Practica Reconocimiento de Glucidos

Sexto CIB. Prof. Brayn Machado

Práctica Número 4:

RECONOCIMIENTO DE GLUCIDOS

 Objetivos: 1) Conocimiento de los métodos calorimétricos de identificación de glúcidos. 2) Demostración del poder reductor de los monosacáridos. 3) Comprobación del carácter hidrolizable del enlace glucosidico. 4) Determinación de las variaciones de PH y concepto de neutralización. 5) Manejo de material y técnicas de laboratorio.  Introducción: Para poner de manifiesto la presencia de determinados compuestos químicos se emplean reactivos específicos que ponen de relieve alguna propiedad de estas moléculas y permite identificarlas. Así, los azúcares monosacáridos y los disacáridos monoglicosídicos pueden identificarse mediante la solución o reactivo de Fehling, que cambia de color debido a la tendencia que tienen los azúcares con el carbono quiral libre, en medio básico, a dar electrones (capacidad reductora) oxidándose ellos mismos, a su vez, para dar azúcares-ácidos. El almidón se tiñe de modo específico con el colorante Lugol, adoptando un color azulvioláceo.  Materiales: Tubo de ensayo y gradilla Pipeta Mechero Pinza de madera

Pinza de madera Vasos de bohemia Papel tornasol

 Soluciones y sustancias: Ácido clorhídrico Lugol Hidróxido de sodio Reactivo de Fehling Solución de glucosa, sacarosa, maltosa y almidón  Procedimiento: Identificación del poder reductor de los glúcidos. 1) Colocar 5 tubos en una gradilla 2) Añadir con pipeta 2 ml de las diferentes soluciones azucaradas 3) Añadir a cada tubo 1ml de solución de Fehling A y 1 ml de solución de Fehling B 4) Calentar los tubos de ensayo en un vaso de bohemia con agua hirviendo 5) Observar y anotar los resultados (positivo color rojo, negativo ausencia de color rojo)

Hidrólisis de disacáridos no reductores y polisacáridos. Mientras esperamos la acción de los colorantes en la técnica anterior, preparamos los tubos para la segunda técnica. Los enlaces glucosidico son hidrolizables en medio acido diluido liberando sus monosacáridos o disacáridos constituyentes. 1) Numerar 5 tubos de ensayo y numerarlos según se indica en la imagen. 2) Añadir 3 ml de solución problema:  Tubo 1 y 2: Sacarosa  Tubo 3 y 5: Almidón 3) Añadir 3 ml de HCl diluido a los tubos 1 y 3 4) Calentar a baño maría durante 15 minutos los tubos 1 y 3 5) Pasado el tiempo añadir a dichos tubos NaOH hasta neutralización, comprobando con papel tornasol. 6) Separar en 2 el producto del tubo 3, colocando la mitad en un nuevo tubo (4) 7) Realizar la prueba de Fehling a los tubos 1 y 4. Añadir tanta cantidad de Fehling A+B como cantidad exista en el tubo resultado de la hidrólisis ácida. 8) A los tubos 2,3 y 5 añadir 3 gotas de Lugol. La presencia de color azul violáceo es interpretada como presencia de almidón (+).

 Cuestiones y Resultado: 1) ¿Qué función cumplen los tubos 2 y 5? 2) ¿Qué indica el cambio de color en los tubos (+) y el que no haya cambiado en los tubos (-)? 3) ¿La sacarosa da positivo frente a la prueba de Fehling? Representa, dibujando las

moléculas, el proceso sufrido por la sacarosa del tubo 1 y señala el carbono responsable del cambio de comportamiento frente al Fehling antes y después de la hidrólisis.

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