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INSTITUTO DE EDUCACIÓN SUPERIOR TECNOLÓGI PÚBLICO “TRUJILLO”
LABORATORIO CLÍNICO III
MÉTODOS Y TÉCNICAS DE ESTUDIO MICROBIOLÓGI PROFESOR: BLGO. MBLGO. FREDDY VALLEJO LEÓN ALUMNO (A):
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“MÉTODOS DE ESTUDIO DE LOS HONGOS Y
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INTRODUCCIÓN:
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Los hongos constituyen un grupo diverso de organismos unicelulare pluricelulares que se alimentan mediante la absorción directa de nutrientes. alimentos se disuelven mediante enzimas que secretan los hongos; después absorben a través de la fina pared de la célula y se distribuyen por difusión simple e el protoplasma. Junto con las bacterias, los hongos son los causantes de putrefacción y descomposición de toda la materia orgánica. Hay hongos en cualquie parte en que existan otras formas de vida. Algunos son parásitos de organismos vivo y producen graves enfermedades en plantas y animales. La disciplina científica qu estudia los hongos se llama Micología. Los hongos figuraban en las antiguas clasificaciones como una división de reino Plantas (Plantae). Se pensaba que eran plantas carentes de tallos y de hojas que en el trascurso de su transformación en organismos capaces de absorber su alimento habían perdido la clorofila, y con ello, su capacidad para realizar la fotosíntesis. Si embargo, en la actualidad los científicos los consideran un grupo completament separado, que evolucionó a partir de flagelados sin pigmentos. Ambos grupos s incluyen dentro del reino Protistas, o bien se coloca a los hongos como un rein aparte, debido a la complejidad de su organización. Hay unas cien mil especie conocidas de hongos. Se cree que los grupos más complejos derivan de los tipos má primitivos, los cuales tienen células flageladas en alguna etapa de su ciclo vital. Las micosis son enfermedades producidas por el crecimiento de un hongo en e organismo o sobre la superficie corporal. En la mayoría de la gente sana la You'reafectan Readingsólo a Preview infecciones por hongos son leves, a la piel, el cabello, las uñas, u otra zonas superficiales, y se resuelven espontáneamente. Comprenden la tiña y el pie d Unlock full access with a free trial. atleta. Sin embargo, en las personas con un sistema inmunológico deteriorado, est tipo de infecciones, denominadas dermatofitosis, pueden persistir durante larg Download With Free Trial tiempo. Los organismos responsables de las dermatofitosis pertenecen al géner Microsporum, Epidermophyton y Trichophyton. Los hongos también pueden invadir los órganos internos del organismo, e especial los pulmones, donde las infecciones se parecen a la neumonía o a l tuberculosis pulmonar. Son típicas de enfermos cuyo sistema inmune ha quedad deprimido por procesos como el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA fármacos antitumorales, o radiación. También aparecen en pacientes tratados co hormonas esteroideas, como el cortisol, en sujetos con diabetes y en quienes ha Sign up to vote on this title seguido tratamiento antibiótico durante mucho tiempo. Los dos hongos que se suele useful el nombre d aislar en estos casos son Cryptococcus y Aspergillus , los cuales reciben Useful Not patógenos oportunistas. Los hongos que pertenecen al género Candida, en especial Candida albica
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china o cinta de celulosa), la coloración diferencial (Gram, Ziehl Neelsen o Giemsa También se emplean los cultivos (en medios comunes como el agar Sabouraud o e medios mejorados como agar sangre o BHI), inoculaciones en animales (ratone cobayos, conejos, ratas) y el estudio anatomopatológico (con coloraciones tejidos como hematoxilina – eosina, ácido para amino salicílico). Entre los método indirectos se emplean las intrademoreacciones, reacciones serológicas (aglutinación precipitación, fijación de complemento) e inmunofluorescencia. La sangre es sustancia líquida que circula por las arterias y las venas de organismo. La sangre es roja brillante o escarlata cuando ha sido oxigenada en lo pulmones y pasa a las arterias; adquiere una tonalidad más azulada cuando ha cedid su oxígeno para nutrir los tejidos del organismo y regresa a los pulmones a través d las venas y de los pequeños vasos denominados capilares. En los pulmones, la sangr cede el dióxido de carbono que ha captado procedente de los tejidos, recibe un nuev aporte de oxígeno e inicia un nuevo ciclo. Este movimiento circulatorio de sangr tiene lugar gracias a la actividad coordinada del corazón, los pulmones y las parede de los vasos sanguíneos. La sangre está formada por un líquido amarillento denominado plasma, en e que se encuentran en suspensión millones de células que suponen cerca del 45% de volumen de sangre total. Tiene un olor característico y una densidad relativa qu oscila entre 1,056 y 1,066. En el adulto sano el volumen de la sangre es una onceav parte del peso corporal, de 4,5 a 6 litros. Una gran parte del plasma es agua, medio que facilita la circulación de mucho factores indispensables que forman la sangre. Un milímetro cúbico de sangre human Reading a oPreview contiene unos cinco millonesYou're de corpúsculos glóbulos rojos, llamados eritrocitos hematíes; entre 5.000 y 10.000 corpúsculos o glóbulos blancos que reciben e Unlock full access with a free trial. nombre de leucocitos, y entre 200.000 y 300.000 plaquetas, denomina trombocitos. La sangre también transporta muchas sales y sustancias orgán Download With Free Trial disueltas. Las células o glóbulos blancos de la sangre son de dos tipos principales: lo granulosos, con núcleo multilobulado, y los no granulosos, que tienen un núcle redondeado. Los leucocitos granulosos o granulocitos incluyen los neutrófilos, qu fagocitan y destruyen bacterias; los eosinófilos, que aumentan su número y se activa en presencia de ciertas infecciones y alergias, y los basófilos, que segreg sustancias como la heparina, de propiedades anticoagulantes, y la histamina qu estimula el proceso de la inflamación. Los leucocitos no granulosos están formado Sign up to vote on this title por linfocitos y un número más reducido de monocitos, asociados con el sistem inmunológico. Los linfocitos desempeñan un papel importante enuseful la producción d Useful Not anticuerpos y en la inmunidad celular. Los monocitos digieren sustancias extrañas n bacterianas, por lo general durante el transcurso de infecciones crónicas.
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MATERIAL Y MÉTODOS:
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A) Materiales:
1. Material Biológico: Muestras de secreciones, raspados de piel, pelo o cualquier otro fluid biológico. Muestras de frutas, pan u otro alimento hongueados. Bebida fermentada naturalmente (chicha de jora, vino, etc). Muestras de sangre periférica. 2. Material de Laboratorio: Placas de Petri. Asa de bacteriológica. Hisopos estériles. Mechero. Alcohol. Agar Sabouraud. Hidróxido de Potasio al 10%. Solución salina fisiológica. Azul de metileno al 1%. Glicerina al 50%. You're Reading a Preview Láminas portaobjeto.
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B) Procedimiento:
Laminas cubreobjeto. Azul de lactofenol. Bálsamo de canada. Esmalte. Microscopio. Incubadora. Barra de coloración. Aguja Nº 21 o lanceta. Algodón. Tubo microhematocrito. Colorante Wright.
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1. Aislamiento de Hongos ambientales: En placas de agar Sabouraud, exponerlas a diferentes ambientes (baño jardín, laboratorio, etc). Incubar dichas placas a temperatura ambiente por 5 a 7 días. Observar el crecimiento de las colonias anotando sus características. Realizar observaciones microscópicas de las colonias para identificar e género al que pertenecen. Sign up to vote on this title
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2. Aislamiento de hongos causantes de micosis: Realizar una observación microscópica de la muestra. Si es secreció
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bacterias incubando a 37ºC por 1 a 2 días o a temperatura ambiente por a 3 días. Realizar observaciones macroscópicas y microscópicas de las colonia para identificar el género al que pertenecen.
3. Microcultivo: En placas Petri estériles colocar un recipiente sobre el cual se sosteng una lámina portaobjeto conteniendo una pequeña porción de Sabouraud. Luego agregar un inóculo de la colonia de un hongo y cubrir con u cubreobjeto. En la placa Petri agregar algodón conteniendo glicerina al 50% para l conservación de la humedad. Dejar incubar a temperatura ambiental (hongos ambientales). Llevar a la incubadora a 37ºC, previa eliminación de algodón glicerina al 50%, hasta que se sequen las hifas y se adhieran portaobjeto y cubreobjeto. Observar las láminas al microscopio con azul de lactofenol. Si se desea conservar los preparados se puede agregar bálsamo de canad se sellan las lámina cubre y portaobjeto con esmalte.
4. Coloración de un frotis sanguíneo: con la aguja Nº 21 o lanceta en la yema de un ded Realizar una punción You're Reading a Preview previo masaje. Unlock full access with a free trial. Descartar la primera gota de sangre y llenar el tubo de microhametocrito Colocar una gota de sangre del microhematocrito en uno de los extremo With Free Trial de la lámina de unDownload portaobjetos limpio. Luego colocar sobre la gota la lamina extensora en un ángulo de 30º 45º, desplazar la lamina extensora hacia atrás permitiendo que la gota s extienda hacia el borde del extensor. Realizar el extendido sobre el portaobjetos en una capa delgada. Dejar secar el frotis al medio ambiente y rotular. Colocar la lamina sobre la barra de coloración y cubrir completament con el colorante Wright, agregando la misma cantidad de agua destilada Sign up to vote on this title Mezclar uniformemente por medio de soplos. Useful Not useful Dejar reposar el reactivo de 5 a 10 minutos. Lavar con agua corriente.
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0 – 1% 20 – 45% 4 – 8%
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
BALCELLS, A. 1984. “La Clínica y el Laboratorio” 13va. Edición Zaragoz España. Editorial Marin S.A.
CIRSAT, F. 1987. “Diagnostico Hematológico de Laboratorio Clínico” Edición. Tomo II.
GUERCI, A. 1989. “Laboratorio Métodos de Análisis Clínicos y Interpretación”. 4ta. Edición Editorial El Ateneo. Buenas Aires Argentina.
INGRAHAM, J. y cols. 1998. “Introducción a la Microbiología”. Tomo I. Edi Reverté, S.A. Barcelona. España. Págs. 63-73.
JAWETZ, E. y cols. 1996. “Microbiología Médica”. 15º edición. Edit. El Atene Buenos Aires. Argentina. Págs. 63-71.
LYNCH, M. 1987 “Métodos de Laboratorio”. Vol. 1era y 2da Edición. Méxic D.F. Editorial Interamericana S.A. You're Reading a Preview
Unlock full Prácticos access with a de free Laboratorio trial. RAMIREZ, R. 1988. “Métodos Clínico Básico” 2da Edición. Lima
Download With Free Trial
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. DEPARTAMENTO MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA.1982. “Guía de prácticas”. UN Trujillo. Perú. Págs.26-29.
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS. FACULTAD D MEDICINA. 1986. “Microbiología”. UNMSM. Lima. Perú. Págs. 8-10.
TORTORA, G. y cols. 1993. “Introducción a la Microbiología”. 3º edición. Edi Sign up to vote on this title Acribia. Zaragoza . España . Useful Not useful
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CUESTIONARIO:
1. Señale qué elementos estructurales permiten diferenciar un hongo de bacteria. 2. ¿Cómo es la observación microscópica de las hifas y esporas de los siguien hongos ambientales: Penicillium, Alternaria, Rhizopus y Aspergilus. 3. Señale algunas de las aplicaciones industriales de los hongos. 4. ¿Cuál es el método de elección rápido y práctico para el diagnóstico de ptiri versicolor? 5. ¿Qué función tiene el hidróxido de potasio al 10% para la observación estructuras fúngicas en algunas muestras clínicas? 6. ¿Qué estructura permite dar un diagnóstico de micosis causad a Microsporum canis? 7. ¿Qué hongo causante de dermatofitosis produce una pigmentación roja en reverso de la colonia? 8. ¿Cuál es el procedimiento de trabajo más útil para el diagnóstico esporotricosis? 9. ¿Cuál es la importancia del estudio anatomopatológico en la cromomicosis? You're Reading a Preview 10. Señale las características macroscópicas y microscópicas de los gránul maduromicóticos. Unlock full access with a free trial. 11. ¿Qué hongo dimorficos patógenos conoce? 12. ¿Cuál es el significado Download del hallazgo en un examen en fresco de la estructu With Free Trial característica de Paracoccidioides brasiliensis? 13. Para el diagnóstico de histoplasmosis recomendaría ud la inoculación en ratone ¿Por qué? 14. ¿Qué estructuras microscópicas se observan en una candidiasis? 15. ¿Qué estructura histológica hace el diagnóstico de ficomicosis? 16. ¿Qué ventajas y desventajas existen entre la obtención de sangre venosa y sang capilar para los exámenes de sangre? 17. ¿Para realiza un hemograma es necesario que el paciente este en ayun Sign up to vote on this title fundamente su respuesta? usefulse recomiend 18. ¿Cuáles son las partes de un extendido sanguíneo, y en quéNotparte Useful realizar la lectura de los tipos de leucocitos, por qué? 19. ¿Qué otros colorantes sirven para colorear un frotis sanguíneo para recu
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