MAKALAH BIOKIMIA “Perhitungan Mikroba dengan Cara Drop Plate”
Disusun Oleh : Kelopok !" Mukharoah #ka $ingt%as
&'!()(!!*(+((+','(!* A-
Ia Anshori
&'!()(!!*(+((+),'(!* A-
Puput Martabet
&'!()(!!*(+((+*,'(!* A-
P.D III /eknik /eknik Kiia 0akultas/eknik 0akultas/eknik 1ni2ersitas Diponegoro '(!3
Da4tar Isi Pendahuluan
)
Latar Belakang
)
5uusan Masalah
*
/u6uan Pebahasan
*
Pebahasan
3
Penutup
"
Kesipulan
"
.aran
"
Da4tar Pustaka
7
2
BAB I P#$DAH1L1A$ !8! LA/A5 B#LAKA$9
Berbagai ikroba patogen sering kali ditularkan elalui air %ang terear sehingga enibulkan pen%akit ba;aan anusia atau he;an8Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian engenai adan%a ikroba dala suatu akanan atau inuan agar dapat dikonsusi anusia dengan la%ak sehingga tidak enibulkan pen%akit akibat kontainasi ikroba dala akanan dan inuan dan dapat eenuhi kebutuhan tubuh seara optial8 Analisis kuantitati4 ikro biologi pada bahan pangan penting dilakukan untuk engetahui utu bahan pangan dan enghitung proses penga;etan %ang akan diterapkan pada bahan pangan tersebut8 .alah satun%a dengan ara Angka Lempeng Total. Angka Lepeng /otal adalah salah satu ara untuk enghitung earan ikroba< diana ara ini erupakan bagian dari etode hitung a;an8 Prinsip pada etode hitung a;an adalah 6ika sel 6asad renik %ang asih hidup ditubuhkan pada ediu agar< aka sel 6asad renik tersebut akan berkebang biak ebentuk koloni dan dapat dilihat langsung dengan ata tanpa bantuan ikroskop8
Metode hitungan a;an erupakan ara %ang paling sensiti4 untuk enentukan 6ulah 6asad renik karena beberapa hal %aitu: !8 Han%asel %ang asih hidup %ang dihitung8 '8 Beberapa 6enis 6asad renik dapat dihitung sekaligus8
3
)8 Dapat digunakan untuk isolasi dan identi4ikasi 6asad renik karena koloni %ang terbentuk ungkin berasal dari suatu 6asad renik %ang epun%ai penapakan pertubuhan spesi4ik8 .elain keuntungan=keuntungan tersebut< etode hitungan a;an 6uga epun%ai keleahan=keleahan sebagai berikut : !8 Hasil perhitungan tidak enun6ukkan 6ulah sel %ang sebenarn%a< karena beberapa sel %ang berdekatan ungkin ebentuk satu koloni8 '8 Mediu dan kondisi inkubasi %ang berbeda ungkin enghasilkan nilai %ang berbeda8 )8 >asad renik %ang ditubuhkan harus dapat tubuh pada ediu padat dan ebentuk koloni %ang kopak dan 6elas< tidak en%ebar8 *8 Meerlukan persiapan dan ;aktu inkubasi relati4 laa sehingga pertubuhan koloni dapat dihitung8 Penentuan Angka Lepeng /otal dapat dilakukan dengan dua ara< %aitu etode a;an agar tuang &Drop Plate- dan etode a;an agar sebar &.pread Plate-8 Metode Drop Plate %aitu enanakan ontoh , sapel kedala a;an petri terlebih dahulu keudian ditabahkan edia agar8Metode .pread Plate %aitu dengan enuangkan terlebih dahulu edia agar kedala a;an petri keudian sapel , ontoh diratakan pada perukaan agar dengan enggunakan batang gelas bengkok8
!8'8 51M1.A$ MA.ALAH
!8 Apa %ang diaksud dengan Metode Drop Plate? '8 Bagaian ara ker6a Metode Drop Plate?
4
)8 Apa kelebihan dan kekurangan Metode Drop Plate?
!8)8 /1>1A$ P#MBAHA.A$ !8 Mengerti apa itu Metode Drop Plate8 '8 Meahai ara ker6a dari Metode Drop Plate8 )8 Mengetahui kelebihan dan kekurangan Metode Drop Pla BAB II P#MBAHA.A$
'8! P#$9#5/IA$ M#/OD# D5OP PLA/#
Metode Drop Plate , a;an tuang %aitu enanakan ontoh , sapel kedala a;an petri terlebih dahulu keudian ditabahkan edia agar8 Metode ini dilakukan dengan enapurkan sapel pada edia padat %ang endukung pertubuhan ikro organise< keudian enginkubasi plate sehingga setiap bakteri dapat ebelah dan ebentuk koloni8
'8' CA5A K#5>A M#/OD# D5OP PLA/#
!-
Pengener anikroba
5
/u6uan dari pengeneran %aitu eperkeil atau engurangi 6ulah ikroba %ang tersuspensi dala
airan8Penentuan
besarn%a
atau ban%akn%a tingkat
pengeneran tergantung kepada perkiraan 6ulah ikroba dala sapel8Digunakan perbandingan! : 7 untuk sapel dan pengeneran pertaa dan selan6utn%a< sehingga pengeneran berikutn%a engandung !,!( sel ikro organis dari pengeneran sebelun%a8 Cara Kerja :
a8 .apel %ang engandung bakteri diasukan kedala tabung pengeneran pertaa &!,!(
atau !(=!- seara aseptis &dari preparasi suspensi-8
Perbandingan berat sapel dengan 2olue tabung pertaa adalah! : 7 dan ingat akuades %ang digunakan 6ika eakai teknik rinse dan s;ab sudah terasuk pengener !(=!8 .etelah sapel asuk lalu dilarutkan dengan engookn%a8 b8 Diabil ! l dari tabung !(=! dengan pipet ukur keudian dipindahkan ketabung !(=' seara aseptis keudian dikook dengan ebenturkan tabung ketelapak tangan sapai hoogen8 Peindahan dilan6utkan hingga tabung pengeneran terakhir dengan ara %ang saa< hal %ang perlu diingat bah;a pipet ukur %ang digunakan harus selalu diganti< artin%a setiap tingkat pengeneran digunakan pipet ukur steril %ang berbeda , baru8 Prinsipn%a
6
bah;a pipet tidak perlu diganti 6ika eindahkan airan dari suber %ang saa8 '-
Penanaan Mikroba
Agar %ang belu padat &@*3oC- untuk dituang bersaa suspense bakteri kedala a;an petri lalu keudian dihoogenkan dan dibiarkan eadat8Hal ini akan en%ebarkan sel=sel bakteri tidak han%a pada perukaan agar sa6a elainkan sel terenda agar &di dala agar- sehingga terdapat sel %ang tubuh diperukaan agar %ang ka%a O' dan ada %ang tubuh di dala agar %ang tidak ban%ak begitu ban%ak engandung oksigen8 Adapun prosedur ker6a %ang dilakukan adalah sebagai berikut : a8
.iapkan a;an steril< tabung pengeneran %ang akan ditana dan edia padat %ang asih air &@*3oC-
b8 /eteskan ! l seara aseptis8suspensi sel kedala a;an kosong 8 /uangkan edia %ang asih air kea;an keudian putar a;an untuk enghoogenkan suspense bakteri dan edia< keudian di inkubasi8 Alasan diteteskann%a bakteri seban%ak ! l untuk pour plate karena pour plate ebutuhkan ruang %ang lebih luas untuk pen%ebarann%a sehingga diberikan lebih ban%ak dari pada spread plate8
'8) K#L#BIHA$ M#/OD# D5OP PLA/#
7
!8 Han%a sel %ang asih hidup %ang dihitung8 '8 Beberapa 6enis 6asadrenik dapat dihitung sekaligus8 )8 /idak eerlukan ketrapilan %ang tinggi , udah dilakukan8 '8* K#K15A$9A$ M#/OD# D5OP PLA/# !8 aktu %ang dibutuhkan laa untuk inkubasi dan persiapan8 '8 Meerlukan ban%ak bahan )8 Hasil perhitungan tidak enun6ukkan 6ulah sel %ang sebenarn%a< karena beberapa sel %ang berdekatan ungkin ebentuk satu koloni8 *8 Mediu dan kondisi inkubasi %ang berbeda ungkin enghasilkan nilai %ang berbeda8 38 >asad renik %ang ditubuhkan harus dapat tubuh pada ediu padat dan ebentuk koloni %ang kopak dan 6elas< tidak en%ebar BAB III P#$1/1P
)8! K#.IMP1LA$ Dapat disipulkan dari ateri %ang dibahas bah;a perhitungan earan ikroba dengan Angka Lepeng /otal eiliki dua etode8aitu Metode .pread Plate dan Metode Drop Plate , Ca;an /uang8Diana Metode a;an tuang adalah suatu etode %ang dilakukan untuk enghitung earan ikroba %ang han%a dapat hidup pada ediu padat8Menanakan ontoh , sapel kedala a;an petri terlebih dahulu keudian ditabahkan edia agar8 Metode ini dilakukan dengan enapurkan sapel pada edia
8
padat %ang endukung pertubuhan ikro organise< keudian enginkubasi plate sehingga setiap bakteri dapat ebelah dan ebentuk koloni8
)8' .A5A$ Dala pebuatan akalah ini seharusn%a disertakan dengan praktiku untuk peeriksaan 6ulah ikroba dan angka lepeng total untuk eperkuat teori %ang sudah didapat dari berbagai suber8
9
DA0/A5 P1./AKA .ur%a8'(!'8de4inisi=prinsip=kelebihan=dan=kekurangan=etode=a;an=tuang8http:,,suka= suka=sur%a8blogspot8o,'(!',!(,de4inisi=prinsip=kelebihan=dan8htl8Diakses pada () April '(!3 pukul !3:'" IB8 $iketutsari8'(!'8 bab="=analisis=kuantitati4=ikrobiologi=pada=libah= padat8https:,,niketutsari8;ordpress8o,'(!',(3,!*,=bab="=analisis=kuantitati4=ikro biologi=pada=libah=padat,8 Diakses pada ( April '(!3 pukul '':*7 IB8
10