laporan ini berisi tentang uji beberapa enzimDeskripsi lengkap
laporan ini berisi tentang uji beberapa enzim
tFull description
Full description
Laporan praktikum biokimia
comment will be appreciated
Laporan Biokimia Enzim, Saliva, Empedu
Disusun oleh: Kelompok 1.2 Vincentia Anindha Primacintya
41140002
Patrick Kurniawan Chandra
4114000
!. !an""a #a"askara
4114001
Dessy !atnasari $ecoadi
4114001%
Vito &idianto
41140020
Amadea !i"enastiti
4114002'
$te(en $etiawan $antoso
4114002)
!ai *ana Prayasita
4114002
+essy Prilly ,mmanuella -ana
411400)
BAB I DASAR TEORI
1. /nim
/nim /nim adalah adalah protein protein yan" yan" erun erun"si "si untuk untuk memperc mempercepat epat reaksi reaksi kimia. kimia. $elama $elama reaksi reaksi erlan" erlan"sun sun"3 "3 moleku molekulm lmole olekul kul enim enim tidak tidak erua eruah3 h3 yan" yan" erarti erarti enim enim adalah katalis iolo"is. 5anpa enim3 sea"ian esar reaksi kimia akan er6alan san"at lamat. Dalam rekasi yan" men""unakan enim3 reaktan diseut den"an sustrat. 7 $il(erthorn3 2014 8 #anyak aktor yan" dapat mempen"aruhi akti(itas ker6a suatu enim. 9aktoraktor terseut antara lain pen"aruh p- dan suhu. Daerah p- optimum untuk tiaptiap enim ereda dan pada umumnya umumnya hampir hampir mendekati netral3 yaitu antara p- ' dan p- . Peruahan p- yan" mencolok menyeakan protein enim men"alami denaturas rasi
yan"
irre(e e(ersi rsile
seh sehin""a
akti(itas
enim im
men6a en6ad di
nol.
5iap enim mempunyai suhu optimum3 yaitu ketika enim terseut dapat eker6a den"an den"an aik. $emakin $emakin 6auh dari suhu optimum3 optimum3 ker6a ker6a enim semakin semakin tidak aik. Daerah atau kisaran suhu ketika ker6a atau la6u reaksi enim masih aik diseut suhu optimu optimum. m. $uhu $uhu optimu optimum m untuk untuk enim enimen enim im yan" yan" terdapat terdapat dalam dalam tuuh tuuh pada pada daerah terseut adalah %oC40oC. 7 $umard6o3 200) 8
2. $ali(a $ali(a adalah suatu produk sekresi dari kelen6ar sali(a mayoris mayoris dan kelen6ar sali(a minoris ke mulut melalui duktus duktus yan" pendek. Kelen6ar sali(a mayoris meliputi kelen6ar sulin"ual3 kelen6ar sumandiular dan kelen6ar parotis. Kelen6ar su lin"ual adalah kelen6ar sali(a yan" erada di awah lidah yan" memiliki duktus sulin"ual 7duktus erada di awah lidah8 dan kelen6ar sumandiular adalah kelen6ar sali(a yan" erada di awah mandiula yan" memiliki duktus di area mulut. $edan"kan kelen6ar parotis adalah kelen6ar sali(a yan" erada di area maksilaris yan" memiliki ductus parotid di sekitar molar kedua maksilaris. 7 5ortora3 5ortora3 200)8
. /mpedu
1
$alah satu un"si dari hati ialah menyekresikan empedu3 yan" normalnya erkisar antara %00 sampai 1000 ml;hari. /mpedu disekresikan disekresikan oleh hati dalam dua tahap3 yaitu : a. $ekresi awal oleh oleh selsel selsel un"sional un"sional utama hati3 hati3 yaitu yaitu sel hepatosit. hepatosit. $ekresi $ekresi awal ini men"andun" se6umlah esar asam empedu3 kolesterol3 dan at or"anik lainnya. /mpedu ini disekresikan ke dalam kanalikulus ilaris kecil yan" terletak di antara selsel hati. . $ekresi kedua men"alir di dalam kanalikulus menu6u septa interloularis3 tempat kanalikulis men"oson"kan empedu ke dalam duktus yan" leih esar. Akhirnya mencapai duktus hepaticus dan duktus ilaris komunis. Dalam per6alanannya sekresi hati ini ditamahkan ke dalam sekresi pertama. $ekresi tamahan ini erupa larutan encer ionion natriun dan ikaronat yan" disekresikan oleh sel epitel sekretoris yan" men"elilin"i duktulis dan duktus. Dari sini3 empedu lan"sun" dikeluarkan ke duodenum3 atau dalam eerapa menit atau 6am3 akan dialihkan ke kantun" empedu empedu melalui duktus sistikus 7
BAB II PERSIAPAN PRAKTIKUM
1. Perco erco aan aan /ni /nim m
2
Alat dan #ahan:
5aun" reaksi &aterath Kertas sarin" Porselin plate Vorte= 9enol merah >arutan -Cl Asam cuka a. Perc Perco oaa aan n Amila milase se
Cara Ker6a ema emasu sukk kkan an ml larut larutan an amil amilum um 1B matan matan" " 7ta 7taun un" " 1 dan dan 283 283 memasukkan ml larutan amilum 1B se"ar 7 taun" dan 48. emasukkan ml sali(a sarin" 7taun" 1 dan 83 memasukkan ml -2 7taun" 2 dan 48. enamahkan 1 ml -Cl 1* 7taun" 1 dan 8. en"aduk den"an (orte= hin""a rata. emasukkan 1 tetes larutan dari setiap taun" ke porselin plate dan masin"masin" dieri 1 tetes iodium. en"amati dan mencatat apa yan" ter6adi. eletak eletakkan kan taun" taun" seri A dalam suhu suhu kamar3 kamar3 taun" taun" seri # pada pada o wadah wadah erisi erisi on kahan kahan es3 dan taun taun seri C ada water waterath ath C.
$etiap 10 menit3 melakukan cara ker6a nomor ' sampai salah satu tetesan larutan erwarna seperti iodium. . Percoaan ?rease Cara Ker6a a. . c. d. e.
Dua uah uah taun"3 taun"3 taun" taun" 1 diisi diisi 2 cc larutan larutan ureum3 ureum3 taun" taun" 2 diisi diisi 2 cc a@uades. a@uades. asin" masin" taun" dieri 1 tetes enol red. Kemudian Kemudian ditamah ditamahkan kan 2B asam asetat asetat sampai sampai eruah eruah warna warna men6adi men6adi kunin" kunin".. >alu dipanask dipanaskan an pada penan" penan"as as air pada pada suhu %0 %0 dera6at C selama 4 menit. menit. Kemudian Kemudian didin"in didin"inkan3 kan3 setelah setelah din"in din"in di tamahkan tamahkan tepun" tepun" kedelai. kedelai.
3
2. Perc Perco oaa aan n $ali $ali(a (a Alat dan #ahan
$ali(a seanyak 20 ml >arutan molisch >arutan iuret Asam asetat encer Kertas sarin" -2$4 pekat 5aun" reaksi p- meter Pipet tetes Pipet ukur
Cara Ker6a 1. $arin" $arin" sali sali(a (a men"u men"unak nakan an kertas kertas sarin sarin". ". 2. ?kur p- air liur men"" men""unakan unakan p- meter meter dan dan catat p- awal. awal. . 5aun" 5aun" reaksi disiapka disiapkan n seanyak seanyak 2 uah dan dieri dieri lael3 lael3 kemudian kemudian masukan 2 ml sali(a pada amsin" masin" taun" reaksi. 4. Pada taun" taun" A ditamahkan ditamahkan ' tetes tetes larutan iuret iuret dan dicampu dicampurr perlahan kemudian diamati peruahan warnanya. '. 5aun" 5aun" # ditamahka ditamahkan n ' tetes larutan larutan molisch molisch da da ncampur ncampur perlahan perlahan kemudian ditamahkan 2 ml - 2$4 pekat secara perlahan melalui dindin" taun"3 dan amati peruahan yan" ter6adi. %. asukan asukan sali(a sali(a ke taun" taun" reaksi reaksi yan" yan" ereda ereda seanyak seanyak 2 ml. Dan Dan tamahkan 2 tetes asam asetat encer. Campur rata den"an (orte=3 perhatikan den"an endapan yan" terentuk. . Perc Perco oaa aan n /mpe /mpedu du a8 ?6i
>arutan /mpedu /ncer >arutan Asam *itrat 7-*8 Pekat 5aun" !eaksi Pipet Volumetrik
4
Cara Ker6a : -
$iapkan taun" reaksi kemudian masukkan ml -* pekat ke dalam taun"
-
reaksi. irin"kan taun" reaksi3 lalu den"an pipet alirkan secara hati hati ml larutan empedu encer melalui dindin" taun" sehin""a kedua larutan terseut tidak
ercampur. Perhatikan warna yan" terentuk pada peratasan antara kedua cairan. 8 ?6i Pettenkoer Alat dan #ahan :
>arutan empedu encer >arutan sukrosa 'B Asam sulat 7-2$48 dalam euret 5aun" reaksi Pipet (olumetrik Pipet tetes
Cara Ker6a 1. 5aun" 5aun" reaksi reaksi disiapka disiapkan n dan dimasukk dimasukkan an ' ml larutan larutan empedu empedu encer encer ke dalam taun" reaksi. 2. 5amah amahkan kan ' tetes tetes larut larutan an sukro sukrosa sa . irin"kan irin"kan taun" taun" reaksi reaksi lalu alirkan alirkan den"an den"an hati hati hati ml asam sulat sulat pekat pekat melalui dindin" taun" sehin""a terentuk 2 lapisan cairan. 4. Perhatikan Perhatikan cincin cincin yan" yan" terentu terentuk k pada peratasan peratasan antara antara kedua kedua lapisan. lapisan. c8 ?6i 9un"si 9un"si /mp /mpedu edu $ea $ea"ai "ai /mul /mul"at "ator or Alat dan #ahan:
>an"kah Percoaan: $iapkan taun" reaksi yan" telah dieri lael taun" A dan taun" #. 1. 5uan"k 5uan"kan an ml a@uades a@uades pada pada taun" A dan ml cairan cairan empedu empedu encer pada pada taun" taun" #. 2. 5eteskan 5eteskan 1 tetes tetes minyak minyak "oren" men"" men""unakan unakan pipet pipet tetes ke taun" taun" A dan taun" #. . Kocok Kocok dan amati peruahan peruahan yan" dialami dialami oleh oleh minyak. minyak.
BAB III ASIL PRAKTIKUM
A. /nim a. Perc Perco oaa aan n Amila milase se 5aun" reaksi A No #$
Kunin" kehi6auan tidak ada endapan warna sudah menyerupai atau mendekati warna larutan iodium.
. Percoaan ?rease 1. $aat taun" 13 yan" erisi larutan ureum diteteskan den"an 1 tetes phenol red3 kemudian larutan ureum eruah warna men6adi merah. 2. $aat taun" 2 yan" erisi a@uades diteteskan den"an 1 tetes phenol red3 kemudian a@udes eruah warna men6adi kunin". . $aat kedua taun" di diteteskan den"an ti"a tetes asam asetat3 kemudian taun" 1 7larutan ureum8 eruah warna men6adi kunin" dan taun" 2 7a@uades8 tetap erwarna kunin". 4. $etelah dipanaskan3 kedua larutan terseut tidak men"alami peruahan warna yaitu tetap erwarna kunin". '. $etelah dipanaskan dan didin"inkan selama eerapa saat3 kedua taun" dierikan sedikit tepun" kedelai. #eerapa saat setelah tepun" kedelai dierikan3 taun" 1 7larutan ureum8 kemali eruah warna men6adi warna merah3 sedan"kan taun" 2 7a@uades8 tetap erwarna kunin". #. $ali(a Dari hasil praktikum sali(a den"an larutan molisch dan asam sulat ini dihasilkan 4 warna cairan ereda pada taun" reaksi. Eaitu warna coklat3 warna un"u3 un"u3 warna hi6au dan enin". Pada warna un"u ini menandai ahwa sali(a proandus men"andun" men"andun" karohidrat. 7warna un"u diantara hi6au dan coklat8 C. /mpedu a8 ?6i
warna3 yaitu : hi6au3 un"u3 dan enin". Pada a"ian atas erwarna hi6au3 pada a"ian awah erwarna enin". Dan diantara kedua warna terseut ada warna un"u yan" terlihat pekat.
cincin. &arna &a rna cairan yan" atas ata s adalah hi6au dan yan" awah adalah enin"3 serta kedua
warna terseut diatasi oleh cincin yan" erwarna un"u. c8 ?6i 9un" 9un"si si /mped /mpedu u $ea"a $ea"aii /mul"a /mul"ator tor
Pada taun" A yan" yan" erisi a@uades den"an minyak3 minyak tidak ercampur den"an air3 namun tidak terlalu terlihat.
Pada taun" # yan" erisi cairan empedu encer den"an minyak3 minyak teremulsi sea"ian3 namun masih ada a"ian yan" tidak teremulsi. BAB I( PEMBAASAN
A. /nim a. Perc Perco oaa aan n Ami Amila lase se Pada pecoaan ini men""unakan dua macam amilum yan" ereda3 yaitu amilum matan" 7setiap seri taun" nomer 1 dan 28 dan amilum se"ar 7setiap seri taun" taun" nomer nomer dan 48. Pada Pada amilum amilum matan" matan" seelu seelumny mnyaa sudah sudah dierik dierikan an perlakuan den"an pemanasan3 hal ini akan erpen"aruh mempercepat proses hidrolisis amilum. $etelah itu pada setiap seri taun" nomer 1 dan ditamahkan sail(a yan" men"andun" men"andun" amilase untuk mencerna mencerna amilum sedan"kan sedan"kan pada setiap seri taun" nomer 2 dan 4 ditamahkan a@uades. Kemudian untuk setiap seri taun" nomer 1 dan ditamahkan -Cl yan" yan" er erun un"s "sii untu untuk k mem memeri erika kan n suas suasan anaa asam asam pada pada amilu amilum m sehin sehin"" ""aa memun"kinkan amilase eker6a leih optimal pada p- %3 30. Pen"am Pen"amatan atan mulai mulai erlan" erlan"sun sun" " pada pada menit menit ke 0 den"an den"an menete meneteskan skan yodiu yodium m yan" yan" ertu6 ertu6uan uan untuk untuk meliha melihatt entuk entuk perua peruahan han dari dari polisa polisakari karida da men6ad men6adii monosak monosakarid aridaa dilihat dilihat dari dari perua peruahan han warnan warnanya ya 7prose 7prosess hidrol hidrolisi isiss amilum8. $elan6utnya memerikan perlakuan yan" ereda untuk seri A 7suhu ruan ruan"a "an8 n833 # 7on 7on"k "kah ahan an es8 dan dan C 7wat 7water erath ath8. 8. Per Pered edaan aan perla perlaku kuan an ini ini ertu6uan untuk melihat suhu yan" yan" palin" optimal eker6a untuk enim amilase.
8
!eaksi percoaan Amilum : Amilum F
-Cl
Dekstrin F /ritrodekstrin F Akrodekstrin F altosa F
un"u un"u kehi kehita tam man3 an3
kare karena na
amil amilum um
erc erca aan an" "
mementuk spinal men"elilin"i molekul , 2 dan molekul pati83 dekstrin 7erwarna un"u un"u kehitam kehitaman8 an833 eritro eritrode= de=tri trin n 7erwa 7erwarna rna coklat coklat keun" keun"uan uan83 83 akrode akrodekst kstrin rin erwarna kunin" enin"83
maltosa 7erwarna enin"83 "lukosa 7erwarna
enin"8. &a &arnawarna rnawarna terseut diseakan oleh adanya kandun"an amilosa rantai pan6an" semakin lama dipanaskan kemampuan men"ikat warna melemah. #erdas #erdasark arkan an perco percoaan aan yan" yan" telah telah dilaku dilakukan kan33 terukt teruktii ahwa ahwa taun" taun" erlael nomor 1 dan yan" dieri larutan lar utan -Cl den"an p- %3 30 leih cepat terhidrolisis. -al ini diseakan karena enim dapat erakti(itas secara optimal pada p- ' . >arutan dari taun" lain leih lamat terhidrolisis karena pterlalu terlalu rendah rendah menye menyeak akan an enim enim eker6a eker6a secara secara tidak tidak optima optimall dan terlalu terlalu tin""i yan" menyeakan denaturasi protein. Dari Dari sisi sisi perla perlaku kuan an33 taun taun" " erl erla ael el C yan" yan" dima dimasuk sukka kan n ke dalam dalam waterath terukti leih cepat terhidrolisis yaitu antara menit ke 20 dan 0. enu enuru rutt teor teori3 i3 eni enim m era erakt kti( i(it itas as seca secara ra opti optima mall anta antara ra suhu suhu %o40oC. &aterath yan" memiliki suhu o memuat enim eker6a secara optimal dan cepat cepat terhid terhidrol rolisi isis. s. Pada Pada taun" taun" erlae erlaell A3 hidrol hidrolisis isis er6ala er6alan n lamat. lamat. Pada Pada taun" erlael # seharusnya elum ter6adi hidrolis3 tetapi pada percoaan ini terdapat terdapat satu taun" reaksi yan" sudah terhidrolisis. terhidrolisis. -al ini diseakan karena
9
suhu suhu ice o= yan" yan" kuran kuran" " ter6a"a ter6a"a sehin" sehin""a "a menye menyea akan kan menyer menyerupa upaii suhu suhu ruan"an. Dari sisi peredaan amilum matan" dan se"ar pada3 taun" erlael C nomor 1 dan terhidrolisis pada waktu yan" ersamaan antara menit ke 200. $eharusnya amilum matan" leih cepat terhidrolisis3 namun seelum di"unakan amilum tidak dilakukan pen"adukan sehin""a terhidrolisis ersamaan. . Percoaan ?rease $etelah melakukan percoaan ini3 dapat dilihat siatsiat dari enim urease3 yaitu /nim urease eker6a secara optimum pada lin"kun"an yan" a"ak asa asa 7p- .48 dan den"an suhu optimum %0 dera6at Celcius. >arutan yan" ersiat asam atau normal akan eruah warna men6adi kunin" saat ditetesi oleh phenol red3 sedan"kan larutan yan" ersiat asa atau a"ak asa akan eruah warna men6adi merah. >alu setelah dilakukan penamahan asam asetat pada kedua larutan terseut3 maka kedua taun" akan eruah warna men6adi kunin". -al ini diakiatkan karena larutan pada kedua taun" 7a@uades dan larutan ureum8 ersiat asam. $etelah itu kedua taun" dipanaskan pada suhu %0 dera6at Celcius. $uhu %0 dera6at Celcius merupakan suhu optimum atau suhu suhu ideal ideal a"i a"i larutan larutan urease. urease. $etelah $etelah itu3 itu3 kedua kedua larutan larutan dierik dierikan an sedikit sedikit tepun" tepun" kedelai. Pada taun" 2 7a@uades8 larutan akan tetap erwarna kunin"3 sedan"kan pada taun" 1 7larutan ureum8 larutan akan eruah men6adi warna merah kemali. -al ini ter6adi karena kedelai 6u"a men"andun" urease3 yaitu suatu enim yan" erperan untuk men"hidrolisis urea men6adi amoniak dan C2.
!eaksi kimia yan" ter6adi ialah C7*-282 G -2 G urease H 2*-7"8 G C27"8 $enyawa amonia yan" dihasilkan ersiat asa3sehin""a p- larutan men6adi naik.
#. $ali(a Protein tersusun dari era"ai asam amino yan" terikat satu sama lain. Ketika direak direaksika sikan n den"an den"an rea"en rea"en iuret iuret maka3 maka3 Cu2 ini ini akan akan eri erikat katan an den" den"an an C karonil den"an satu atom * pada pan"kal asam amino sehin""a terentuklah kompleks erwarna un"u. $epeti "amar di awah ini :
10
7Pud6iadi 200)3 )'8 ?6i iuret pada air liur merupakan merupakan u6i yan" dilakukan dilakukan untuk mn"etahui adanya adanya protein dalam air liur. ?6i iuret ini khas untuk men"etahui ikatan yan "ada pada protein. -al ini karena men"andun" amilase yan" merupakan suatu protein3 dan musin yan" merupakan suatu "likoprotein dan senyawa senyawa protein lainnya yan" 6u"a termasuk dalam air liur. Dalam pen"u6ian kali ini didapatkan hasil warna larutan yan" eruah men6adi un"u. un"u. -al ini menandakan menandakan air liur sample men"andun men"andun" " protein protein yan" dapat erupa erupa enim amilase maupun maupun "likoprotein "likoprotein yan" terkandun" di musin. Pada Pada u6i u6i molis molisch ch any anyak ak di"u di"una naka kan n untu untuk k men" men"eta etahu huii ada ada atau atau tida tidakn knya ya kandun"an karohidrat di dalam sali(a. $ali(a yan" erwarna enin" ditamah den"an molisch terentuk ercak coklat kehitamhitaman kemudian ditamah den"an asam sulat3 terentuk 4 lapisan3 yaitu enin"3 hi6au3 un"u dan coklat. Disini terdapat cincin den"an warna un"u pada lapisan ke . !eaksi molisch ini menun6ukan reaksi yan" positi men"andun" karohidrat den"an terentuknya cincin erwarna un"u pada taun" reaksi kita.
11
Air liur yan" ditamahkan asam asetat encer pada u6i presipitasi men"hasilkan larutan larutan yan" seperti "el pada dasar taun" reaksi. -al ini ter6adi karena karena adanya koa"ulasi dari molekul molekul yan" erupa protein. isalnya enim amilase yan" terkandun" pada air liur. Dimana protein pada penamahan asam akan menyeakan ter6adinya koa"ulasi. C. /mpedu a. ?6i
12
minyak sehin""a tidak terlalu kelihatan3 yan" seharusnya air dan minyak terliha terlihatt tidak tidak ercam ercampur pur karena karena minyak minyak tidak tidak teremul teremulsi si dan tidak tidak dapat dapat menyatu den"an air.
BAB ( KESIMPULAN
A. /nim a. Perc Perco oaa aan n Amila milase se
13
Peruahan warna pada taun" seri C 7 waterath 8 leih cepat ter6adi karena
mendapat perlakuan pada suhu yan" optimal 7 oC 8 Peruahan warna tidak ter6adi pada taun" seri # 7 on"kahan es 8 karena
enim tidak isa eker6a secara optimal. Peruahan warna pada amilum matan" leih cepat daripada amilum se"ar
karena seelumnya telah dipanaskan. -Cl memerikan p- yan" optimal untuk enim amilase. . Percoaan ?rease Dari percoaan urease3 dapat disimpulkan ahwa tin"kat keasaman dan suhu suatu larutan akan san"at erpen"aruh terhadap ker6a enim. $eperti enim urease yan" memerlukan lin"kun"an yan" a"ak asa dan suhu %0 dera6at celcius untuk dapat eker6a secara optimum. #. $ali(a $ali(a memiliki kandun"an enim yan" erun"si untuk memecahkan partikel makanan yan" masuk ke ron""a mulut 7amilum dipecahkan men6adi maltosa83 men6a"a kesehatan mulut den"an kandun"an lioim3 serta men"andun" mukus
yan" erun"si untuk melumasi makanan dan ron""a mulut. $ali(a den"an larutan molisch dan - 2$4 mendapatkan hasil cincin erwarna
un"u3 menandakan ahwa ada kandun"an karohidrat di sali(a proandus. C. /mpedu a. ?6i