Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Garcia Felipe Ignacio Gerardo Grupo 4QM1 Sección 3
actividad de una transaminasa presente en un extracto crudo de h2gado empleando un m*todo cromatográfico y otro espectrofotómetrico
Practica No ! REACCION DE TRANSAMINACION Y SU RECONOCIMIENTO POR MEDIO DE CROMATOGRAFIA EN PAPEL INTRODUCCION Una reacción de transaminación es la primera etapa de la desasimilación de los aminoácidos, y sirve para encauzar los grupos amino hacia el α-cetoglutarato, para transformarlo en glutamato que posteriormente será sometido a una reacción de desaminación oxidativa, catalizada por la glutamato deshidrogenasa, formándose un ión amonio que será utilizado para generar urea.
RESULTADOS
Tabla 1 Curva tipo acido lut!"ico Acido lut!"ic o #$l% Ab)orb* +cia Acido lut!"ic o #$"ol*)%
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1'
1&
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"3# 4 "1
"3$ % " %
"$1 1 "3
"$4 3 "4
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Gra,ca 1 Curva tipo acido lut!"ico
La reacción catalizada por las transaminasas es la siguiente aminoácido !"# $ α-cetoácido !"# %&&' αcetoácido !(# $ aminoácido !(# )n las c*lulas existen muchos tipos de transaminasas que utilizan el αcetoglutarato como aceptor del grupo amino, pero se diferencian entre ellas por la especificidad respecto al aminoácido utilizado. Las reacciones catalizadas por tales enzimas son fácilmente reversi+les !su constante de equili+rio, de hecho, está muy cercana a "#. )/01 )l alumno realizará un m*todo cuantitativo para medir la
Problema=|testigo|−| Problema|
Problema=2.420−0.840 Problema=1.580
y =mx + b y =0.737 x + 0.2683
x = x =
y −0.2683 0.737
1.580−0.2683 0.737
=2.5078
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Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Garcia Felipe Ignacio Gerardo Grupo 4QM1 Sección 3
resultados no hay gran discrepancia entre la alanina y el testigo. Las muestras que utilizamos del papel 6hatman, se fragmentan para cuantificar la concentración de los analitos por el m*todo espectrofotom*trico. Las muestras de acido glutámico a diferentes concentraciones, sirven para realizar la curva tipo, esta nos permite compara nuestra prue+a. )n este caso la prue+a tiene una gran concentración de acido glutámico, lo que evidencia el efecto de la transferasa so+re la alanina y el acido α-cetoglutaric
Gra,ca ( Curva tipo acido lut!"ico co+ Probl*"a
CONCLUSIONES
Tabla ( R-. Cro"atora"a M(E S)*+
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.a trans/erasa trans2ere un grupo aino de un ainocido a un 50cetoacido aceptor6 dando coo resultado la /oración de un nue7o ainocido 8 un nue7o cetoacido
/I/LIOGRAFIA DISCUSIONES 3 partir partir de una una preparación preparación cruda cruda de transaminasa, se compro+ó el efecto so+re la 3lanina y el acido αcetoglutarico. 4a+iendo que la transferasa en la alanina va a transferir su grupo α-amino, al car+ono α de la αcetoglutarato con la intervención del piridoxal fosfato como coenzima, formando as2 el glutamato y el αcetoalaninato. 5ara corro+orar esto se efectuó una cromatograf2a en papel 6hatman, poniendo de manifiesto el acido glutámico en diferentes cantidades, además de colocar la muestra pro+lema con su respectivo testigo, y una muestra
1e8ar 9ivera )va 0rma, 5rácticas de ioqu2mica descriptiva, (da )dición, )ditorial U:04:, ;*xico (<<=, pp. "=(,"=>.
