UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA Facultad de Ingeniería Ambiental
INFORME DE LAORA!ORIO LAORA! ORIO N" #$ Acción bacteriostática selectiva de cristal violeta y acción oligodinámica de los metales pesados
DOCEN!E$ %&rge !ell& Cebrer&' MICROIOLOGÍA MICROIOLOGÍA SANI!ARIA SANI!ARIA ( ALUMNA$ Alarc)n Oli*era Ambar !i++ !i++an, an,
Lima-Abril ./(# LABORATORIO N° 5 OBJETIVOS -Observar el efecto del cristal violeta ,en diferentes diferentes concentraciones ,sobre el creciiento de icroor!anisos" -Observar el efecto de la acci#n oli!odin$ica oli!odin$ica de etales %esados ,sobre el creciiento de icroor!anisos" -Reconocer ediante la tinci#n de &ra ,los ti%os de icroor!anisos afectados %or el cristal violeta ' la acci#n de etales %esados
INTRO()**I+N c.as sstancias /0icas son ca%aces de in.ibir o atar a los icroor!anisos"Van desde eleentos et$licos %esados, coo la %lata ' el cobre .asta ol1clas or!$nicas co%le2as coo los co%estos de aonio caternario" Las diversas sstancias e2ercen s efecto antiicrobiano %or diferentes cainos ' sobre diferentes !r%os de or!anisos" Tabi1n var0an los efectos /e tienen sobre las s%er3cies o los ateriales sobre los /e se a%lican4 al!nos son co%atibles, ientras /e otros son destrctores" (ebido a estas ' otras variables, es necesario saber el co%ortaiento co%ortaiento de n a!ente /0ico antes de tiliarlo tiliarlo %ara na a%licaci#n %r$ctica %r$ctica deterinada" deterinada" En el si!iente laboratorio se realian los %rocediientos %ara caracteriar el cristal violeta ' la acci#n del etal %esado, sados %ara controlar controlar %oblaciones icrobianas4 vaos a describir ss odos de acci#n ' a indicar ss a%licaciones %r$cticas" 6)N(AENTO TE+RI*O *aracter0sticas *aracter0sticas de n desinfectante ideal7 Nin!8n a!ente /0ico antiicrobiano es el e2or %ara todas las 3nalidades,Esto 3nalidades,Esto no es sor%rendente a la vista de la vaiedad de condiciones ba2o las /e los a!entes %eden ser tiliados,las diferencias en s odo de acci#n ' los c.os ti%os de c1llas icrobianas /e .a' /e destrir "Si .biese n desinfectante ideal deber0a %oseer na foridable colecci#n de caracter0sticas"Nnca ser$ %osible encontrar n solo co%esto /e re8na todas estas %ro%iedades"Sin ebar!o,lo /e se es%eci3ca $s adelante es lo /e se debe tratar de conse!ir cando se %re%aran nevos a!entes antiicrobianos antiicrobianos ' debe considerarse considerarse tabi1n al .acer la valoraci#n de los desinfectantes %ara so en la %r$ctica"
1. Actividad antimicrobiana: la 'u'tancia 0uímica a ba1a c&ncentraci)n deber2 2. 3. 4. ". $.
tener un am3li& e'3ectr& de acti*idad micr&biana4 Solubilidad: la 'u'tancia deber2 'er '&luble en agua , &tr&' di'&l*ente'4 Estabilidad: l&' cambi&' de e'tabilidad deber2n 'er mínim&' en la 'u'tancia , n& a+ectar la c&ndici)n germicida4 No deberá ser toica al !ombre u otros animales: la 'u'tancia deber2 'er letal 3ara l&' micr&&rgani'm&' , n& 3ara el 5&mbre u &tr&' animale'4 #omogeneidad: la 3re3araci)n deber2 'er uni+&rme en 'u c&m3&'ici)n de manear 0ue l&' ingrediente' acti*&' 'e encuentren en cada a3licaci)n4 No deberá reaccionar con material orgánicos etra%o: cuand& 'e u'an e't&' de'in+ectante' en 'ituaci&ne' en la' 0ue adem2' de bacteria' 5a, cantidade' c&n'iderable' de material &rg2nic&6 mu, 3&c&6 'i n& e' 0ue nada del de'in+ectante6 e'tar2 di'3&nible 3ara actuar c&ntra l&' micr&&rgani'm&'4
&. 'oicidad para los microorganismos a la temperatura ambiente y a la del cuerpo: 3ara u'ar el c&m3ue't&6 n& 'er2 nece'ari& ele*ar la tem3eratura de la
e7i'tente en el ambiente d&nde 'e u'ara4 (. )apacidad de penetración: a men&' 0ue la 'u'tancia 3ueda 3enetrar atra*e' de la' 'u3er+icie'6 'u acci)n germicida 'e limitara al 'iti& de a3licaci)n4 *. No deberá corroer ni te%ir: n& deber2 3r&ducir rin u &tra' alteraci&ne' en l&' metale' & te8ir & da8ar la' tela'4 1+. ,ropiedad desodorante: l& ideal e' 0ue el de'in+ectante 3&r 'i mi'm& tenga &l&r agradable & 'ea in&d&r&4 11. )apacidad detergente: un de'in+ectante 0ue a la *e9 'ea detergente :agente lim3iad&r; l&grara d&' &b1eti*&' 3ue' la acci)n lim3iad&ra aumentara la de'in+ecci)n4 12. -isponibilidad: el c&m3ue't& deber2 e'tar di'3&nible en grande' cantidade' , a 3reci& ra9&nable'4
Selecci#n de n a!ente /0ico antiicrobiano7 Al!nos de los factores /e deben tenerse en consideraci#n al .acer la selecci#n de n a!ente /0ico antiicrobiano %ara s a%licaci#n %r$ctica son 7 9"- Natralea del aterial /e se va a tratar")n a!ente /0ico sado %ara desinfectar tensilios containados %ede ser ' %oco satisfactorio %ara s a%licaci#n sobre la %iel,es decir,%ede da:ar seriaente las c1llas de los te2idos"En consecencia,la sstancia seleccionada debe ser co%atible con el aterial al cal se %lica" ;"-Ti%o de icroor!aniso" No todos los icroor!anisos son i!alente ssce%tibles a la acci#n in.ibidora o ort0fera de n a!ente /0ico es%ec03co"
&ra-ne!ativas se diferencian en s ssce%tibilidad4 Esc.eric.ia coli =&rane!ativa> es c.o $s resistente a los desinfectantes cati?%nicos /e Sta%.'lococcs ares =!ra %ositivo>"(iferentes ce%as de la isa es%ecie var0an tabi1n en canto a s ssce%tibilidad a n a!ente antiicrobiano deterinado" @"-*ondiciones abientales" La te%eratra ,% ,tie%o,concentraci#n ' %resencia de ateria or!$nica etra:a,%eden tener inCencia sobre la tasa ' la efectividad de la destrcci#n icrobiana"El so con 1ito de n a!ente antiicrobiano re/iere el conociiento de la inCencia de estas condiciones sobre el a!ente deterinado,de anera /e %eda ser e%leado ba2o las condiciones $s favorables"
GRUPO PRINCIP AL Fenol y compues tos fenólicos
Alcoole s
CARACTER ISTICAS
(esnatrali an las %rote0nas , da:an la ebrana cellar
MODO DE ACCION
Los derivados =.eilresorc inol>redce n c.o la tensi#n s%er3cial (esnatrali *antos an $s %rote0nas4a! carbonos entes tiene el des.idratan alco.ol,es tes4acci#n $s deter!ente !ericida
COMP UESTO S
USO RECOMEN DADO
LIMITACION ES
*resole s =$s !erici das /e el fenol >
(esinfectan Efectividad te !eneral icrobiana liitada4 irritantes ' corrosivas
et0lic o =enos bacteri cida, $s t#ico>4 et0lico, %ro%0lic o
Antis1%ticos Antis1%tico %ara l a%iel 4 la concentraci #n del D %or ciento ata a los virs si no .a' ateria or!$nica etra:a
Efectivo Tintra contra de iodo bacterias ' =diselt es%oras o en alco.ol >4 iod#for os = F a!ente s de s%er3 cie> Clo&o 'y Se El cloro se i%oclo compues cobinan sa %ara ritos tos( con las desinfectar =.i!ieni %rote0nas de el a!a4 los an la co%esto tensili ebrana s de cloro os ' cellar ' son $s e/i%o con enias f$ciles de s> sar ' clorai tienen nas c.as =a!ent a%licacione es s oidant es> Al%e)%o Ro%en Efectivos <ara s enlaces de contra lde.0do .idr#!eno4d todos los esnatralia icroor!ani n %rote0nas sos ece%to es%oras bacterianas *uimioe El #ido de ata todas Oido ste&ili+" etileno las foras de ntes al/ila de vida etileno #"seoso co%estos s or!$nicos4 inactiva enias !"ló#en os $Io%o
Compues tos %e "monio cu"te&n"
alo!enaci# n de la tirosina4inac tiv enias ' otras %rote0nas
(esnatrali an %rote0nas4 da:an la
$s !ericidas /e otros deter!ente
(esinfecta la %iel
Irritante de las ebranas cosas
(esinfecci# n del a!a
Inactivados %or la ateria or!$nica4efe ctividad de%endiente del <."sabor olor ob2etables si no se controlan
Esteriliaci# n de instrento s,fi!aci# n
Estabilidad liitada4 no son es%orocidas
Esteriliaci# n de ateriales sensibles al calor4 instrento s,e/i%os !randes ' colc.ones *lorro (esinfecci# de n de la %iel4 cetil%iri a!entes donio 4 .i!ieniante
InCaable,% otencialent e e%losivo en fora %ra4 acci#n relativaent e lenta No son es%orocidas
&io '%ete&#e ntes c"tiónico s(
ebrana cellar
s4$s bactericida s contra bacterias &ra"%ositi vas fn!icidas"
Ge%.ir s an 4 <.eer ol
C&ist"l ,iolet"El *i&leta de metil&6 c&m>nmente den&minad& cri'tal *i&leta & *i&leta de genciana6 e' el n&mbre dad& a un gru3& de c&m3ue't&' 0uímic&' em3lead&' c&m& indicad&re' de 3< , c&l&rante'4 L&' *i&leta' de metil& '&n me9cla' de$ N-tetra6 N-3enta , N-5e7ametil 3-r&'anilina'4 Cuant& m2' metilad& e't? el c&l&rante6 'u c&l&r 'er2 de un *i&leta m2' &'cur&$ •
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!etrametil& :cuatr& metil&'; e' c&n&cid& c&m& Vi&leta de metil& .6 , encuentra u'&' e'3ecí+ic&' en 0uímica , medicina4 @entametil& :cinc& metil&'; e' c&n&cid& c&m& Vi&leta de metil& 6 , e' m2' &'cur& c&m& c&l&rante 0ue .4 n m2' &'cura 0ue la B4
Aplicaciones. •
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El 3rinci3al u'& del *i&leta de metil& :3&r *&lumen brut& u'ad& mundialmente; e' el de tintura te7til de c&l&r 3>r3ura , 3ara dar t&n&' *i&leta &'cur& en 3intura' , tinta de im3re'i)n4 El *i&leta de metil& . :llamad& 'encillamente *i&leta de metil&; e' u'ad& en 0uímica c&m& un indicad&r de 3< 3ara 3r&bar l&' inter*al&' de 3< de / a (6/4 En el e7trem& 2cid& de 'u inter*al& de medici)n6 t&ma un c&l&r amarill&4 En el alcalin&6 'e 5ace *i&leta a9ulad&4 El Vi&leta de metil& 3uede 'er 'umini'trad& c&m& 3a3el de 3rueba de 3<6 & 3uede 'er 'umini'trad& c&m& cri'tale' 3ur&' , di'uelt&' en la mue'tra a 'er 3r&bada4 En medicina6 el *i&leta de metil& (/ e' c&n&cid& c&m& *i&leta de genciana , e' el ingrediente acti*& en el c&l&rante de Gram6 u'ad& 3ara cla'i+icar bacteria'4 El *i&leta de genciana de'tru,e c?lula'6 , e' u'ad& en de'in+ectante de inten'idad m&derada e7tern&4 El *i&leta de genciana e' mu, *enen&'& 3ara la ma,&ría de l&' animale'6 cac5&rr&' , gat&' incluid&' n& debe 'er u'ad& 3ara de'in+ecci)n de la 3iel de e't&' animale'4
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El *i&leta de metil& tiene tambi?n la 5abilidad de c&nectar'e al ADN4 @&r l& tant&6 en ciencia' bi&m?dica'6 e' u'ad& 3ara en'a,&' de *iabilidad celular4 La c&ne7i)n al ADN 3uede tambi?n cau'ar ru3tura' en el 3r&ce'& de re3licaci)n del ADN6 el cual 3uede lle*ar a mutaci&ne' , c2ncer 4 N&rmalmente e' +&rmulad& 3ara u'& c&m& indicad&r de 3< en la *ariedad de *i&leta de metil& c&m& una '&luci)n de /6/( a /6/# en m* , en la *ariedad de *i&leta de cri'tal c&m& una '&luci)n de /6/. en m* en agua4 En el 2rea de +í'ica6 3&r 'u alta 5i3errabili9idad6 el *i&leta-cri'tal 'e utili9a c&m& un tra9ad&r +lu&re'cente , en e73eriment&' de emi'i)n de e+ect&' de )3tica n&-lineal4 @&r e1em3l& en la generaci)n del 'egund&-arm)nic&-)3tic&4 De 5ec5& 'u e'tructura multi3&lar :&ctu3&lar; re3re'enta una e7celente ruta 3ara &b'er*ar e+ect&' )3tic&' n&-lineale' en c&m3araci)n c&n l&' c&m3ue't&' di3&lare'4
E'tructura4
' en !licerol =9 !rao se diselve en 95 L de !licerol>" Es insolble en 1ter" ecaniso de acci#n El ecaniso de acci#n es desconocido" Es%ectro de actividad Antis1%tico de ba2a %otencia" Activo frente a al!nos &ra %ositivos =es%ecialente Sta%.'loccocs s%%"> ' al!nos .on!os =*andida s%%">" S actividad es c.o enor en &ra ne!ativos ' es totalente inactivo frente a es%oras, virs ' bacterias $cido alco.ol
resistentes" S actividad se increenta al aentar el % etales %esados ' ss co%estos 7 La a'or0a de los etales %esados,bien solos o en ciertos co%estos,son da:inos %ara los icroor!anisos"Los $s efectivos son el ercrio,la %lata ' el cobre"
etales %esados =Acci#n oli!odin$ica>"*antidades etreedaente %e/e:as de ciertos etales,en %articlar de %lata,%eden e2ercer n efecto letal sobre las bacterias4esto se conoce coo acci#n oli!odin$ica %or derivarse de dos %alabras !rie!as7oli!os,/e si!ni3ca H%e/e:o , ' d'nais /e si!ni3ca H%oder "El fen#eno se %one de ani3esto en el laboratorio,colocando n troo de etal li%io =cobre o %lata,oneda> sobre na %laca inoclada"(es%1s de la incbaci#n na ona de in.ibici#n =no .a' creciiento> rodea al etal"La cantidad de etal necesitada %ara este efecto in.ibitorio es etreadaente %e/e:a,solo nas cantas %artes %or ill#n" *o%estos de etales %esados"Nerosos co%estos de etales %esados tienen actividad !ericida o antis1%tica"Los $s destacados co%estos antiicrobianos de etales %esados son los de ercrio,%lata ' cobre"El clorro erc8rico,/e en na 1%oca fe n %o%lar desinfectante,'a no se tilia4 sin ebar!o,varios co%estos or!$nicos de ercrio =ertiolato,ercrocroo ' eta%.en> son tiliados coo antis1%ticos"El nitrato de %lata .a sido sado drante c.o tie%o %ara la %revenci#n de las infecciones !onoc#cicas de los o2os en los reci1n nacidos"Los co%estos de cobre son a%liaente tiliados coo fn!icidas,en la a!ricltra" )no de los odos de acci#n de los etales %esados ' de ss co%estos es ediante la desnatraliaci#n de las %rote0nas"En el caso del clorro erc8rico,la in.ibici#n va diri!ida a enias /e contienen !r%os slf.idr0licos"
TIN*I+N (E &RA Tinci#n de &ra")na de las t1cnicas de tinci#n diferencial %ara bacerias,$s i%ortante ' $s a%liaente tiliada,es la tinci#n de &ra"En este %rocediiento la etensi#n de c1llas %reviaente 32ada se soete a las si!ientes solciones en el orden /e se indica7 cristal violeta,solci#n de 'odo,alco.ol =n a!ente decolorante> ' safranina otro colorante de contrste adecado"Las bacterias te:idas %or el 1todo de &ra caen dentro de dos !r%os")no de ellos ,el de las bacterias &ra %ositivas,conservan el colorante cristal violeta ',%or tanto,a%arecen de color violeta oscro"El otro !r%o de las bacterias &ra ne!ativas %ierden el cristal violeta al ser lavadas con el alco.ol ' al te:irse con el colorante de contraste safranina,/e es ro2o,a%arecen de color ro2o"
Soluciones en el o&%en %e su "plic"ción 1 C&ist"l ,iolet" C2 3 Solución %e io%o I
4 Alcool
REACCION . ASPECTO DE LAS /ACTERIAS G&"m0positi,"s G&"m0ne#"ti,"s
Las c1llas se ti:en de violeta Se fora n co%le2o *V-I dentro de las c1llas" Las c1llas contin8an violetas Las %aredes cellares se des.idratan, los %oros eran4 la %ereabilidad de la %ared cellar ' de la
Las c1llas se ti:en de violeta Se fora n co%le2o *V-I dentro de las c1llas" Las c1llas contin8an violetas" Se etraen l0%idos de las %aredes cellares, los %oros se a!randan ' el co%le2o *V-I es eliinado de la c1lla4
5 S"f&"nin"
ebrana disin'e 4 el co%le2o *V-I no %ede salir de las c1llas 4 las c1llas %eranecen color violeta" Las c1llas no se afectan4 %eranecen de color violeta
las c1llas /edan incoloras"
Las c1llas toan este colorante ' se %onen de color ro2o
Acci#n bacteriost$tica selectiva del cristal violeta" Preparar agar nutritivo, en 20 tubos de ensayo (4 para c/grupo), cada tubo con 15 ml de agar nutritivo con la proporción de 23g de gar por cada 1000ml y calentarlos a m!s de 45"#$
!&mar tub&' de en'a,& , ec5ar ml de agua de'tilada6 a cada tub&6 c&n una 3i3eta4 @re3arar una '&luci)n acu&'a de cri'tal *i&leta de :/4(; , tran'+erir (ml de la '&luci)n a un& de l&' tub&' c&n ml de agua4 E't& da una diluci)n de ($(/ /// 'i de e'ta >ltima '&luci)n 3re3arada6 tran'+erim&' (ml al tub& de ml de agua de'tilada6 tendrem&' la diluci)n de ($(// ///4 Similarmente re3itiend& el 3r&ce'& anteri&r6 'i tran'+erim&' ( ml a &tr& tub& de ml de agua de'tilada &btendrem&' la diluci)n de ($(/// ///4 De'3u?' de lle*ar aut&cla*e • • •
!ran'+erir (ml de la diluci)n ($(/ /// a una 3laca 3etri4 !ran'+erir (ml de la diluci)n ($ (// /// a &tra 3laca 3etri4 !ran'+erir (ml de la diluci)n ($(/// /// a &tra 3laca 3etri4
Verter el agar +undid& en la' tre' 3laca' de 3etri , me9clar bien el c&l&rante c&n el agar r&tand& 'ua*emente la 3laca6 3ara &btener una di'tribuci)n uni+&rme del c&l&rante4 Verter el c&ntenid& del >ltim& tub& de agar en la 3laca de 3etri 'in c&l&rante4 Cuand& 5a,a '&lidi+icad& el agar6 in*ertir la' 3laca' , di*idir cada una en d&' 3arte' iguale' 3arte A , 3arte en e'ta' d&' 9&na' 'e debe in&cular c&l&nia' 3re3arada' anteri&rmente4 In*ertir la' 3laca' e incubarla' a HC 3&r JK 5&ra'4
Acci#n oli!odin$ica de etales %esados7 La*ar la m&neda c&n agua de'tilada C&l&car la m&neda al centr& de una 3laca 3etri e'terili9ada4 Se in&cul& el tub& c&n agar una g&tita de culti*& del lab&rat&ri& de la determinaci)n de calidad del agua4 Verter el agar dentr& de la 3laca de 3etri 0ue c&ntiene la m&neda De1ar 0ue 'e '&lidi+i0ue el agar4 In*ertir la' 3laca' e incubarla' a HC 3&r JK 5&ra'4
RES)LTA(OS7 Acci#n selectiva del cristal violeta7 Concent&" ción 1718888
G&upo 1
G&upo 3
G&upo 4
G&upo 5
G&upo 6
A F
A F
A F
A
A F
B F
B F
B F
B
B F
1788888 171888888 Sin colo&"nte
F F F
F F F
F F
F F
F F
F F
F F F
F F F
F F F
F F F
=F> a' creciiento =- >No a' creciiento Esc.eric.ia coli 7 &ra ne!ativo Bacils 7 &ra %ositivo
G&upo N9 1 N9 3 N9 4 N9 5 N9 6
Coloni" A
Coloni" /
&ra =F> Estre%tobacilos &ra =F> Esta3lococos &ra =F> Esta3lococos &ra =-> Esta3lococos &ra =-> cocos
&ra =F> Estre%tobacilos &ra =F> *ocos &ra =F> Estre%tobacilos &ra =F> *ocobacilos &ra =-> Estre%tococos
(iscsi#n de resltados" Teniendo en centa 7 979 in.ibe !ra F 7 in.ibe !ra 979 in.ibe !ra F 7 no efecto !ra 979 no efecto !ra F 7 no efecto !ra 9"- 979 .bo creciiento en todos los !r%os ,no se e2erce fnci#n bacteriost$tica"
;"- 979 !r%o 9 7 debi# de .aber in.ibido a las ; colonias4 sin ebar!o, la tabla de datos estran creciiento" !r%o ;7 debi# de .aber in.ibido a las ; colonias4 sin ebar!o, la tabla de datos estran creciiento" !r%o @7 no se in.ibi# el creciiento de las colonias, las colonias en este !r%o son !ra F ,se!8n la concentraci#n ,se debi# .aber in.ibido el creciiento" !r%o M7 la colonia A es !ra =.bo creciiento > ,lo cal el cristal violeta %ara esta concentraci#n no .ace sr!ir efecto, la colonia B es !ra F =.bo creciiento > ,el cristal violeta debi# .aber actado e in.ibir el creciiento"
&r%o 5 7 las colonias A ' B son !ra - =.bo creciiento >, el cristal violeta a esta concentraci#n no tvo efecto"
@"- 9 7 9 en todos los !r%os ,donde .a' colonias !ra F ' !ra =.bo creciiento > el cristal violeta no tvo efecto sobre s creciiento"
M"- sin colorante en los !r%os 9,;,M ' 5 .bo creciiento en todos las %lacas, sin el cristal violeta las bacterias crecen noralente"
A**I+N OLI&O(INI*A (E ETALES
(IS*)SI+N (E RES)LTA(OS7 &R)
Se observ# la ona oli!odin$ica alrededor de la oneda"La oneda fe ac:ada el a:o ;9"
&R)
A diferencia del !r%o 9 ,en esta %laca se estra niforidad ,' el .alo de la ona oli!odin$ica es notorio"El a:o de la ac:aci#n de la oneda fe 9PP5 "%eso del lat#n estiado es de @"5 !"Se %resenta la ona de estilaci#n ' la ona de creciiento noral"
&R)
En este !r%o se ostr# solaente na ona oli!odin$ica"Las colonias crecieron tabi1n alrededor de la oneda"El creciiento en toda la %laca fe de creciiento noral"
&R)
Se estra na ona oli!odin$ica,donde no .bo creciiento de bacterias,se observa la ona de estilaci#n ' la ona de creciiento noral"
OBSERVA*IONES 9"-Los resltados de los !r%os no concerdan con la teor0a de in.ibici#n ' acci#n bacteriost$tica del cristal violeta en la a'or0a de casos" ;"-En las %lacas del !r%o @ ,se verti# solaente 9l del colorante "Se observ# na consistencia creosa al oento de reco!er las %lacas de la incbadora"
;"- Se observa /e en las %lacas .bo creciiento de bacterias no inocladas en estr0as" @"-Los resltados del e%eriento no feron los es%erados,lo /e %do deberse a na incorrecta ani%laci#n de los instrentos ,no se!ir debidaente las indicaciones ' no tener cidado de la containaci#n al oento de realiarse el e%eriento" *ON*L)SIONES 9"-El efecto del cristal violeta a diferentes concentraciones nos estra /e no es e3ciente en este e%eriento ,'a /e bacterias !ra F ' !ra - se desarrollaron a8n cando el colorante debi# .aber actado" La %laca sin colorante estra el creciiento de bacterias del iso odo /e na %laca con concentraciones diferentes de colorantes" ;"-En todos los !r%os se estra al enos na ona oli!odin$ica, lo /e nos indica /e los etales %esados =cobre ,inc> in.iben el creciiento de bacterias alrededor de estos" @"- ediante la a'da de la t1cnica de la tinci#n de &ra se %ede identi3car /e ti%os de bacterias %odr0an ser in.ibidas a diferentes concentraciones de cristal violeta"
RE*OEN(A*IONES 9"- Verter adecadaente las concentraciones de cristal violeta sobre la %laca
Referencias Biblio!r$3cas" (4- Mic5ael Madigan6%&5n MartinB&6%acB @arBer 6i&l&gía de l&' micr&&rgani'm&' 6Madrid6Edit&rial @ear'&n 6.//J4 .4-Mic5ael %4@elc9ar 6Element&' de Micr&bi&l&gía 6M?7ic&6Edit&rial Mc-Gra
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ANEOS
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6OTO&RA6AS TOA(AS EN LABORATORIO 7
ESTRE
