4 meses de gestación.Preparado N° 95. Coloración: H-E Alvéolos secretores.- Están revestidos por una sola fila de células cilíndricas bajas: la luz es amplia y en algunos se observa una sustancia (producto de secreción) teñida de color rosado. Los espacios vacíos que se observan en el citoplasma de las células las que revisten al alvéolo (células secretoras), representan gotitas de lípidos que han sido disueltas por el xilol. Observando con atención se pueden distinguir unas células aplanadas situadas entre las células secretoras y la membrana basal, son las células mioepiteliales. Las células mioepiteliales son semejantes a las células en cesta de Boll de las glándulas salivales.

Conductos excretores.- Se distinguen: conductos excretores intralobulillares, interlobulillares y galactóforos. Tejido conjuntivo intralobulillar.- Representado por tejido conjuntivo laxo, escaso. Tejido conjuntivo interlobulillar.- El tejido conjuntivo denso interlobulillar es proporcionalmente más escaso que en la glándula de la fase de reposo. Los conductos galactóforos se distinguen por su gran diámetro y por estar revestidos por epitelio estratificado. GLÁNDULA MAMARIA.- FASE SECRETORA Corte de glándula mamaria en la lactancia.- Preparado N° 94 Coloración: H-E Alvéolos secretores.- Observe el gran tamaño de los alvéolos secretores. El citoplasma de sus células presenta espacios vacíos que corresponden a los lípidos que han sido disueltos por el xilol. En algunos alvéolos se observa producto de secreción. Conductos excretores intralobulillares. Tejido conjuntivo intralobulillares. Tejido conjuntivo interlobulillar Conductos excretores interlobulillares y conductos galactóforos.

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PRÁCTICA 17 OJO Y OÍDO CORTE DEL GLOBO OCULAR Coloración: H-E El globo ocular está constituido por 3 túnicas dispuestas concéntricamente: 1.- Capa Externa: Está constituida por la esclera (5/6 en extensión) y la córnea (1/6 anterior). Comprende: La esclera o esclerótica, constituida por tejido conjuntivo denso. La córnea, constituida por: Epitelio anterior: epitelio poliestratificado plano no cornificado. Membrana de Bowman. Estroma constituido por tejido conjuntivo denso avascular. Membrana de Descemet. Epitelio posterior: epitelio monoestratificado cúbico aplanado (mal llamado endotelio). 2.- Capa Media o Vascular: En la capa media o vascular (úvea) se distinguen 3 regiones, que viéndolas de la parte posterior a la anterior, son: coroides, cuerpo ciliar e iris. Esta capa está constituida por tejido conjuntivo muy vascularizado en el que se encuentran numerosas células llenas de melanina, que confieren un color oscuro a esta capa. Coroides. En su porción más interna se encuentran abundantes capilares sanguíneos, por lo que se le llama coriocapilar. Cuerpo ciliar. Es el engrosamiento de la úvea entre el iris y la coroides. La cara orientada al cristalino y a la cámara posterior presenta pliegues irregulares, los procesos ciliares. En el cuerpo ciliar se encuentran haces de fibras musculares lisas, el músculo ciliar. El cuerpo ciliar esta revestido por la pars ciega de la retina, la cual está constituida por dos estratos celulares: uno pigmentado con células ricas en melanina (extensión del epitelio pigmentario de la retina) y otro de células cilíndricas proveniente de la parte sensitiva de la retina modificada, provista de: fotoreceptores, células bipolares y células ganglionares.

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- 97 Iris. Es la porción anterior de la úvea que cubre parcialmente el cristalino y presenta una abertura central, la pupila: La superficie posterior del iris se encuentra revestido por el epitelio que constituye la pars ciega de la retina, mientras que la superficie anterior carece de revestimiento epitelial (el M/E ha demostrado que el revestimiento lo constituyen células conjuntivas modificadas) En el estroma del iris se encuentra haces de fibras musculares que constituyen el esfínter de la pupila y el músculo dilatador de la pupila. Detrás del iris se encuentra el cristalino o lente, el cual se mantiene en posición mediante fibras (zónula ciliar) que se insertan de un lado en la cápsula del cristalino, y de otro, en el cuerpo ciliar. La cavidad del ojo situada detrás del cristalino y la cámara posterior está ocupada por una sustancia viscosa, rica en glucosaminoglucanos, el humor vítreo. 3.- Capa Interna: La capa interna del globo ocular es la retina y que resulta de una expansión anterior de la pared del diencéfalo, por consiguiente es tejido nervioso. En la retina se distingue: Pars optica o porción anterior sensitiva. Pars ciega o porción anterior no sensitiva. La ora serrata señala el límite entre la pars óptica y ciega. La pars ciega se encuentra revistiendo: los procesos ciliares y la cara posterior del iris, estando constituida por dos estratos de células: epitelio pigmentario y células cilíndricas. La pars optica la constituyen principalmente 3 tipos de células: Células fotosensibles (fotoreceptores) representados por neuronas denominadas conos y bastones. Neuronas bipolares, que hacen sinapsis son los conos y bastones y con las células ganglionares. Células ganglionares, cuyos cilindros ejes convergen en la papila óptica formando el nervio óptico.

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- 98 CORTE TRANSVERSAL DE CÓCLEA (CARACOL) DE COBAYO (Descalcificada con ácido nítrico al 5%) Coloración: H-E Luego de recorrer todo el preparado utilizando el objetivo 4x, seleccione el campo que va a dibujar a un aumento de 100x. La lámina espiral ósea es una fina repisa ósea que parte desde la columela y penetra hasta la mitad de la luz de la cóclea, dividiendo así en forma incompleta el conducto en dos secciones: una superior o rampa vestibular, y una inferior o rampa timpánica. La separación de las dos rampas se completa con la membrana basilar, estructura conjuntiva que se extiende desde el borde libre de la lámina espiral ósea hasta la pared externa de la cóclea; en este punto, el periostio se engruesa, formando el ligamento espiral. Conducto coclear o caracol. Presenta forma triangular cuya base está formada por el ligamento espiral, revestido por un epitelio estratificado en el que se encuentran vasos sanguíneos. Estas dos estructuras forman la estría vascular, que constituye la mayor parte de la pared del conducto coclear. El lado superior del triángulo, lo constituye la membrana vestibular o m. de Reisseissen; y el lado inferior, la lámina espiral ósea con la membrana basilar. Órgano de Corti. Lo constituye el epitelio engrosado situado en la parte superior de la membrana basilar. Las células que constituyen el epitelio comprenden: células ciliadas y células de sostén. La observación microscópica del órgano de Corti debe realizarse observando un dibujo esquemático de un libro. Debe tenerse presente que las células del epitelio del órgano de Corti, están en muchas zonas destruidas a consecuencia del HNO3 que se utilizó como descalcificante.

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INDICE Página HISTOLOGÍA GENERAL Capítulo I Técnica histológica ...................................... Práctica 1. Citología .................................. Capítulo II Tejido Epitelial Práctica 2. Epitelios monoestratificados ........... Práctica 3. Epitelios poliestratificados ............. Capítulo III Tejido Conjuntivo ................................... Práctica 4. Células y fibras del Tejido Conjuntivo ... Práctica 5. Tejidos Conjuntivos ....................... Práctica 6. Tejido Cartilaginoso y Óseo ............. Práctica 7. Osificación ................................ Capítulo IV Tejido Muscular ........................................ Práctica 8. Tejido muscular ........................... Capítulo V Tejido Nervioso .......................................... Práctica 9. Neurona ................................... Práctica 10. Neuroglía ................................ HISTOLOGÍA ESPECIAL ............................................ Práctica 1. Sistema Nervioso .......................... Práctica 2. Sangre ..................................... Práctica 3. Aparato Circulatorio ...................... Práctica 4. Órganos Linfoideos ........................ Práctica 5. Piel y Anexos .............................. Práctica 6. Mucosas .................................... Práctica 7. Aparato Digestivo: Boca .................. Práctica 8. Aparato Digestivo: Odontogénesis ........ Práctica 9. Glándulas Salivales ........................ Práctica 10. Aparato Digestivo: Tubo Digestivo ..... Práctica 11. Glándulas Anexas ........................ Práctica 12. Aparato Respiratorio .................... Práctica 13. Aparato Urinario ......................... Práctica 14. Glándulas Endocrinas ..................... Práctica 15. Aparato Genital Masculino ............... Práctica 16. Aparato Genital Femenino ............... Práctica 17. Ojo y Oído ...............................

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Células del tejido conjuntivo que tienen la propiedad de incorporar a su citoplasma coloides electronegativos (coloidopexía), y cuerpos extraños, bacterias o restos celulares (fagocitos).

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