LAPORAN PRAKTIKUM PRAKTIKUM BIOKIMIA (Kinetika Reaksi Enzim)
DISUSUN OLEH KELOMPOK D1 10060310105 10060310106 10060310107 1006031010" 1006031010%
Siti Aminah Irma Yunita Aryani Sey Nuru U!ah Hani#a Humani$ya &ara 'erina
ASIS&EN KELOMPOK( A)i Su*riya)i+ S, -arm, LA.O/A&O/IUM LA.O/A&O/IUM -A/MASI &E/PADU UNI& . P/O/AM S&UDI -A/MASI -AKUL&AS MIPA UNIS.A 011
I. Tujuan ujuan •
Da*a Da*att mema memaha hami mi *rin$ *rin$i* i* 2ine 2ineti ti2a 2a rea2 rea2$i $i eni enim m )an )an !a2t !a2t4r 4r yan yan
•
mem*enaruhi 24n)i$i 4*timum $uatu enim, Da*at mea2u2an *er4aan $e$uai Stan)ar) O*era$i4na Pr4e)ur,
II. Teori Dasar Dasar
Enim men2atai$i$ ham*ir $emua rea2$i8rea2$i rea2$i8rea2$i i44i$ *entin, Oeh 2are 2arena na itu ai ai ahi 2e$ehat e$ehatan an *enet *enetahu ahuan an menen menenai ai $i!at8 $i!at8$i! $i!at at 2imia 2imia )an !un !un$i $i eni enim m $an $anat at )i*e )i*er ru2 u2an an a*a a*ai ia a a2an a2an mem* mem*er eru una na2a 2an n nya nya )aa )aam m *r4$e)ur )ian4$a, .eera*a aan imu 2e$ehatan 2e$ehatan teah mem*er4eh man!aat )ari )ari *ema2 *ema2aia aian n anai$ anai$i$ i$ enim enim ini+ ini+ $e*ert $e*ertii *a)a *a)a *enya2 *enya2it it in!ar2 in!ar2 mi42ar mi42ar)ia )ia++ he*a he*ati titi ti$+ $+ 2an2 2an2er er *r4$ *r4$ta tat+ t+ *eny *enya2 a2it it *eny *enyum uma att hati hati,, A2ti A2ti#i #ita ta$ $ enim enim *a)a *a)a eera*a *enya2it mun2in tini )an *a)a eera*a yan ainnya mun2in ren)a ren)ah, h, Pr4$e Pr4$e$ $ u9i enim enim 9ua 9ua men9a) men9a)ii $ema2i $ema2in n *enti *entin n *a)a *a)a *emeri *emeri2$ 2$aan aan eneti2+ 2arena )a*at )i*a2ai untu2 men)ete2$i *ema:a heter4i4t *enya2it8 *enya2it *enya2it 2eturunan eturunan $e*erti $e*erti !eni2 !eni2et4nu et4nuria, ria, &eah )i2etahu )i2etahuii )enan )enan 9ea$ah:a 9ea$ah:a enim 9arinan )i)i$triu$i2an )enan ara yan ter4rani$a$i ai2; $e u2an hanya hanya merui* merui*a2 a2an an <2ant <2ant4n 4n 4na 4nar= r= enim, enim, Namun Namun ha$i ha$i )ari )ari rea2$ rea2$ii enim enim )aam $atu 24m*4nen 9arinan a2an mem*unyai *enaruh u2u* e$ar *a)a *r4$e$ enim ain *a)a 24m*4nen yan ainnya )aam 9arinan ter$eut atau ah2 ah2an an *a)a *a)a 9ari 9arin nan an yan yan ain ainny nya a $ama $ama $e2a $e2ai i,, Pene eneta tahu huan an yan yan ei eih h men)aam menenai )i$triu$i enim )i)aam $e men9a)i $anat *entin una Mentgomery,Rex. 1993? *emahaman me2ani$me *enya2it e$erta tera*inya,> Mentgomery,Rex.
Enim a)aah i42atai$ yan )i*r4)u2$i 4eh 9arinan hi)u* )an )a*at menin2at2an a9u rea2$i yan mun2in ter9a)i )aam 9arinan, Enim e2er9a )enan )enan urutan urutan yan yan teratu teraturr, .ia .ia rea2$ rea2$ii er9a er9aan an tan*a tan*a a)anya a)anya enim+ enim+ ma2a ma2a rea2$i a2an er9aan amat, Mi$a @O erea2$i )enan HO mementu2 a$am 2ar4nat+ $eaian )ari*a)anya *a)a $uatu *H $i44i$ a2an teri4ni$a$i )an mementu2 i4n i2ar4nat, Di$4$ia$i ini tentunya ti)a2 terantun *a)a 2atai$i$ enim+ ta*i meru*a2an $i!at $tru2tur a$am itu $en)iri, HO B @O C H@O3 C HB B H@O38 Penuraian a$am 2ar4nat ta*a meaui 2atai$i$ men9a)i H O )an @O ti)a2 ter9a$ ter9a$ii $e2e $e2eti2 ti2a, a, 2arena 2arena a9u a9u rea2$ rea2$ii ini )aam )aam 2enyata enyataany anya a $anat $anat amat amat++ 2e$eimanan mun2in ti)a2 a2an tera*ai )aam 1 9am, i2a )iami 4nt4h air 2ar4nat au )itamah2an )i tamah2an enim anhhi)ra$e 2a4nat+ ma2a 2e$eimanan a2an tera*ai )aam 1 menit, Se )arah merah )aam tuuh $anat 2aya memau *eruahan @O men9a)i i2ar4nat meaui entu2 *erantara a$am 2ar4natyan Mentgomery,Rex. 1993? ter)i$4$ia$i, >Mentgomery,Rex.
Enim a)aah Katai$ .i44i$ yan )a*at menin2at2an a9u rea2$i $am*ai eih )ari 106 2ai, Dan )ua $i!at )a$arnya yaitu *enin2atan a9u rea2$i )enan
tan*a *eruahan *a)a enim )an *enin2atan a9u rea2$i tan*a *eruahan 2e$eimanan >euiirium? $erta *enurunan eneri a2ti#a$i,
La9u /ea2$i 2imia ( Perubahan konsentrasi per unit waktu
>m4 F1 $F1? /ea2$i 2ataiti2 enimati$( turnover per unit waktu+
2ata >2at+ m4 $ F1?, internati4na unit U
>Gm4 turn4#er minF1; 1 U 16,7 n2at?,
Pa)a enim !a2t4r8!a2t4r yan mem*enaruhi 24n)u2$i 4*timum enim iaah
*H+
Suhu+
24n$entra$i
$u$trat
)an
enim+
Inhiit4r+
A2ti#at4r,
Penamahan $u$trat )enan 24n$entra$i tini a2an menin2at2an 2er9a enim, Karena enim a2an te*at eri2atan )enan $u$trat+ )an ia $u$trat eih anya2 ma2a ti)a2 9a)i ma$aah 2arena ia ter9a)i tumu2an+ a2an ter9a)i antara $u$trat )an $u$trat $aat :a2tu er$amaan, .ere)a ha )enan *enamahan $u$trat 24n$entra$i 2ei+ ma2a a2an ter9a)i tumu2an antara
$u$trat ama )an )enan yan aru untu2 eri2atan )enan enim, Sehina a2ti#ita$ enim a2an teranu, A2ti#at4r *a)a enim )a*at eru*a 24enim atau 24!a2t4r, K4!a2t4r ini eru*a a2ti#at4r an4rani2 )an 24enim eru*a a2ti#at4r 4rani2, Dia:ah ini tae eera*a 24!at4r Enyme
@4!a2t4r
Enim
oenz!me
&hiamine *yr4*h4$*hate -a#in a)enine nue4ti)e Ni4tinami)e a)enine )inue4ti)e Pyri)4a *h4$*hate @4enyme A >@4A? .i4tin 5 8De4ya)en4$y 4aamin &etrahy)r4!4ate
Pyru#ate )ehy)r4ena$e M4n4amine 4i)a$e Latate )ehy)r4ena$e y4en *h4$*h4rya$e Aety @4A ar4ya$e Pyru#ate ar4ya$e Methyma4ny muta$e &hymi)yate $yntha$e
Meta"
JnB JnB MB MB NiB M4 Se MnB KB
@ar4ni anhy)ra$e @ar4y*e*ti)a$e Eco/' He42ina$e Urea$e Nitrate re)uta$e utathi4ne *er4i)a$e Su*er4i)e )i$muta$e Pr4*i4ny @4A ar4ya$e
III.A"at #an Ba$an III. %. A"at
8 8 8 8 8 8 8 8 8 8
.atan *ena)u2 @4r4n 2aa @u#et Kerta$ $arin Pi*et tete$ Pi*et u2ur 1 mL; 5 mL; 10 mL St4*:ath S*e2tr4!4t4metri 44rimetri &aun rea2$i ater ath 35 @
III. &. Ba$an
8 8 8 8 8 8 8
Aua)e$t Larutan &@A 0 Larutan 2a$ein Larutan )a*ar *4$!at 0,1 M *H " Larutan NaOH 0,5 N Larutan tri*$in > 10 m )aam 5 mL )a*ar *4$!at 0,1M *H " ? /eaent !4in8 @i4ateu
I'.
Prose#ur Kerja
&aun t 0 menit 8
arutan )a*ar *4$!at )an tri*$in )ima$u22an 2e)aam taun rea2$i $erta )itamah2an ma$in8ma$in 3 mL arutan &@A 0 + )ia)u2 *erahan )an )iin2ua$i 30 menit *a)a :ater ath
35
@,
Kemu)ian )itamah2an arutan 2a$ein $e$uai tae )an )i)iam2an 0 mL )aam emari e$, Lau )i$entri!ua$i 10 menit )an $arin meaui 2erta$ $arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n, &aun t 0 menit 8
Diin2ua$i 5 menit *a)a :ater ath 35
@ ma$in8ma$in taun
er*ena)u2 yan eri$i 2a$ein $e$uai tae $ami )ia)u2, Kemu)ian )itamah2an erturut8turut arutan uer *4$!at )an arutan tri*$in, Diin2ua$i2an $eama 0 menit *a)a in2uat4r 35
@ )ihitun $eteah *enamahan tri*$in, Dihenti2an rea2$i )enan *enamahan 3 mL &@A 0 2e)aam ma$in8ma$in taun )an )ia)u2 $anat 2uat, Lau Di)iam2an $eama 0 menit )aam air e$ untu2 menyem*urna2an *enen)a*an, Dan )i$entri!ua$i $eama 10 menit 2emu)ian )i$arin untu2 )iami $u*ernatannya, -itrat )ia2u2an met4)e an$4n+ yaitu )iam*ur2an mL &@A8-itrat )enan mL NaOH 0,5 M 2emu)ian )itamah2an 1 mL arutan
-4in8
@i4ateu > 1 #4ume reaen )itamah 1 #4ume aua)e$t?, Kemu)ian )iam2an 10 menit )an )iteta*2an $era*annya 650 nm, '.
Data Penamatan
Taun
I
Per"akuan !an #i"akukan Penama$an Larutan Diinkuasi #an
0entri+uasi #an
u*er +os+at, tri-sin,
#ieri Larutan
#isarin
#an TA &/
kasein
Larutan er:arna *utih
Larutan er:arna *utih
Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah
2eruh )an ter)a*at
er:arna *utih
&@A men9a)i *utih
$e)i2it en)a*an
aa2 enin+
enin
)i$e2eiin taun
namun $eteah )i$arin men9a)i
II
Larutan er:arna *utih
Larutan er:arna *utih
$anat enin Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah
2eruh )an ter)a*at
er:arna *utih
&@A men9a)i *utih
$e)i2it en)a*an
aa2 enin+
enin
)i$e2eiin taun
namun $eteah )i$arin men9a)i
III
I'
Larutan er:arna *utih
Larutan er:arna *utih
$anat enin Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah
2eruh )an ter)a*at
er:arna *utih
&@A men9a)i *utih
en)a*an )i$e2eiin
aa2 enin+
enin
taun teta*i ti)a2
namun $eteah
terau anya2
)i$arin men9a)i
Larutan er:arna *utih
Larutan er:arna *utih
$anat enin Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah
2eruh )an ter)a*at
er:arna *utih
&@A men9a)i *utih
anya2 en)a*an
aa2 enin+
enin
)i$e2eiin taun
namun $eteah )i$arin men9a)i
'
Larutan er:arna *utih
Larutan er:arna *utih
$anat enin Larutan men9a)i
)an $eteah )itamah
2eruh )an ter)a*at
er:arna *utih
&@A men9a)i *utih
en)a*an )i$e2eiin
aa2 enin+
enin
taun teta*i ti)a2
namun $eteah
terau anya2
)i$arin men9a)i $anat enin
NaO1 ,2 M
Per"akuan !an #i"akukan Reaen 3o"in4io5a"teu 6 A7ua#est
Penentuan Ni"ai Asoransi
Tau
menunakan
n
0-ektro+otom eter
I
Larutan
Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian
er:arna
ata$ er:arna *utih enin )an
*utih enin
)iaian a:ah er:arna 2unin+
0+050
namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i II
Larutan
h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian
0+051
er:arna
ata$ er:arna *utih enin )an
*utih enin
)iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i
III
Larutan
h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian
er:arna
ata$ er:arna *utih enin )an
*utih enin
)iaian a:ah er:arna 2unin+
0+060
namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i I'
Larutan
h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian
er:arna
ata$ er:arna *utih enin )an
*utih enin
)iaian a:ah er:arna 2unin+
0+06%
namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i '
Larutan
h4m4en )an er:arna 2unin Larutan men9a)i a*i$an+ )iaian
er:arna
ata$ er:arna *utih enin )an
*utih enin
)iaian a:ah er:arna 2unin+ namun $eteah )ia)u2 arutan men9a)i h4m4en )an er:arna 2unin
Penamahan Larutan uer !4$!at )an tri*$in
0+060
Seteah )itamah2an &@A 0
Ditamah2an Larutan 2a$ein
Seteah )i$entri!ua$i
Ditamah2an /eaen -4in8@i4ateu )an Aua)e$t 'I.
Per$itunan
•
Perhitunan A$4ran$i
AI At0 F At0 0+071 F 0+050 0+01 AIII At0 F At0
AII At0 F At0 0+0"1 F 0+051 0+030 AI' At0 F At0
0+0" F 0+060
0+0" F 0+06%
0+0
0+13%
•
Perhitunan Kee*atan
t t0 F t0 0 ∆A ∆ t
'I
'II
0,021
0,03
20
1+05 Q 1083 mm4menit
'III
'I'
0,024
∆A ∆ t 0,139
20
1+ Q 1083 mm4menit •
20
1+5 Q 1083 mm4menit
∆A ∆ t
∆A ∆ t
20
6+%5 Q 1083 mm4menit
Perhitunan K4n$entra$i Su$trat
SI
aliquot V total Q
aliquot V total Q
SII
0,1
7
0,5
Q 0+0
7
Q 0+0
0+"57 Q 1083 mm4
1+"6 Q 1083 mm4
aliquot V total Q
aliquot V total Q
SIII
SI'
1
7
3
Q 0+0
+"571 Q 1083 mm4
7
"+571 Q 1083 mm4
&ae Ha$i )an ra2 &ae Mahei$8Menten
•
'(mmo"8menit) %,2 ; %4< %,2 ; %4< %,& ; %4< =,>2 ; %4<
&ae Line:e#er8.ur2
Q 0+0
90: (mmo")
0+"57 Q 1083 1+"6 Q 1083 +"571 Q 1083 "+571 Q 1083
1
1
V (menit8mmo")
[ S ] (%8mmo") 3500+1750 6%%+%"60 350+0053 116+6671
>2&,% ===,===@ ?<<,<<<< %<,??>
ra2 Line:ea#er8.ur2 100 1000 !>? 0,15 B 7%,61 /R 0,1
"00 %8'
600 00 00 0 0
500
1000
1500
000 %8(0)
y a B + )imana a
Km Vmax +
1
Vmax
Pa)a ra2+ )i2etahui y 0+15 B 7%+61 1
Vmax 1
7%+61
Vmax 1
'ma
479,61
'ma +0"5 Q 1083 mm4menit
500
3000
3500
000
a
Km Vmax
Km
0+15
−3
2,085 × 10
3+07 Q 1083
K m 'II.
Pema$asan
Pa)a *ra2ti2um menenai 2ineti2a rea2$i enim ini *ener9aan )iai men9a)i aian :a2tu+ yaitu t0 )an t0, Pere)aanya yaitu tereta2 *a)a *ener9aan t0 *emerian 2a$ein )ia2u2an tera2hir $eteah uer+ tri*$in $erta &@A >tri 2ar4yat ai)?, Pa)a t0 2a$ein )ima$u22an )ia:a aar terihat rea2$i a:a yan ter9a)i *a)a 2a$ein, Ma2a 2a$ein ini a2an a2ti! )ia:a rea2$i $am*ai a2hirnya )ieri2an &@A )ia2hir, Me2ani$me /ea2$i enimati$ yaitu )enan enim )a*at erea2$i )enan eera*a ara+ me$2i )emi2ian ham*ir $emuanya )enan *enurunan (
Penurunan Eneri A2ti#a$i )enan *ementu2an 24n)i$i yan 442 untu2 $taii$a$i 2ea)aan tran$i$i >tran$iti4n8$tate?, $tru2trur $u$trat+ ter9a)i *eruahan 24n!4rma$i
Mi$a( *eruahan m4e2u+ enim
men)i$t4r$i men9a)i entu2 entu2 tran$i$i+ $ehina menurani eneri yan )i*eru2an untu2 *enyem*urnaan rea2$i, Penurunan eneri tran$iti4n8$tate+ ta*i tan*a )i$t4r$i $u$trat+ )enan
meruah 24n)i$i )i$triu$i muatan yan era:anan )enan tran$iti4n $tate,
Pementu2an 9aur >meta4i$me? aternati#e,
@4nt4h( erea2$i
tem*4rer )enan $u$trat mementu2 ES 24m*e2$ interme)iate+ yan ta2 mun2in eran$un tan*a enim,
Penurunan *eruahan entr4*i rea2$i >H?+ )enan meni2at $u$trat 24re2$i 4rienta$i rea2$i,
A2ti#ita$ enim ternyata )i*enaruhi anya2 !a2t4r, -a2t4r8!a2t4r ter$eut menentu2an e!e2ti#ita$ 2er9a $uatu enim, A*aia !a2t4r *en)u2un ter$eut era)a *a)a 24n)i$i yan 4*timum+ ma2a 2er9a enim 9ua a2an ma2$ima, .eera*a !a2t4r yan mem*enaruhi 2er9a enim( a, Su$trat F Enim mem*unyai $*e$ita$ yan tini, A*aia $u$trat 442 )enan enim ma2a 2iner9a enim 9ua a2an 4*tima, , *H >2ea$aman? F Enim mem*unyai 2e$u2aan *a)a *H tertentu, A)a enim yan 4*tima 2er9anya *a)a 24n)i$i a$am+ namun a)a 9ua yan 4*tima *a)a 24n)i$i a$a, Namun 2eanya2an enim e2er9a 4*tima *a)a *H netra, , a2tu F a2tu 24nta2rea2$i antara enim )an $u$trat menentu2an e!e2ti#ita$ 2er9a enim, Sema2in ama :a2tu rea2$i ma2a 2er9a enim 9ua a2an $ema2in 4*timum, ), K4n$entra$i 9umah enim F K4n$entra$i enim eran)in uru$ )enan e!e2ti#ita$ 2er9a enim, Sema2in tini 24n$entra$i ma2a 2er9a enim a2an $ema2in ai2 )an e*at, e, Suhu F Se*erti 9ua *H, Semua enim mem*unyai 2i$aran $uhu 4*timum untu2 2er9anya, !, Pr4)u2 A2hir F /ea2$i enimati$ $eau meiat2an ha+ yaitu $u$trat )an *r4)u2 a2hir, Daam eera*a ha *r4)u2 a2hir ternyata )a*at menurun2an *r4)u2ti#ita$ 2er9a enim, Enim
tri*$in memii2i *H 4*timum yan 2ha$+ yaitu *H yan
menyea2an a2ti#ita$ ma2$ima, Pemeri atau *enerima *r4t4n yan *entin *a)a $i$i 2ataiti2 enim era)a )aam tin2at i4ni$a$i yan )iinin2an, *H 4*timum enim ti)a2 *eru $ama )enan *H in2unan n4rmanya+ )enan *H
yan mun2in $e)i2it era)a )iata$ atau )ia:ah *H 4*timum, A2ti#ita$ 2ataiti2 enim )i)aam $e mun2in )iatur $eaian 4eh *eruahan *a)a *H me)ium in2unan,
&ae eera*a *H 4*timum *a)a enim > Thenawiaya, Maggy. 19!" ? Enzim
-1 o-timum
Pe-sin Tri-sin Kata"ase Arinase 3umarase Rionuk"
1,5 7,7 7,6 %,7 7," 7,"
ease
Diuna2an arutan )a*ar !4$!at yaitu aar enim tri*$in teta* *a)a 24n)i$i 4*timum yaitu e2er9a $eara ma2$ima untu2 eri2atan )enan $u$trat, Di$ini tri*$in a2an e!e2ti! e2er9a *a)a *H 7,7 8 " $e$uai tem*atnya era)a yaitu )i)aam u$u$, A2ti#ita$ enim 9ua erhuunan )enan 2ea)aan i4ni2 m4e2u terutama *a)a aian *r4teinnya+ 2arena rantai *4i*e*ti)a menan)un 2e4m*4282e4m*42 yan i$a meni4n $am*ai 2e $atu tin2at yan terantun *a)a *H yan a)a, Se*erti hanya yan era2u *a)a *r4tein umumnya, Enim memii2i titi2 i$4ee2tri2 )enan muatan ea$ er$ihnya a)aah n4, *H *a)a titi2 i$4ee2tri2+ $eaian *at42an+ ere)a )enan *H *a)a :a2tu a2ti#ita$ ma2$ima, *H 4*tima yan )i*erihat2an *a)a tia* enim ere)a8e)a, Keanya2an enim men*unyai *H 4*tima antara 8"+ namun *a)a eera*a enim yan e2er9a ai2 *a)a )aerah *H yan $em*it, i2a enim )ieri *a)a *H yan e2$trim ma2a a2an ter)enatura$i, Ke*e2an enim terha)a* *eruahan $uhu meru*a2an $aah $atu $ea mena*a *enaturan *H tuuh )ia2u2an )enan $anat ermat, >Mentgomery,Rex. 1993# &@A>&ri ar4yat ai)? yan meru*a2an aen yan )a*at mem*re$i*ita$i enim aar )a*at menhenti2an re2a$i enimati2 $ehina enim men9a)i in a2ti# )an enim a2an 2ehianan !un$i 2ataiti2nya, Kemu)ian )iin2ua$i2an *a)a $uhu 350@ $e$uai $uhu tuuh yaitu *r4tein 2a$ein )itemu2an, Lau *a)a *ener9aan t0 $eteah *r4$e$ *enam*uran reaen )i)iam2an )aam e$ yaitu
aar *r4$e$ *re$i*ita$i men9a)i anar, Lau )i$entri!ua$i untu2 memi$ah2an $u*ernatan )an *eetnya, tartnya )iami untu2 )i u9i )enan met4)e an$4n, Daam *ra2ti2um ini+ 2ami mea2u2an 3 maam met4)e+ yaitu met4)e mihaei$8menten+
ine:e#eur
ur2
)an
an$4n, Ma$in
ma$in met4)e
mem*unyai *rin$i* yan ere)a, Pa)a *rin$i* *er$amaan mihaei$8menten a)aah )a$ar )ari *er$amaan 2ineti2 enim+ 2arena )ia$um$i2an ti*e rea2$inya irre#er$ie+ ma2a ti)a2 ma$aah 9i2a $atu atau eih *r4)u2 yan ter9a)i , 2emu)ian
2arena
rea2$inya
terantun
:a2tu
ma2a
i$a
)i
)i!eren$ia2an *er$amaan ini hanya era2u *a)a rea2$i irre#er$ie $atu $u$trat, Dari *er$amaan mihaei$ menten+ ter)a*at 2eterantunan antara 2ee*atan )enan 24n$entra$i $u$trat yan a2an memuat $uatu 2ur#a hi*er4i2, Per$amaan )enan nama Kineti2a Henri8Mihaei$8Menten 2emu)ian )i2eman2an eih 9auh 4eh , E, .ri$ )an , ., S, Ha)ane, Penurunan *er$amaan 2ineti2a yan )iturun2an mere2a ma$ih )iuna2an $eara meua$ $am*ai $e2aran , Saah $atu 24ntriu$i utama Henri8Mihaei$8Menten *a)a 2ineti2a enim a)aah meman)an rea2$i enim $eaai )ua taha*an, Pa)a taha* *ertama+ $utrat teri2at 2e enim $eara re#er$ie+ mementu2 24m*e2$ enim8$u$trat, K4m*e2$ ini 2a)an82a)an )i$eut $eaai 24m*e2$ Mihaei$, Enim 2emu)ian menatai$a$i rea2$i 2imia )an mee*a$2an *r4)u2,
Kur#a 2e9enuhan $uatu rea2$i enim yan menun9u22an rea$i antara 24n$entra$i $u$trat >S? )enan 2ea9uan >v ?, Enim )a*at menatai$a$i rea2$i )enan 2ea9uan mena*ai 9utaan rea2$i *er )eti2, Seaai 4nt4h+ tan*a 2eera)aan enim+ rea2$i yan )i2atai$a$i 4eh enim 4r4ti)ina 5T8!4$!at )e2ar42$ia$e a2an memeru2an :a2tu 7" 9uta tahun untu2 menuah 50 $u$trat men9a)i *r4)u2, Namun+ a*aia enim ter$eut )itamah2an+ *r4$e$ ini hanya memeru2an :a2tu 5 mii)eti2,
La9u rea2$i erantun *a)a 24n)i$i arutan )an 24n$entra$i $u$trat, K4n)i$i824n)i$i yan menyea2an )enatura$i *r4tein $e*erti tem*eratur tini+ 24n$entra$i aram yan tini+ )an niai *H yan terau tini atau terau ren)ah
a2an
menhian2an
a2ti#ita$
enim,
Se)an2an
*enin2atan
24n$entra$i $u$trat en)erun menin2at2an a2ti#ita$nya, Untu2 menentu2an 2ea9uan ma2$imum $uatu rea2$i enimati2+ 24n$entra$i $u$trat )itin2at2an $am*ai a9u *ementu2an *r4)u2 yan ter*antau men9a)i 24n$tan,
Ha ini
)itun9u22an 4eh 2ur#a 2e9enuhan )i $am*in, Ke9enuhan ter9a)i 2arena $eirin )enan menin2atnya 24n$entra$i $u$trat+ $ema2in anya2 enim ea$ yan )iuah men9a)i 24m*e2$ $u$trate8enim ES, Pa)a 2ea9uan yan ma2$imum >$ ma?+ $emua ta*a2 a2ti! enim a2an eri2atan )enan $u$trat+ )an 9umah 24m*e2$ ES a)aah $ama )enan 9umah t4ta enim yan a)a, Namun+ $ ma hanyaah $aah $atu 24n$tanta 2ineti2a enim, umah $u$trat yan )i*eru2an untu2 mena*ai niai 2ea9uan rea2$i tertentu 9uaah *entin, Ha
ini
)ie2$*re$i2an
4eh
24n$tanta Mihaei$8Menten >% m?+ yan
meru*a2an 24n$entra$i $u$trat yan )i*eru2an 4eh $uatu enim untu2 mena*ai $etenah 2ea9uan ma2$imumnya, Setia* enim memii2i niai % m yan ere)a8e)a untu2 $uatu $utrat+ )an ini )a*at menun9u22an $eera*a 2uatnya *eni2atan $u$trat 2e enim, K4n$tanta ainnya yan 9ua eruna a)aah k at+ yan meru*a2an 9umah m4e2u $u$trat yan )a*at )itanani 4eh $atu ta*a2 a2ti! *er )eti2, &ae menenai eera*a K m )ari enim Enyme
Su$trate
@hym4try*$in
%m
Aety88try*t4*hanami)e 5000
Ly$4yme
Hea8 &8aetyu4$amine
D8aat4$i)a$e
Lat4$e
&hre4nine )eamina$e @ar4ni anhy)ra$e Peniiina$e
000
&hre4nine
5000
@O
"000
.eny*eniiin
Pyru#ate ar4ya$e
50
Pyru#ate
00
H@O3 8 A&P Arinine8t/NA $yntheta$e
6
1000 60
Arinine
3
t/NA
0,
A&P
300
Pen'ekatan kinetika en(ym) *sumsi + ) Hi*4te$a pseu'ostea'ystate. Pementu2an i2atan Enim Su$trat
menaami 2e9enuhan > stea'y state ? *eruahan ESV men9a)i $anat amat >imit 0? )ian)in a9u *ementu2an PV )an *enurunan SV, Da*at )itui$ )aam *er$amaan eri2ut (
ESV a)aah $ei$ih antara a9u *ementu2an ES )i2urani a9u *enuranan ES
*sumsi ++ ) K4n$entra$i Enym 9umah EV0 ti)a2 eruah !un$i :a2tu >24n$tan?+
ini a)aah 9umah >W EV ? enym ea$ EV )an enym teri2at $u$trat ESV, Ma2a )itui$ $eaai eri2ut
[E] = [E]0 - [ES] k 1[E] [S] – [ES]( k -1+k 2) = 0 Substitusi [E] kedalam - [ES] ) k 1 [S] ( [E] persamaan (2), 0 didapat persamaan sbb: +k 2) = 0 1
k 1 [S]
[E]0 (k -1+k 2)
= k 1 [S]
– [ES](k -
[ES] - [ES]
A$um$i 2e9enuhan >$tea)y $tate? -a$e tran$ien ter9a)i 2eti2a 24n$entra$i ES ti)a2 eruah
'0 a)aah a9u rea2$i ini$ia $aat rea2$i $tart
Dan
'ma
a)aah
a9u
rea2$i
ma2$imum
Suatu ara yan ai2 untu2 mene#aua$i Km )a 'ma a)aah mem*4t )ata 2inati2 $eaai *eran)inan terai2 )ari ' )an 24n$entra$i S, P4t *eran)inan ini )ia9u2an 4eh han$ ine:ea#er )an )ean ur2, Peran)inan terai2 )ari *er$amaan mihaei$8menten )a*at )iami $eaai eri2ut ( Km 1 1 1 = + x v Vmax ⦋ S ⦌ Vmax /e$i*42a *4t ini mem*unyai 2euntunan 2arena ti)a2 *eru menu2ur ' *a)a 24n$entra$i $u$trat yan $anat tini
>$erin $uit untu2 )i)a*at $eara
e2$*erimenta? 2arena 24n$entra$i $u$trat )a*at )irama2an 2emun2inan nya )ari niai 1XSX 0, Kemu)ian met4)e an$4n yaitu a)anya *enentuan 24n$entra$i *r4)u2 yan )iha$i2an )ari rea2$i tri*$in82a$ein menuna2an $*e2tr4!4t4meter, met4)e ini ertu9uan $u*aya 9umah $u$trat i$a )i 2etahui yan )i 2atai$i$ 4eh enim, Penamahan NaOH untu2 menetra2an trate &@A yan er$i!at a$am )an )i tamah2an 9ua !4in8i4ateu yan er!un$i memeri2an :arna untu2 *emaaan a$4ran$i *a)a $*e2tr!4t4meter, K4m*4$i$i -en4 /eaent >-4in @i4ateu? • • • • • • •
Su!at Lithium+ m4n4hi)rat K4ri)a A@ID S4)ium tun$tat )ihi)rat -4$!4r ai) S4)ium m4i)at .r4m Air S*e2tr4!4t4meter meru*a2an aat yan )iuna2an untu2 menu2ur
a$4ran$i )enan ara mee:at2an ahaya )enan *an9an e4man tertentu *a)a $uatu 49e2 2aa yan )i$eut u#et, Seaian )ari ahaya a2an )i$era* )an $i$anya )ie:at2an, Niai a$4ran$i )ari ahaya yan )ie:at2an a2an $ean)in )enan 24n$entra$i arutan )aam u#et, Daam anai$i$ $*e2t4!4t4meter ter)a*at 3 )aerah *an9an e4man+ yaitu )aerah U' >008 3"0nm?+ )aerah #i$ie >3"08700nm? )an in!rare) 70083000nm?, >2h4*2ar+ 1%%0? Prin$i* 2er9a $*e2tr4!4t4metri er)a$ar2an hu2um amert eer+ ia ahaya m4n42r4mati2 meaui $uatu me)ia arutan+ ma2a $eaian )i*antu2an )an $eaian )i*anar2an, &ran$mitan$ a)aah *eran)inan inten$ita$ ahaya yan )itran$mi$i2an 2eti2a mee:ati $am*e )enan inten$ita$ ahaya mua8mua $eeum mee:ati $am*e, Pa)a *ra2ti2um ini+ yan )iuna2an a)aah $*e2tr4!4t4meter #i$ie 2arena $umer ahayanya a)aah ahaya tam*a2, Setia* $enya:a *unya $era*an ma2$ima *a)a *an9am e4man tertentu, Pan9an e4man ini )i$eut *an9an e4man ma2$imum, Pa)a *an9an e4man ma2$imum+ huunan a$4ran$i )an 24n$entra$i arutan i$a )i$etara2an, Pan9an e4man yan )iuna2an untu2 menu2ur 9umah *r4)u2 yan )iha$i2an a)aah 650nm yan artinya itu meru*a2an *an9an e4man ma2$imum )ari arutan yan )ii)enti2a$i, Pa)a ra2 ine:eu#er8ur2 yan )iha$i2an ti)a2 inier atau ti)a2 uru$ 2emun2inan e$ar 2arena anya2 !a2t4r yan ter9a)i, Diantaranya a)anya human err4r+ 2arena )ata era$a )ari 2e4m*42 yan ere)a, Kemu)ian
2arena *era2uan terha)a* enim yan ti)a2 teiti atau ti)a2 ai2, Dan 2emu)ian a)anya 2e$aahan )aam *enunaan $*e2tr4!4t4meter, *era2uan u#et haru$ enar
hati8hati
2arena
itu
tem*at ahaya meinta$ untu2
*enu2uran
24n$entra$i, .ia ter)a*at ari$ tanan *a)a aian u#et+ ma2a a2an mem*enaruhi niai 24n$entra$i,
'III.
Kesim-u"an
•
Ker9a enim )i*enaruhi 24n$entra$i $u$trat+ *H )an $uhu, &ri*$in mem*unyai *H 4*timum 7+7 F ", Met4)e *ra2ti2um 2ineti2a enim )ia2u2an 3 met4)e+ yaitu met4)e
•
mihaei$8menten+ ine:eu#er8ur2 )an met4)e an$4n, Niai a$4ran$i yan )iha$i2an )ari t0 )an t0 menun9u22an
•
*enin2atan, arna yan )iha$i2an )ari *r4)u2 rea2$i enimati$ tri*$in82a$ein a)aah
•
:arna 2ehi9auan, Pr4)u2 )ari rea2$i enim tri*$in82a$ein mem*unyai *an9an e4man
•
ma2$imum 650 nm, ra2 ine:eu#er8ur2 yan )iha$i2an )ari *ra2ti2um ini ti)a2 inier atau
• •
•
•
I. •
ti)a2 uru$, Niai 'ma +0"5 Q 1083 mm4menit Niai K m 3+07 Q 1083
Da+tar Pustaka
An4nim,
-chaums
/iokimia.
Erana;
9a2arta,
Daam
htt*(442$,44e,4,i)442$ i)KNYYSNIZ&$@[)2ineti2aBrea2$iBenim[hi)[$4ure$\na#in2$ •
• •
\$ )ia2$e$ *a)a De$emer 011, M4nt4mery+ re+ )22, 1%%3, /iokimia, a)9ah Ma)a Uni#er$ity Pre$$ ( Y4ya2arta, M,.er,eremy+ )22, E8442 .i4hemi$try $ith e)iti4n, Siman9uta2+ M,&,006, pengantar kinetik en(imatik. Uni#er$ita$ $umatera utara
)ia2$e$
htt*(re*4$it4ry,u$u,a,i)it$tream13567"%36051060056,*)! tana )e$emer 011
*a)a
•
&hena:i)9a9a+ Dr,Ir, May, 1%". 0ehninger ) asar'asar bikimia. Erana(
•
a2arta An4nim,
Dia2$e$
*a)a
Kineti2a8/ea2$i8Enim
htt*(:::,$ri),4m)456"1%La*4ran8