Laboratorio 1
Informe de laboratorio
LABORATORIO 01 – NORMAS DE SEGURIDAD, MATERIAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA, DESINFECCIÓN, ESTERILIZACIÓN
OBJETIVOS
Obtener un conocimiento previo de los materiales de laboratorio que se emplearán en Microbiología.
Llegar a conocer las normas básicas de seguridad en el laboratorio, pues están encaminadas a reducir el riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas, lesiones, etc.
Aplicar correctamente las técnicas de limpieza, desinfección y esterilización para así poder mantenernos en un ambiente sano que nos permita realizar adecuadamente nuestros procesos experimentales.
Conocer los diferentes medios de cultivo que se emplearan en el laboratorio para mayor entendimiento de estos.
Aprender a preparar medios de cultivo para los microorganismos (bacterias)
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FUNDAMENTO TEÓRICO
Un laboratorio de microbiología es un lugar convenientemente habilitado donde se pueden manejar y examinar microorganismos.Este tipo de trabajo debe ser llevado a cabo con una buena técnica aséptica. Y por tanto se requiere un ambiente limpio y ordenado. Cuando manejemos cualquier tipo de muestra debemos evitar que microorganismos ajenos a nuestros cultivos y presentes en el ambiente se introduzcan en ellos contaminándolos, o que los microorganismos de la muestra nos contaminen a nosotros. Por ello se debe de trabajar en condiciones de esterilidad. En el laboratorio de microbiología encontraremos estas condiciones bien en campana de seguridad biológica o bien en la proximidad de la llama de un mechero de alcohol o de gas o mechero bunsen (que en este caso no se encuentra un instalado en el laboratorio). Aunque los microorganismos que se manipulen no sean considerados patógenos .Todos los cultivos de todos los microorganismos deben de ser manejados con precaución por su potencial patogenicidad. En resumen, deben tomarse en cuenta estos dos requisitos básicos: 1. Restringir la presencia de los microorganismos en estudio a sus recipientes y medios de cultivo para evitar el riesgo de contaminarse uno mismos o aun compañero. 2. Evitar que los microorganismos ambientales (presentes en piel, pelo, aire, ropa, etc.) contaminen nuestras muestras.
INDICACIONES GENERALES Y NORMAS BÁSICAS DE SEGURIDAD EN UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA: Microbiología Ambiental lima 29 de mayo del 2016
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El trabajo en el laboratorio de microbiología requiere de unas normas básicas en el manejo, orden y cuidado del material por parte de las personas que laboran allí. Por ello se debe tener en cuenta las siguientes INDICACIONES GENERALES, analizarlas justificando su razón para llevarlas a práctica en el trabajo de laboratorio: 1. ORGANIZACIÓN: Formar grupos en números adecuados, para lograr trabajar bien. 2. EL AREA DE TRABAJO: Cada mesa de trabajo debe de contar con los materiales adecuados. 3. UNIDADES DE SERVICIO: Hacer un buen y adecuado uso de las unidades de servicio, como en el caso del gas del mechero bunsen, o el agua de los caños. 4. EQUIPO PERSONAL: Estar en cada sesión de práctica de laboratorio con implementos adecuados. 5. MATERIALES Y EQUIPOS: Siempre usarlos con permiso de los encargados del curso. 6. LECTURA DE RESULTADOS: Siempre estar atentos y en constante observación pues los microorganismos necesitan observación a cada momento para notar los cambios que en ellos se produce. 7. PRECAUCION DE ACCIDENTES: Informar de cualquier accidente o suceso que note al profesor o encargado del laboratorio. 8. RECOMENDACIONES ACADÉMICAS: Antes de cada sesión de práctica de laboratorio, leer sobre el tema a tratar en dicha práctica.
NORMAS BÁSICAS:
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1. Hay que trabajar con calma y concentración. Procurando no distraer al resto de personas que trabajan en el laboratorio. 2. Al iniciar y finalizar las prácticas, el personal se lavará las manos con agua y jabón. 3. El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. 4. En el laboratorio de microbiología está prohibido comer, beber y fumar. Cuando se manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca, nariz, ojos u oídos. 5. Cualquier material que no se utilice en la realización de la práctica con microorganismos (libros, mochilas, abrigos, etc.) debe estar apartado del lugar de trabajo. 6. Los microorganismos deben de manejarse siempre alrededor de la llama. Es conveniente evitar movimientos bruscos. 7. No se debe pipetear nunca con la boca. 8. Por seguridad personal y protección del ambiente, para deshacernos de material contaminado utilizaremos siempre los recipientes adecuados. En un laboratorio de microbiología deberán existir recipientes específicos para: pipetas de vidrio sucias o contaminadas, para luego ser esterilizadas. 9. Bajo ningún concepto debe sacarse ninguna muestra contaminada del laboratorio. 10. En caso de accidente, avisar inmediatamente al responsable del laboratorio, dejando a una persona que vigile para evitar que otros se contaminen. 11. El transporte y almacenamiento de placas y recipientes que contiene cultivos representan un riesgo evidente. Por eso colocar las placas y otros recipientes que contengan cultivos de forma segura para evitar que se caigan y se produzca una contaminación. 12. En un laboratorio de microbiología deberá estar disponible un botiquín básico de primeros auxilios. MATERIAL DE LABORATORIO
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El material utilizado en un laboratorio de Microbiología es muy variado y depende fundamentalmente del tipo de trabajo que se está realizando; evidentemente, no se precisa el mismo equipamiento en un centro de investigación con un alto grado de especialización que en un laboratorio de Bacteriología Clínica. Por tanto, aquí sólo nos referiremos al material básico que se suele encontrar en un laboratorio mínimamente dotado.
A) Material de uso corriente: Material de vidrio o plástico que se usa para contener o medir: aquí se incluyen tubos de ensayo, vasos de precipitado, matraces, embudos, probetas, pipetas, dosificadores, etc., todo ello de distintos tamaños y capacidades. También incluimos las placas de Petri, los portaobjetos y cubreobjetos, cámaras de recuento, cestillos y cubetas para efectuar tinciones, jarras para incubar en anaerobiosis, etc. Material de siembra: constituido principalmente por asas y filamentos de platino, asas de rigalski y pipetas estériles. Material para toma de muestras e inoculaciones: escobillones estériles, tubos y frascos estériles, jeringas y agujas, trócares, cánulas, catéteres y material de disección.
B) Aparatos productores de calor: Se utilizan con diversas finalidades:
Para esterilización: autoclave (calor húmedo), horno Pasteur (calor seco) y mechero Bunsen (esterilización por calentamiento directo).
Para incubación: estufas, baños de agua, de aceite o parafina y de arena.
C) Aparatos productores de frío:
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Refrigeradores: son indispensables para conservar los medios de cultivo, productos biológicos y patológicos, así como mantener la supervivencia de algunos mo. Su temperatura oscila alrededor de los 4°C.
Congeladores: alcanzan temperaturas entre -20 y -70° C y son indispensables para conservar determinados productos biológicos (sueros, células, mo).
Neveras portátiles: para trasladar muestras al laboratorio en condiciones de refrigeración.
D) Material óptico: Es de capital importancia en el laboratorio ya que permite la observación de los mo.
Microscopios: en su distintas versiones (campo claro, campo oscuro, contraste de fases, Fluorescencia).
Lupa estereoscópica: permite observar colonias bajo distintas condiciones de iluminación.
E) Otro tipo de material y aparatos:
Agitadores y homogeneizadores.
Centrífugas.
Balanzas.
pHímetros.
Destiladores, etc.
LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DEFINICIONES Microbiología Ambiental lima 29 de mayo del 2016
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1. Esterilización Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estéril (en sentido microbiológico) está libre de microorganismos vivos. 2. Desinfección La destrucción, inactivación o remoción de aquellos microorganismos que pueden causar infección u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfección no implica necesariamente esterilización. 3. Desinfectante Agente usualmente químico, que mata las formas en crecimiento de los microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El término se refiere a sustancias utilizadas sobre objetos inanimados. 4. Antiséptico Sustancia que impide el crecimiento o la acción de los microorganismos, ya sea destruyéndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales. 5. Sanitarizante Agente que reduce la población microbiana a niveles seguros, según los requerimientos de salud pública. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo utensilios y equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar. 6. Germicida Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a sus esporas.
DISCUSIONES
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Como el laboratorio aún se encuentra en renovación, no tuvimos la disponibilidad de todos los materiales para poder hacer las observaciones respectivas
Los materiales de calentamiento, como el autoclave y la incubadora no estaban aún en funcionamiento en el momento de realizar el laboratorio
La instalación del gas aún no estaba terminada lo que provoco en futuros laboratorios que no se pueda realizar de manera adecuada los cultivos y la esterilización de materiales.
Algunos materiales presentaban imperfecciones como rupturas, suciedad, etiquetas que identifiquen a estos materiales.
CONCLUSIONES
Logramos obtener, pese a las limitaciones del laboratorio más conocimiento acerca de la utilización y funcionamiento de algunos materiales del laboratorio, como son las placas Petri, tipos de cultivo, etc.
Comprendimos la importancia de cumplir las normas de seguridad en un laboratorio y las precauciones que se debe tomar para llevar un laboratorio de una manera más ordenada y eficaz
Obtuvimos conceptos de limpieza de cultivos, esterilización, incubación, refrigeración etc.
RECOMENDACIONES Microbiología Ambiental lima 29 de mayo del 2016
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En cuanto a la desinfección del lugar de trabajo: - Fenol 5% (jabón carbónico) - Hipoclorito de sodio 2% - Cloruro de amonio cuaternario (bactericida) - Alcohol 70%
En cuanto a la desinfección de materiales: - Materiales contaminados (autoclave 121°c, 30´) - Materiales nuevos
(autoclave 121°c, 15´)
- Desinfectante de pipetas (lejía al 0.5%)
En cuanto a la esterilización: - Horno: 180°c x 2 h - Estufa: 37°c, para secar el material BIBLIOGRAFIA
FUENTE: Clavell Luis; Pedrique de A. Magaly. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Generales. Segunda Edición. FUENTE: GUIÓN DE PRÁCTICAS -Curso 2007-2008 UNIVERSIDAD DE MADRID FUENTE: MANUAL PARA LA INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE DANIEL RICARDO TORO
ANEXOS
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