FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA CIRUJANO DENTISTA INTRODUCCION AL PROCESO SALUD-ENFERMEDAD , NUTRICION Y BASES FARMACOLÓGICAS GRUPO: 3103 PRACTICA # 8 Determinación de Carbohidratos en Diente. ALUMNO: DEL VALLE GUERRERO ÁNGEL ABRAHAM
I. Objetivo. Determinar la concentración de carbohidratos totales en diente, además de explicar la función e importancia en cada parte de las estructuras dentales.
II. Introducción. Los carbohidratos, con componentes de la matriz orgánica del diente, participan en la formación de glucoproteínas, así como también constituyen parte del tejido conectivo y como reserva energética.
III. Conocimientos previos. MATERIAL DE VIDRIO EN EL LABORATORIO Vasos de precipitado. Pueden ser altos o bajos. Sin graduar o graduados y nos
dan un volumen aproximado. Desecador. Recipiente de vidrio que se utiliza para evitar que los solutos tomen humedad ambiental. Embudo de vidrio. Se emplea para trasvasar líquidos o disoluciones de un recipiente a otro y también para filtrar. Buchner y Kitasato. El Buchner es un embudo de porcelana, tiene una placa filtrante de agujeros grandes por lo que se necesita colocar un papel de filtro circular, que acople perfectamente, para su uso.Su uso va unido al Kitasato, recipiente de vidrio con rama lateral para conectar con la bomba de vacío. Cristalizador . Es un recipiente de vidrio donde al añadir una disolución se de en mejores condiciones, el soluto cristalice. Vidrio de reloj. Lámina de vidrio cóncavo-convexa que se emplea para pesar los sólidos y como recipiente para recoger un precipitado sólido de cualquier experiencia que se introducirá en un desecador o bien en una estufa. Tubos de ensayo. Recipiente de vidrio, de volumen variable, normalmente pequeño. Sirven para hacer pequeños ensayos en el laboratorio. Se pueden calentar, con cuidado, directamente a la llama. Se deben colocar en la gradilla y limpiarlos una vez usados, se colocan invertidos para que escurran. Probeta. Recipiente de vidrio para medir volúmenes, su precisión es bastante aceptable, aunque por debajo de la pipeta. Las hay de capacidades muy diferentes: 10, 25, 50 y 100 ml. Pipetas. Recipientes de vidrio para medir volúmenes, son de gran precisión. Las hay de capacidades muy diferentes: 0'1, 1'0, 2'0, 5'0, 10'0.ml. En cuanto a la forma de medir el volumen, podemos distinguir entre: graduadas: sirven para poder medir cualquier volumen inferior al de su máxima capacidad. Si el líquido no ofrece peligrosidad, colocando la boca en la parte superior de la pipeta, se succiona y se hace subir el líquido un poco por encima del enrase. La pipeta se cierra con el dedo índice. Buretas. Material de vidrio para medir volúmenes con toda precisión. Se emplea, especialmente, para valoraciones. La llave sirve para regular el líquido de salida. Matraz Aforado. Material de vidrio para medir volúmenes con gran precisión. Existen de capacidades muy variadas: 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000 mI. Sólo
mide el volumen que se indica en el matraz. No se puede calentar ni echar líquidos calientes.. Se emplea en la preparación de disoluciones. Frascos lavadores. Recipientes en general con tapón y un tubo fino y doblado, que se emplea para contener agua destilada o desionizada. Se emplea para dar el último enjuague al material de vidrio después de lavado, y en la preparación de disoluciones. Frasco cuentagotas con tetina. Normalmente se utilizan para contener disoluciones recién preparadas, se acompañan de cuentagotas para poder facilitar las reacciones de tipo cualitativo. Gradilla. Material de madera o metal (aluminio), con taladros en los cuales se introducen los tubos de ensayo. Escobilla y escobillón. Material fabricado con mechón de pelo natural, según el diámetro se utilizan para lavar: tubos de ensayo, buretas, vasos de precipitado, erlenmeyer, etc. Erlenmeyer. Matraz de vidrio donde se pueden agitar disoluciones, calentarlas (usando rejillas) etc. Matraz. Instrumento de laboratorio que se utiliza, para contener y medir líquidos. Es un recipiente de vidrio de forma esférica o troncocónica con un cuello cilíndrico.
UTILIZACION DEL ESPECTROFOTOMETRO
Hace uso de la transmisión de la luz a través de una solución para determinar la concentración de un soluto dentro de la solución. Difiere de un colorímetro en la manera en la cual la luz es separada en sus longitudes de onda componentes. Esto es realizado colocando una fotocelda del otro lado de la muestra. Todas las moléculas absorben energía radiante en una longitud de onda u otra. Esas que absorben energía dentro del espectro visible son conocidas como pigmentos. Las proteínas y los ácidos nucleicos absorben luz en el rango ultravioleta. Consiste de 5 partes: Fuente de luz (lámpara de halógeno), prisma, portaceldas, detector y pantalla digital. El rango de longitud de onda esta entre 335 y 1000 nm. El prisma permite aislar y obtener la longitud de onda de interés. El detector recibe y convierte la luz transmitida en una señal eléctrica. En la pantalla digital se muestr a la absorbancia o la transmitancia. Encienda el equipo y permita calentar por 15 minutos. 2. Seleccione transmitancia o absorbancia. 3. Seleccione la longitud de onda. 4. Prepare el “BLANCO”, llene una celda o tubo y límpiela con un trozo de tela o papel. Siempre limpie las celdas o tubos antes de colocarlas en el porta celdas. 5. Inserte la celda en el porta celdas y ciérrelo. 6. Oprima el botón de ajustar 0 A/100% T. 7. Remueva el “BLANCO” y coloque otra celda con la solución a ser examinada. 8. Lea la transmitancia o absorbancia.
FORMACION DE CARIES
La caries es una afección de los dientes que se produce por la acción metabólica de las bacterias que hay en la placa dental. Estas bacterias son los lactobacilos, los actinomicetos y los estreptococos mutans. Estas bacterias producen ácidos orgánicos, como el ácido láctico, que son capaces de dañar e ir disolviend o el diente y causa una desmineralización
1.- La caries afecta al esmalte, afecta principalmente a los molares y premolares. 2.- Se afecta a la dentina. Las bacterias se infiltran por debajo del esmalte del diente. Se produce dolor con el contacto con comida caliente, fría, ácida o azucarada. 3.- La caries se hace profunda y afecta a la pulpa del diente. Se manifiesta como un intenso dolor de muelas. 4.- Las bacterias se expanden hasta el hueso y las encías. Provoca fuertes dolores, la formación de accesos y quistes, y el peligro de infección de otras partes del cuerpo.
CARBOHIDRATOS
Son la principal fuente de energía con la que cuenta el organismo para vivir. Están formados por carbono (C), hidrógeno (H) y oxígeno (O) con la formula general (CH2O) n. incluyen azúcares, almidones, celulosa y otros compuestos que se encuentran en los organismos vivientes. Los carbohidratos básicos o azúcares simples se denominan monosacáridos, los carbohidratos con dos azúcares simples se llaman disacáridos, consisten de dos a diez azúcares simples se llaman oligosacáridos y los que tienen un número mayor se llaman polisacáridos.
ESTRUCTURA DEL DIENTE
Formado a partir de tres sustancias: el esmalte, la dentina y el cemento; y una sustancia blanda (pulpa dentaria). La corona dental visible en la cavidad bucal está recubierta con esmalte, que es la sustancia más dura del cuerpo humano. El esmalte está formado en aproximadamente un 96 % por compuestos inorgánicos cuyos elementos principales son el calcio, el fósforo, el carbonato, el magnesio y el sodio, así como agua y compuestos orgánicos. La mayor parte del diente está formada por dentina, la parte de la corona está recubierta de esmalte y la zona de las raíces está recubierta con cemento dental. La dentina es la segunda sustancia más dura del cuerpo humano y está formada en aproximadamente un 70 % por componentes inorgánicos y en un 20 % por material orgánico y agua. La dentina la forman los odontoblastos, se encuentran en el borde de la pulpa dentaria. El cemento cubre la superficie de la raíz, pareciéndose en su estructura al hueso humano. El cemento lo crean los cementoblastos y está compuesto en un 65 % por elementos inorgánicos, principalmente calcio y fosfato.
IV. Fundamento Teórico. La composición de los órganos dentarios en cada individuo varía por diversos factores tales como: sus características genéticas, nutricionales, Edad, Raza, Sexo, incluso tipo de diente como por ejemplo, incisivo, camino, premolar o molar, esto debido a su anatomía y tamaño. Además, dentro de los componentes orgánicos se citan variaciones importantes de acuerdo edad del paciente, ya que es mayor en pacientes jóvenes (en desarrollo) que en los maduros (pendiente maduro). Recuerda detenido información de calles de Miller, se produce una desmineralización acida del diente, lo que nos indica que los microorganismos de la
placa dentobacteriana, pueden utilizar la materia orgánica contenida en ella como sustrato para la producción de ácidos, en especial los carbohidratos como la sacarosa, lo cual favorece la desmineralización del esmalte y su posterior cavitación. Además de la teoría citada, existe la teoría en endógena, en donde se menciona la participación del glucógeno, que se encuentra en el interior de los órganos dentarios, el cual es utilizado por las bacterias como fuente de energía, producien do daños a las estructuras calcificadas. La concentración de carbohidratos en las estructuras dentales es menor que el de las proteínas, en la presente práctica se realizará la técnica del fenol sulfúrico para su determinación. Los carbohidratos se deshidratan en presencia de ácidos minerales, formando furfural en el caso de pentosas e hidroxifurfural en el caso de las hexosas, posteriormente se condensan con fenol formando una reacción colorida, lo que facilita su identificación por espectrofotometría.
V. Material Reactivos y Equipo. Material: 8 tubos de ensayo. 1 gradilla 1 pipeta de 10 ml. 2 pipetas de 1 ml. 1 matraz Erlenmeyer de 50 ml. 1 matraz volumétrico de 100 ml. 1 piceta con agua destilada. 1 disco de papel filtro. Reactivos: -Solución de fenol al 80%. -NaOH al 1.5N. -Estándar de glucosa 0.1 mg/ml. -H2SO4 concentrado. -Solución “O”.
VI. Procedimiento. Pipetear 10 ml. de la solución "O" y transferir a un matráz Erlenmeyer de 50 ml, adicionar 10 ml de NaHO al 1.5 N, homogenizar esta solución y anotar las caracteristicaas fisicas, filtrar esta solución y etiquetar como solución problema. Enjuagar los tubos con agua destilada y escurrimiento; etiquetarlos del 1 al 8 y prepararlos de la siguiente manera:
Agua Destilada (ml)
Estandar Solución Tubo de glucosa “C” Concentración Absorbancia. (ml) (problema) glucosa (mg) (ml) 1 2.0 2 1.5 0.5 3 1.0 1.0 4 1.9 0.1 5 1.8 0.2 6 1.7 0.3 7 1.6 0.4 8 1.5 0.5 Adicionar a cada tubo, 0.1 ml. de fenol al 80%, mezclando inmediatamente con el vortex. Adicionar por la pared de cada tubo con mucho cuidado, 5 ml. de acido sulfurico concentrado. DEJAR REPOSAR DURANTE 20-30 MIN. Transcurrido el tiempo, se observará color en los tubos. Calibrar el espectrofotometro a una longitud de onda de 490 nm. Calibrar con el tubo 1, al 0% de absorbancia (100% de transmitancia). Si es necesario, deberá recalibrarse al aparato para evitar arrores de desviación. Continuar la lectura de la absorbancia de los tubos uno por uno en orden creciente de concentración del 2 al 8. Anotar los resultados La curva de patrón se construira con los tubos 4 al 8 y los problemas a resolver son los tubos 2 y 3.
VII. Resultados.
VIII. Cuestionario. 1. ¿Cuál es la función de los carbohidratos en el diente? 2. ¿Cuáles son los carbohidratos que se encuentran en el diente y cuál es el más abundante?
Está conformado por glicógeno y mucopolisacáridos. EL más abundante es 3. ¿Cuáles son las concentraciones de azúcares en el diente citadas en diversas bibliografías? 4. ¿En qué otras estructuras del aparato estomatognático se encuentran azúcares?
IX. Bibliografía.
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