Giovani Daniel Olvera Cardenas Previo de microbilogia I
15/sep/14
cultivo con agar
Axenico: Un cultivo axénico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una sola célula. Los cultivos axénicos son muy extraños en
la naturaleza. En los medios naturales como por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano. Existen cultivos mixtos. Selectivo: es un medio de cultivo en el que solo puede crecer un tipo de microorganismo. Diferencial: es un medio de cultivo que es capaz de distinguir dor microorganismos por su crecimiento diferencial en el mismo, usando sus
propiedades metabólicas. Medio Caldo tetrationato
Microorganismos
Composición del medio
Forma de Preparación
Interpreta ción
Enriquecimiento selectivo de Salmonella
Peptona, sales biliares, carbonato de calcio, tiosulfato de sodio
El caldo se observa turbio después de incubación (crecimiento de Samonella)
Agar Bismuto Sulfito
Salmonella typhi y otras enterobacterias
Agar Baird Parker
Staphylococcus
Extracto de carne, caseína, peptona, dextrosa, fosfato de sodio, sulfato ferroso, indicador de sulfito de bismuto, agar, verde brillante Peptona de caseína, extracto de carne, extracto de levadura, cloruro de litio, glicina, piruvato de sodio, agar
46 g en 1 litro de agua destilada. Calentar con agitación y llevar a ebullición, enfriar a 45°C y agregar 20 ml de sol ución iodurada (no esterilizar en autoclave) 45.5g en agua destilada, calentar agitando hasta ebullición, vaciar en placa (no esterilizar en autoclave)
60 g 940 ml de agua destilada, calentar agitando hasta ebullición y disolución total. Esterilizar en autoclave 121 ºC/15 min, Enfriar a 45°-50°C y agregar 50 ml de emulsión de yema de huevo y 10 ml de la solución de telurito
Las colonias de Salmonella typhi son marrones o negras, con brillo metálico alrededor de las colonias (la mayoría de veces) -
negro. Bacterias que no reducen el telurito de potasio: colonias del color del medio, transparentes.
Caldo LMX-Fluorocult
Escherichia coli y otros coliformes
Triptosa, NaCl, sorbitol, triptófano, fosfato hidrogenado dipotásico, fosfato dihidrogenado de potasio, lauril sulfato de sodio, 5-bromo-4cloro- 3-indolil-ß-Dgalactopiranósido (X-GAL), 4metilo- belliferyl-ß-Dglucurónido (MUG), 1-isopropilß-D-1- tiogalactopiranósido (IPTG)
17 g en 1 litro de agua destilada, calentar a ebullición para disolución completa, distribuir en tubos de 20mL, esterilizar en autoclave a 121ºC/15 minutos
halo claro alrededor de la colonia. a: ausencia de halo claro Presencia de coliformes: vire del caldo a verde/azul Presencia de E. coli: el medio se vuelve fosforescente con luz UV Presencia de E. coli: Anillo rojo al añadir reactivo de Kovacs (reacción de indol positiva)
Giovani Daniel Olvera Cardenas Previo de microbilogia I
15/sep/14
cultivo con agar
Agar Chromocult
Coiformes
Peptona, NaCl, fosfato dihidrogenado de potasio, fosfato hidrogenado dipotásico, piruvato de sodio, triptófano, agar, sorbitol, Tergitol®, mezcla cromogénica
26.5 g en 1 litro de agua destilada, calentar en baño maría por 35 minutos agitando, no esterilizar en autoclave, no sobre calentar
E. coli: Colonias azul oscuro a violeta Coliformes totales: Colonias salmón a colonias y azul oscuro a colonias de color violeta (E. coli). Otros Gram-negativos: colonias incoloras, a excepción de algunos organismos que poseen actividad ß-D-glucuronidasa.
Caldo BHI
Enriquecimiento para bacterias de difícil crecimiento y algunos hongos
Infusión cerebro corazón, tejido animal de digestión pancreática, gelatina de digestión pancreática, NaCl, Dextrosa y fosfato disódico. Extracto de carne pluripeptona, cloruro de sodio, lactosa, sacarosa, glucosa, sulfato de hierro y amonio, tiosulfato de sodio, rojo de fenol, agar
Suspender 37 g en 1 litro de agua destilada, calentar a ebullición por 1 minuto, esterilizar en autoclave a 121ªC/15 minutos
C
62,5 g 1 litro de agua destilada, calentar con agitación frecuente a ebullición
35 g en 1 litro de agua destilada, calentar agitando a ebullición completa. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar y dejar solidificar en posición inclinada (pico de flauta profundo). 68.5 g en un litro de agua destilada, calentar a ebullición hasta disolución completa, no esterilizar en autoclave
Vire del medio a rojo: Ácido/Ácido: positivo a lactosa, sacarosa y glucosa Alcalino/ácido: positivo a sacarosa y glucosa Alcalino/alcalino: negativo a fermentación de azúcares Precipitado negro: positivo a producción de ácido sulfhídrico Burbujas de aire/medio deshecho: positivo a producción de Gas Vire del medio a lila/morado: positivo. Sin cambios: negativo
Agar TSI
Prueba bioquímica para enterobacterias
Agar LIA
Prueba bioquímica para enterobacterias
Peptona de gelatina, Extracto de levadura, Glucosa, Lisina, Citrato de hierro y amonio, Tiosulfato de sodio, Púrpura de bromocresol, Agar
Agar Entérico Hektoen
Selectivo de Salmonella y Shigella
Extracto de levadura, Sales biliares, Lactosa, Sacarosa, Salicina, Cloruro de sodio, Tiosulfato de sodio, Citrato de hierro y amonio, Agar, Azul de bromotimol, Fucsina ácida
Agar EMB
Enterobacterias
llenandolos con un volumen que ocupe hasta la tercera parte de los mismos. Esterilizar en autoclave a 121°C por 15 minutos. Enfriar y dejar solidificar el agar en pico de flauta profundo.
36 g en 1 litro de agua destilada, calentar
Shigella spp.: Salmonella spp.:Colonias azules-
verdes con o sin centros negros Coliformes: -rosa hasta naranja rodeadas de una precipitación biliar Microorga
Giovani Daniel Olvera Cardenas Previo de microbilogia I
15/sep/14
cultivo con agar eosina, azul
de metileno, agar
con agitación frecuente y llevar a ebullición hasta su disolución total. Esterilizar en autoclave 121°C durante 15 minutos
Microorganismos no fermentadores de lactosa y sacarosa: colonias del color del medio, incoloras.
