UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS (Universidad del Perú, Decana de América)
FACULTAD DE QUIMICA, INGENIERIA QUIMICA E INGENIERIA AGROINDUSTRIAL E.A.P. DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL I. COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO II. DETERMINACION DEL NUMERO DE MICROORGANISMOS
CURSO: LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Y APLICADA PROFESOR: Mg. Sc. Blga. MIRIAM ESTELA MEMENZA ZEGARRA ALUMNOS: CAJACHAHUA VITELLA, DANIEL ALEJANDRO LEÓN UGARTE, JAVIER ALEJANDRO PINILLOS MIÑANO, RICARDO
AÑO
:
2014
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I. I.
COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
INTRODUCCION
Para el estudio del comportamiento de microrganismos, se debe realizar con cultivos puros es decir, de una sola especie de microorganismos y esta debe ser incluida en medios solidos o líquidos estériles que garanticen la pureza del cultivo. Las muestras que se utilizan generalmente para e l estudio de los microorganismos son generalmente una fuente compleja y presentan una gran variedad, de aquí se toma un inoculo y se transfiere a un medio estéril que generalmente es un líquido bajo condiciones asépticas. Para conseguir un cultivo puro se requiere de pasajes sucesivos de medios líquidos a solidos o viceversa hasta lograr UFC (Unidad de formación de colonias) lo suficientemente aislada que permitan su pureza. La pureza de los cultivos permite estudiar sus car acterísticas que presenta en los medios respectivos (Solidos o líquidos). El objetivo de esta práctica fue poder identificar a que especie correspondía cada cepa proporcionada, para eso se estudió la morfología de las colonias formadas. Cada carácter varía
según las necesidades metabólicas y de multiplicación de
las especies o
grupos
bacterianos y en parte ayuda a la identificación.
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II.
PROCEDIMIENTO:
Se proporcionó cepas puras de Bacterias de manera incógnita (A y B) y también cepas de Hongos (C y D).
Los medios de cultivo fueron: Abrir con cuidado el tubo de ensayo que contiene la cepa( que anteriormente fue incubada por 24 horas). Flamear el alambre de nicron Cuando baje su temperatura, extraer una alicuota del inoculo Depositar el inoculo en el nuevo tubo de ensayo con caldo nutritivo Tapar y dejar en la gradilla el tubo de ensayo que contiene la cepa. Rotular e incubar a 30º.
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REPLICACION LIQUIDO -LIQUIDO Cepa A
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Se realizo el mismo procedimiento anterior para extraer la alicuota del incoculo Se abrio el tubo de ensayo que contenia el agar nutritivo en plano inclinado y se procedio a inocular sobre la superficie en forma de zigzag desde abajo para arriba. Se esterilizó el alambre de nicron, y la boquilla del tubo de ensayo Se rotulo e incubo a 30°
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REPLICACION DE LQUIDO-SOLIDO
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Cepa B 5 º N A C I T C Á R P
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REPLICACION SOLIDO -SOLIDO Cepa C
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REPLICACION DE LQUIDO-SOLIDO
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Abrir con cuidado placa petri en el cual se encuentra el hongo Esterilizar el alambre de nicron y cuando baje su temperatura, extraer una pequeña muestra. Depositar el inoculo en el tubo de ensayo con sabouraud en plano inclinado. esterilizar la boquilla del tubo de ensayo y tapar con algodon Rotular e incubar a 30º.
Se repitio el mismo procedimiento. Se abrio el tubo de ensayo que contenia agar papa dextros en plano inclinado y se procedio a inocular sobre la superficie en forma de zigzag desde abajo para arriba. Se esterilizó el alambre de nicron, y la boquilla del tubo de ensayo Se rotulo e incubo a 30°
Cepa D
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III.
RESULTADOS ESPECIE DETERMINADA
ESPECIE REAL
MUESTRA PROBLEMA A
Escherichia coli
Escherichia coli
MUESTRA PROBLEMA B
Salmonella
Bacillus
MUESTRA PROBLEMA C
Pseudomonas
Pseudomonas
MUESTRA PROBLEMA D
Aspergillus
Aspergillus
Resultado de la Muestra Problema A
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Resultado de la Muestra Problema B
Resultado de la Muestra Problema C
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Resultado de la Muestra Problema D
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IV.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS :
Se observó que para cada muestra existe una formación morfológica diferente, lo c ual permitió determinar a qué especie pertenecían.
Se determinó con exactitud 3 especies de microorganismos, debido a que algunas de sus características son marcadas.
La pureza de una cepa es fundamental para poder asi determinar con exact itud la morfología ya que este al ser un método no muy objetivo se puede determinar erróneamente un microorganismo.
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RECOMENDACIONES:
Una de las condiciones funamentales para llevar acabo la determinación de los microorganismos es la pureza de la cepa que se va a incocular, por lo cual para poder garantizar un estudio morofologico preciso se requiere que se garantize las condiciones asépticas de todos los instrumentos que se usaran en el proceso
Para ver poder determinar bien la morfología de las colonias se debe contar con una adecuada luz, para lo cual este conteo y clasificación se debe hacer siempre cerca de la ventana o de un foco.
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CUESTIONARIO 1.
¿Cuál es la razón de utilizar cultivos puros para el estudio morfológico?
Se denomina cultivo puro al que contiene solo un tipo de microorganismos. Los cultivos puros se inician a partir de colonias aisladas, de manera que todos los i ndividuos tengan la misma composición genética.
2.
La finalidad del estudio morfológico es poder identificar frente a qué tipo de microorganismo nos encontramos mediante la forma y densidad de sus colonias, por eso si es que en la muestra existe más de un tipo de microorganismo, el M.O no deseado competirá por espacio y nutrientes, lo que alterara el resultado de la posterior lectura morfológica. También, en el peor de los casos el microorganismo no deseado puede llegar a inhibir el crecimiento y la replicación del M.O que deseamos caracterizar ¿La morfología de los microorganismos varia con el medio de cultivo. Por qué?
El tipo de medio de cultivo puede facilitar o limitar en cierto grado la estructura de la colonia, Medio Sólido El tipo de crecimiento que se observa en este tipo de medios son en colonias, y sus
características varían con respecto a su especie. También en este medio los desechos del microorganismo no precipitan se encuentran alrededor de este, otro factor es que al ser un medio sólido, la cantidad de nutrientes es limitada ya que poseen solo lo que hay a su alrededor.
Medio Líquido
Si la bacteria crece en un medio líquido, en la mayoría de los casos las células que se producen en cada división continúan su vida independientemente formándose una suspensión de células libres.
3.
¿Cuál es el fundamento de la cromo génesis?
La cromo génesis también llamado pigmentación de colonias bacterianas, es una de las características más notables de los cultivos. En algunas especies el pigmento producido es retenido dentro de las células y su masa celular se colorea; en otras especies, por el
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contrario, el pigmento es expulsado al medio de cultivo. Estos pigmentos pueden ser solubles o insolubles en agua, y no son producidos en todos los medios de cultivo ni bajo todas las condiciones ambientales (Grimot&Grimont, 1984; Harwood, 1989).
Factores que influyen en la pigmentación:
Condiciones de crecimiento, ciertos pigmentos se observan mejor en cultivos sólidos. Presencia o ausencia de fuentes nitrogenadas o de carbono ((Torres & Bonilla, 1999; Toro et al., 2001, Gómez-Marín & Naranjo-Fernández, 2003).
Las funciones específicas de la mayoría de los pigmentos en los cultivos bacterianos no están determinadas. En general, son metabolitos secundarios sin función biológica definida en el crecimiento celular, a los cuales se les han atribuido diversas funciones, como ser amortiguadores redox o generar/neutralizar radicales libres tóxicos de oxígeno, razones que podrían explicar la actividad antibiótica encontrada en algunos de estos compuestos, relacionando la habilidad de producirlos con la supervivencia del organismo y con el incremento in vivo de la virulencia de algunos microorganismos (Kerr, 2000). 4.
¿Cuál es el fundamento de la fluorescencia en los microorganismos?
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