PEMBUATAN MEDIUM
BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Untuk menelaah mikroorganisme di laboratorium, kita harus dapat menumbuhkan mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami
atau
dengan
bantuan
man manusia. ia.
Mikro ikroo organisme
yang
dikembangkan oleh manusia diantaranya melalui substrat yang disebut media. Untuk melakukan hal ini, haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien yang yang diisya diisyarat ratkan kan oleh oleh bakte bakteri ri dan dan juga juga macam macam lingku lingkunga ngan n fisik fisik yang yang menyediakan kondisi optimum bagi pertumbuhannya. Mikroorganisme yang kita isolasi harus kita ketahui jenis medium yang disukai sehingga dapat tumbuh dengan baik pada media. Dalam hal ini medium medium ini akan akan diguna digunaka kan n oleh oleh mikroo mikroorga rganis nisme me sebag sebagai ai sumbe sumber r energi energi untuk untuk melaku melakuka kan n pertumb pertumbuha uhan n dan perkem perkemban bangbi gbiak akan an maka maka hendaknya harus sesuai dengan komposisi bahan medium. Berdasarkan hal tersebut di atas maka dilakukanlah praktikum ini untuk mempelajari macam- macam medium, cara- cara pembuatan dari bebe bebera rapa pa medi medium um dan dan seka sekalig ligus us meng menget etah ahui ui baha bahann- baha bahan n yang yang digu diguna naka kan n serta serta kompo komposi sisi si juga juga fung fungsi si dari dari masi masing ng-- masi masing ng baha bahan n ters terseb ebut ut
dala dalam m
memb memban antu tu
pert pertum umbu buha han n
mikr mikroo oorg rgan anis isme me
terse tersebu but. t.
Sehingga Sehingga nantinya nantinya diharapka diharapkan n dapat dapat menumbuhk menumbuhkan, an, mengisola mengisolasi si dan menguji sifat fisiologi atau perhitungan mikroorganisme tertentu. B. Rumusan Masalah
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
1.
Bagaimana Bagaimana cara pembuata pembuatan n cara pembuatan pembuatan medium medium sintetik sintetik dan
nonsintetik? 2. Bagaim gaima ana
cara cara
perh perhit itu unga ngan
baha ahan
med medium ium
sint sinte etik tik
dan dan
nonsintetik? C. Makdud Percobaan Untuk mengetahui cara pembuatan medium serta mengatahui cara perhitungan bahan pembuatan medium sintetik dan nonsintetik D. Tujuan Percobaan 1.
Untuk mengetahui cara pembuatan NA (Nutrien Agar), PDA (Potato
Dekstrosa Agar), TEA (Tauge Ekstrak Agar),NB (Nutrien Borth) dan PDB (Potato Dekstrosa Borth). 2. Untuk Untuk mengetahu mengetahuii perhitung perhitungan an masing-masing masing-masing medium medium E. Manfaat Percobaan Dengan adanya praktikum ini mahasiswa dapat mengetahui cara pembuata pembuatan n medium medium dan perhitungan perhitungan medium NA (Nutrien Agar), Agar), PDA (Potato Dekstrosa Agar), TEA (Tauge Ekstrak Agar),NB (Nutrien Borth) dan PDB (Potato Dekstrosa Borth). Dan mensterilkan medium.
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
F. Kerangka Pikir Mikroorganisme
Nutrisi pertumbuhan
Sumber karbon, nitrogen
bakteri dan jamur
karbohidrat dan protein
medium
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
BAB II KAJIAN PUSTAKA A. Teori Umum Mikroorganisme adalah makhluk hidup
yang memeliharanya
dibutuhkan medium yang harus mengandung semua zat yang diperlukan untuk pertumbuhannya, antara lain senyawa-senyawa organik protein, karbohidrat, lemak, mineral dan vitamin ( Rusli, 2007) Mikroorganisme sangat erat kaitannya dengan kehidupan kita, beberapa diantaranya bermanfaat dan tang lainnya merugikan. Dalam penelitian tentang mikroorganisme yang mungkin menjadi penyebab berbagai penyakit, Robert Koch dan rekan-rekannya mengembangkan beberapa prosedur laboratorium yang mempunyai dampak luar biasa terhadap perkembangan mikrobiologi. Hal ini mencakup prosedur untuk mewarnai bakteri agar mudah memeriksanya (mudah diamati) dan teknik untuk membiakkan (menumbuhkan) mikroba dilaboratorium. Uatu teknik yang dikembangkannya adalah penggunaan media, suatu substrat untuk menumbuhkan bakteri, yang menjadi padat dan tetap tembus pandang pada suhu inkubasi (suhu yang cocok untuk pertumbuhan). (Pelczar, 2006). Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri
dari
campuran
zat-zat
makanan
(nutrisi)
yang
diperlukan
mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
komponen sel. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Indra, 2008). Akan tetapi yang terpenting medium harus mengandung nutrien yang merupakan substansi dengan berat molekul rendah dan mudah larut dalam air. Nutrien ini adalah degradasi dari nutrien dengan molekul yang kompleks. Nutrien dalam medium harus memenuhi kebutuhan dasar makhluk hidup, yang meliputi air, karbon, energi, mineral dan faktor tumbuh (Label, 2008). Media agar memisahkan
merupakan substrat yang sangat baik untuk
campuran
mikroorganisme
sehingga
masing-
masing
jenisnya menjadi terpisah. Teknik yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme pada media agar memungkinkannya tumbuh dengan agak berjauhan
dari sesamanya, juga memungkinkan setiap selnya
berhimpun membentuk koloni, sekelompok massa sel yang dapat dilihat dengan mata langsung. Semua sel dalam koloni itu sama; dianggap semuanya itu meruakan keturunan (progeni) satu mikroorganisme dan karena
itu
mawakili
apa
yang
disebut
mikrobiologiwan
biakan
murni(Pelczar, 2006) .
Adapun macam-macam media Pertumbuhan antara lain (Indra, 2008) :
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
1. Medium berdasarkan sifat fisik a.
Medium padat yaitu media yang mengandung agar 15% sehingga setelah dingin media menjadi padat..
b.
Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar 0,30,4% sehingga menjadi sedikit kenyal, tidak padat, tidak begitu cair. Media semi solid dibuat dengan tujuan supaya pertumbuhan mikroba dapat menyebar ke seluruh media tetapi tidak mengalami percampuran sempurna jika tergoyang. Misalnya bakteri yang tumbuh pada media NfB (Nitrogen free Bromthymol Blue) semisolid
akan membentuk
cincin hijau
kebiruan dibawah
permukaan media, jika media ini cair maka cincin ini dapat dengan mudah
hancur.
Semisolid
juga
bertujuan
untuk
mencegah/menekan difusi oksigen, misalnya pada media Nitrate Broth, kondisi anaerob
atau sedikit
oksigen
meningkatkan
metabolisme nitrat tetapi bakteri ini juga diharuskan tumbuh merata diseluruh media. c.
Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar, contohnya adalah NB (Nutrient Broth), LB (Lactose Broth).
2.
Medium berdasarkan komposisi
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
a.
Medium sintesis yaitu media yang komposisi zat kimianya
diketahui jenis dan takarannya secara pasti, misalnya Glucose Agar, Mac Conkey Agar. b.
Medium
komposisinya
semi
sintesis
diketahui
yaitu
media
yang
sebagian
secara pasti, misanya PDA
(Potato
Dextrose Agar) yang mengandung agar, dekstrosa dan ekstrak kentang. Untuk bahan ekstrak kentang, kita tidak dapat mengetahui secara detail tentang komposisi senyawa penyusunnya. c.
Medium non sintesis yaitu media yang dibuat dengan
komposisi yang tidak dapat diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahan dasarnya, misalnya Tomato Juice Agar, Brain Heart Infusion Agar, Pancreatic Extract. 3. Medium berdasarkan tujuan a. Media untuk isolasi Media
ini
mengandung
semua
senyawa
esensial
untuk
pertumbuhan mikroba, misalnya Nutrient Broth, Blood Agar. b. Media selektif/penghambat Media yang selain mengandung nutrisi juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroba lain dan merangsang pertumbuhan mikroba yang diinginkan.
Contohnya
adalah Luria
Bertani
medium yang
ditambah Amphisilin untuk merangsang E.coli resisten antibotik dan menghambat kontaminan yang peka, Ampiciline. Salt broth
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
yang ditambah NaCl 4% untuk
membunuh Streptococcus
agalactiae yang toleran terhadap garam. c. Media diperkaya (enrichment) Media diperkaya adalah media yang mengandung komponen dasar untuk pertumbuhan mikroba dan ditambah komponen kompleks seperti darah, serum, kuning telur. Media diperkaya juga bersifat selektif untuk mikroba tertentu. Bakteri yang ditumbuhkan dalam media ini tidak hanya membutuhkan nutrisi sederhana untuk
berkembang
biak,
tetapi
membutuhkan
komponen
kompleks, misalnya Blood Tellurite Agar, Bile Agar, Serum Agar, dll. d. Media untuk peremajaan kultur Media umum atau spesifik yang digunakan untuk peremajaan kultur e. Media untuk menentukan kebutuhan nutrisi spesifik. Media ini digunakan unutk mendiagnosis atau menganalisis metabolisme suatu mikroba. Contohnya adalah Koser’s Citrate medium,
yang
digunakan
untuk
menguji
kemampuan
menggunakan asam sitrat sebagai sumber karbon. f. Media untuk karakterisasi bakteri Media yang digunakan untuk mengetahui kemempuan spesifik suatu
ALISA MAJID
mikroba. Kadang-kadang
indikator
ditambahkan
untuk
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
menunjukkan adanya perubahan kimia. Contohnya adalah Nitrate Broth, Lactose Broth, Arginine Agar. g. Media diferensial Media
ini
bertujuan
untuk
mengidentifikasi
mikroba
dari
campurannya berdasar karakter spesifik yang ditunjukkan pada media diferensial, misalnya TSIA (Triple Sugar Iron Agar) yang mampu memilih Enterobacteria berdasarkan bentuk, warna, ukuran koloni
ALISA MAJID
dan
perubahan
warna
media
di
sekeliling
koloni.
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
B. Uraian Bahan 1. Agar (Dirjen POM, 1995 hal 69) Nama Resmi
: Agar
Nama lain
: Agar-agar
Pemerian
: Tidak berbau atau bau lemah, berasa musilago pada lidah
Kelarutan
: Tidak larut dalam air dingin, larut dalam air mendidih
Penyimpanan
: Dalam wadah tertutup baik
Kegunaan
: Sebagai bahan pemadat medium
2. Aquadest (Dirjen POM, 1979 hal 96) Nama resmi
: Aqua Destillata
Nama lain
: Air suling
Pemerian
: Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, tidak mempunyai rasa
3.
Penyimpanan
: Dalam wadah tertutup baik
Kegunaan
: Sebagai pelarut medium
Ekstrak beef (Dirjen POM, 1995 hal 1152) Nama resmi
: Ekstrak daging sapi
Nama Lain
: Ekstrak beef
Pemerian
: Kaldu daging sapi konsentrat diperoleh dengan mengekstraksi daging sapi segar tanpa lemak,
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
dengan
cara
merebus
dalam
air
dan
menguapkan kaldu pada suhu rendah dalam hampa udara sampai terbentuk residu kental berbentuk
pasta. Massa berbentuk
pasta,
berwarna coklat kekuningan sampai coklat tua, baud an rasa seperti daging, sedikit asam. Penyimpanan
:
Simpan dalam wadah tidak tembus cahaya, tertutup rapat
Kegunaan 4.
:
Sebagai sumber nutien mikroba
Pepton Dirjen POM, 1995 hal 1191) Nama resmi
:
Pepton
Nama lain
:
Pepton daging
Pemerian
: Serbuk, kuning kemerahan sampai coklat, bau khas tidak busuk
Kelarutan
: Larut dalam air, memberikan larutan berwarna coklat kekuningan yang bereaksi sedikit asam, tidak larut dalam etanol (95 %) P dan dalam eter P.
Kegunaan 5.
:
Sebagai sumber nutrient mikroba
Sukrosa (Dirjen POM, 1995 hal 762) Nama resmi
:
Sucrosum
Nama lain
:
Sakarosa, sukrosa
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
Pemerian
: Hablur putih atau tidak berwarna atau massa hablur atau berbentuk kubus, atau serbuk hablur warna putih, tidak berbau, rasa manis, stabil diudara. Larutannya netral terhadap lakmus
Kelarutan
: Larut dalam 0,5 bagian air dan dalam 370 bagian etanol (95 %) P.
6.
Penyimpanan
: Dalam wadah tertutup rapat
Kegunaan
: Sebagai campuran medium TEA
Dekstrosa (Dirjen POM, 1995 hal 300) Nama resmi
: Dextrosum
Nama lain
: Dekstrosa, glukosa
Pemerian
: Hablur tidak berwarna, serbuk hablur atau serbuk granul putih, tidak berbau, rasa manis
Kelarutan
: Mudah larut dalam air, sangat mudah larut dalam
air
mendidih,
larut
dalam
etanol
mendidih, sukar larut dalam etanol Kegunaan
ALISA MAJID
: Sebagai sumber nutrient mikroba
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
BAB III KAJIAN PRAKTIKUM A. Alat yang digunakan Adapun alat yang digunakan pada pembuatan medium yaitu; Autoklaf, Batang pengaduk,Corong, Erlenmeyer, Gelas kimia, Kapas, Kertas saring, Kertas timbang, Kompor gas, Kulkas, Sendok tanduk, Spoit 10 ml, Timbangan analitik, Timbangan O’hauss B. Bahan yang digunakan Adapun bahan yang digunakan pada pembuatan medium yaitu; Agar, Aquades, Dekstrosa, Ekstrak beef, Kentang, Pepton C. Cara Kerja 1.
Nutrien Agar (NA)
- Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan - Ditimbang agar 3,75 gram, peptone 1,25 gram dan ekstrak beef 0,75 gram - Dimasak hingga mendidih - Dimasukkan ke dalam erlemeyer yang berisi pepton dan agar dan diadkan hingga 250 ml dengan aquades - Dipanaskan hingga larut dan homogen - Ditutup mulut erlemeyer dengan kapas ditambah kertas dan diikat dengan karet gelang - Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121º C selama 15 menit - Disimpan dalam kulkas (lemari pendingin)
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
- Diamati warna dan bentuk konsistensi dari tiap medium 2.
Potato Dekstrosa Agar (PDA)
- Disiapka alat dan bahan yang akan digunakan - Ditimbang potato 50 gram, dekstrosa 2,5 gram dan agar 3,75 gram - Kentang direbus (dimasak) hingga mendidih selama 15 menit - Disaring ke dalam erlemeyer yang telah berisi dekstrosa dan agar - Diadkan hingga 250 ml dengan aquades - Dipanskan hingga larut dan homogen - Ditutup mulut erlemeyer dengan kapas ditambah kertas dan diikat dengan karet gelang - Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121º C selama 15 menit - Disimpan dalam kulkas(lemari pendingin) - Diamati warna dan bentuk konsistensi dari tiap medium 3. Tauge Eksrak Agar (TEA) - Disiapkan alat dan bahan yang digunakan - Ditimbang touge 25 gram, sukrosa 15 gram dan agar 3,75 gram - Touge direbus (dimasak) hingga mendidih selama 15 menit - Disaring ke dalam erlemeyer yang telah berisi sukrosa dan agar - Diadkan hingga 250 ml dengan aquades - Dipanskan hingga larut dan homogen - Ditutup mulut erlemeyer dengan kapas ditambah kertas dan diikat dengan karet gelang - Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121º C selama 15 menit
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
- Disimpan dalam kulkas(lemari pendingin) - Diamati warna dan bentuk konsistensi dari tiap medium 4. Potato Dekstrosa Broth (PDB) - Disiapka alat dan bahan yang akan digunakan - Ditimbang potato 50 gram dan destroksa 2,5 gram - Kentang direbus (dimasak) hingga mendidih selama 15 menit - Disaring ke dalam erlemeyer yang telah berisi laktosa dan ekstrak beef - Diadkan hingga 250 ml dengan aquades - Dipanskan hingga larut dan homogen - Ditutup mulut erlemeyer dengan kapas ditambah kertas dan diikat dengan karet gelang - Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121º C selama 15 menit - Disimpan dalam kulkas(lemari pendingin) - Diamati warna dan bentuk konsistensi dari tiap medium 5. Nutrien Broth (NB) - Disiapka alat dan bahan yang akan digunakan - Ditimbang peptone 1,25 gram dan ekstrak beef 0,75 gram - Dimasak hingga mendidih - Dimasukkan ke dalam erlemeyer yang berisi pepton dan agar dan diadkan hingga 250 ml dengan aquades - Dipanaskan hingga larut dan homogen
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
- Ditutup mulut erlemeyer dengan kapas ditambah kertas dan diikat dengan karet gelang - Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121º C selama 15 menit - Disimpan dalam kulkas (lemari pendingin) - Diamati warna dan bentuk konsistensi dari tiap medium. B. Tabel Pengamatan NO
1.
Medium
Warna Sebelum Sesudah disterilkan disterilkan
PDA
Kuning
2.
.PDB
3.
TEA
Kuning keruh Kuning jernih
4.
NA
Kuning jernih
5.
NB
Kuning jernih
ALISA MAJID
Coklat muda Cream
Fungsi
Pertumbuhan jamur Pertumbuhan jamur Kuning Pertumbuhan kecoklatan jamur dan bakteri Kuning Pertumbuhan kemeraha bakteri n Kuning Pertumbuhan muda bakteri
Berdasar kan Konsistensi susunan kimia Non Padat sintetik Non Cair sintetik Semi Padat sintetik Sintetik
Padat
Sintetik
Cair
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
C. Pembahasan
Pada media yang dibuat bigunakan semua bahan yang telah di sterilkan terlebih dahulu yang berguna untuk membunuh bakteri yang berada
dalam
media
biakan
yang
dapat
mempercepat
proses
pembusukan media. Hal ini sesuai dengan literature yang ada, Dalam praktikum pensterilan media menggunakan otoklaf yang menggunakan tekanan yang disebabkan uap air sehingga suhu mencapai 121oC selama 15 menit. Pensterilan ini sangat diperlukan untuk memperlambat terjadinya pembusukan pada medium biakan yang terjadi karna ketidak sterilan media yang menyebabkan bakteri yang berada di dalam media dapat bertahan hidup dan merusak media biakan. Dalam pembuatan media sintetis juaga harus di perhatikan jumlah dan kosentrasi bahan yang ada, karna jumlah dan kosentrasi yang tidak sesuai dengan media hidup hewan percobaan dapat menghambat pertumbuhan hewan sample. Adapun
medium
yang
yang
digunakan
sebagai
tempat
pertumbuhan dari mikroorganisme yaitu: 1. Nama medium : Tauge Ekstrak Agar (TEA)
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
2. Tauge ekstrak agar (TEA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan alami (tauge) dan bahan sintesis (Sukrosa dan agar). TEA digunakan untuk menumbuhkan khamir dan kapang.
> Fungsi bahan yang digunakan pada medium TEA :
- Tauge : Sebagai sumber vitamin, nitrogen organik dan senyawa karbon. - Sukrosa : sebagai sumber gula dan energi - Agar : Untuk memadatkan medium TEA. - Aquadest : Untuk melarutkan agar, sukrosa, dan tauge. 2. Nama medium : Potato Dextrose Agar (PDA) Potato dextrose agar (PDA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan alami (kentang) dan bahan sintesis (dextrose dan agar). PDA digunakan untuk menumbuhkan jamur. > Fungsi bahan yang digunakan pada medium PDA : - Kentang : sumber karbon (karbohidrat), vitamin dan energi. - Dextrose : sebagai sumber gula dan energi - Agar : Untuk memadatkan medium PDA. - Aquadest : Untuk melarutkan agar, dextrose, dan kentang. 3. Nama medium : Nutrient Agar (NA) Nutrient agar (NA) termasuk medium semi alamiah karena tersusun atas bahan alami (daging) dan bahan sintesis (pepton dan agar). PDA digunakan untuk menumbuhkan semua mikroba. > Fungsi bahan yang digunakan pada medium NA : ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
- Daging : sebagai sumber vitamin B, mengandung nitrogen organik dan senyawa karbon.
- Pepton : sebagai sumber utama nitrogen organic dan sumber nutrisi - Agar : Untuk memadatkan medium NA. - Aquadest : Untuk melarutkan agar, pepton, dan daging.
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Adapun kesimpulan dari hasil praktikum yang telah dilakukan yaitu: 1. Medium PDA (Potato Dekstrosa Agar) Komposisi dari medium ini berupa kentang, dekstrosa dan agar, dengan konsistensinya berupa medium
padat dan berwarna kuning
sebelum disterilkan dan setelah disterilkan berwarna coklat muda, merupakan medium pertumbuhan jamur 2. Medium PDB (Potato Dekstrosa Borth) Komposisi medium ini berupa kentang dan dekstrosa dengan konsistensi yang diperoleh yaitu medium cair yang berwarna kuning keruh sebelum disterilkan dan berwarna cream setelah disterilkan ,merupakan medium pertumbuhan jamur 3. Medium TEA (Tauge Ekstrak Agar) Komposisi dari medium TEA ini berupa tauge, sukrosa dan agar, merupakan konsistensi medium padat karna mengandung agar, dan berwarna kuning jernih sebelum disterilkan dan berwarna kuning kecoklatan setelah disterilkan 4. Medium NA (Nutrien Agar) Komposisi medium ini berupa ekstrak beef, peptone dan agar, dengan konsistensi yang diperoleh yaitu medium padat berwarna
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
kuning jernih sebelum disterilkan dan berwarna kuning kemerahan setelah disterilkan dan merupakan medium pertumbuhan bakteri.
5. Medium NB (Nutrien Borth) Komposisi dari medium ini berupa peptone dan ekstrak beef, dimana diperoleh konsistensi berupa medium cair yang berwarna kuning jernih sebelum dikeringkan dan berwarna kuning muda setelah disterilkan dan merupakan medium pertumbuhan bakteri B. SARAN Sebaiknya alat harus dalam keadaan steril dan bahan yang akan digunakan harus tersedia.
DAFTAR PUSTAKA
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
Dirjen POM, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Depkes RI. Jakarta.Hal 69, 96, 1152, 1191, 762, 300. Dwidjoseputro, 1990. Dasar- Dasar Mikrobiologi. PT. Djambatan : Surabaya .Hal 38 Tjitrosoepomo Gembong. 1994. Taksonomi Tumbuhan ObatObatan. Gadja Mada University Press : Yogyakarta.Hal 339, 215 Ratna, S. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. PT. Gramedia Pustaka Utama; Jakarta. Hal 38, 44, 46 Rusli,2007. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Farmasi Dasar . Universitas Muslim Indonesia. Makassar.Hal 13 Pelczar, J Michael dan Chan,s. 2006. Dasar-Dasar Mikrobiologi Edisi II. Universitas Indonesia Press : Jakarta.
LAMPIRAN
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
A. Perhitungan Medium 1. Medium PDA (Potato Dekstrosa Agar) - Komposisi untuk 1000 ml Potato
200 gram
Dekstrosa
10 gram
Agar
15 gram
Aquades
ad 1000 ml
- Komposisi untuk 250 ml Potato
250/1000 x 200 gr = 50 gram
Dekstrosa
250/1000 x 10 gr = 2,5 gram
Agar
250/1000 x 15 gr = 3,75 gram
Aquades
Ad 250 ml
2. TEA (Touge Ekstrak Agar) - Komposis untuk 1000 ml Tauge
100 gram
Sukrosa
60 gram
Agar
15 gram
Aquades
ad 1000 ml
- Komposisi untuk 250 ml Tauge
250/1000 x 100 gr = 25 gram
Dekstrosa
250/1000 x 60 gr = 15 gram
Agar
250/1000 x 15 gr = 3,75 gram
Aquades
Ad 250 ml
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
2. NA (Natrium Agar) - Komposisi untuk 1000 ml Agar
15 gram
Pepton
5 gram
Ekstrak beef
9 gram
Aquades
ad 1000 ml
- Komposisi untuk 250 ml Agar
250/1000 x 15 gr = 3,75 gram
Pepton
250/1000 x 5 gr = 1,25 gram
Ekstrak beef
250/1000 x 3 gr = 0,75 gram
Aquades
Ad 250 ml
3. PDB (Potato Dekstrosa Broth) - Komposisi untuk 1000 ml Potato
250 gram
Dekstrosa
10 gram
Aquades
ad 1000 ml
- Komposisi untuk 250 ml Potato
250/1000 x 250 gr = 62,5 gram
Dekstrosa
250/1000 x 10 gr = 2,5 gram
Aquades
Ad 250 ml
4. NB (Nutrient Broth) - Komposisi untuk 1000 ml Pepton
ALISA MAJID
5 gram
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
Ekstrak beef
3 gram
Aquades
ad 1000 ml
- Komposisi untuk 250 ml Pepton
250/1000 x 5 gr = 1,25 gram
Ekstrak beef
250/1000 x 3 gr = 0,75 gram
Aquades
Ad 250 ml
B. Skema Kerja
ALISA MAJID
EVI RISYANI
PEMBUATAN MEDIUM
Bahan
Ditimbang
Dimasukkan dalam wadah
Dipanaskan selama 15 menit
Disterilkan diautoklaf 121º C selama 15 menit
Diamati warna dan bentukmedium
Disimpan dalam kulkas
Diamati warna dan bentuk medium
ALISA MAJID
EVI RISYANI
