BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Latar Belakan Belakang g Mikroorganisme yang ada di alam ini mempunyai morfologi, struktur dan
sifat-sifat yang khas, termasuk bakteri. Bakteri yang hidup hampir tidak berwarna dan kontras dengan air, dimana sel-sel bakteri tersebut disuspensikan. Salah satu cara untuk melihat dan mengamati bentuk sel bakteri dalam keadaan hidup sangat suli sulit, t, sehi sehingg nggaa untu untuk k diid diiden enti tifi fika kasi si iala ialah h denga dengan n meto metode de peng pengeca ecata tan n atau atau pewarnaan sel bekteri, sehingga sel dapat terlihat jelas dan mudah diamati. Hal tersebut tersebut juga berfungsi untuk mengetahui mengetahui sifat sifat fisiologis fisiologisnya nya yaitu yaitu mengetahui mengetahui reaksi dinding sel bakteri melalui serangkaian pengecatan. Oleh karena itu teknik pewarnaan sel bakteri ini merupakan salah satu cara yang paling utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi. Mikroba sulit dilihat dengan cahaya karena tidak mengadsorbsi atau membiaskan cahaya. lasan inilah yang menyebabkan !at warna digunakan untuk mewarnai mikroorganisme. "at warna mengadsorbsi dan membiaskan cahaya sehingga kontras mikroba dengan sekelilingnya dapat ditingkatkan. #enggunaan !at warna memungkinkan pengamatan strukur seperti spora, flagela, dan bahan inklusi yng mengandung !at pati dan granula fosfat $%ntjang, &''() Melihat dan mengamati bakteri dalam keadaan hidup sangat sulit, kerena selain bakteri itu tidak berwarna juga transparan dan sangat kecil. *ntuk mengatasi hal tersebut maka dikembangkan suatu teknik pewarnaan sel bekteri, sehingga sel dapat terlihat jelas dan mudah diamati. sehingga teknik pewarnaan sel bakteri ini merupakan salah satu cara yang paling utama dalam penelitian penelitian mikrobiologi $+i!ki, &''). arakteris arakterisasi asi sifat biokomiawi $fisiologi) $fisiologi) bakteri bakteri juga tidak kalah penting penting misalnya dengan melakukan uji katalase dan uji motilitas. Oleh Oleh karena karena itu, itu, dalam dalam prakti praktikum kum ini, ini, kami kami akan akan melakuk melakukan an pewarn pewarnaan aan bakteri dengan berbagai macam pewarnaan, mulai dari pewarnaan sederhana, pewarnaan negatie dan pewarnaan /ram sehingga dapat mengetahui morfologi bakteri. Selain itu, kami juga akan melakukan uji katalase untuk mengetahui
bakteri tersebut obligat aerob atau anaerob dan uji motilitas untuk mengetahui bakteri tersebut motil atau immotile serta mengetahui pergerakan bakteri jika motil. 1.2 Rumusa Rumusan n Masalah Masalah A. Pewar Pewarnaa naan n sederha sederhana na 0. Bagaimanakah Bagaimanakah prosedur prosedur dan dan teknik teknik pewarnaan pewarnaan sederha sederhana na 1 &. Baga Bagaim iman anak akah ah bent bentuk uk sel sel bakt bakter erii yang yang tera terama mati ti mela melalu luii tekn teknik ik
pewarnaan sederhana 1 B. Pewar Pewarnaa naan n Nega Negati tiee 0. Baga Bagaim iman anak akah ah pros prosed edur ur dan dan tek tekni nik k pew pewar arna naan an nega negati tie e 1 &. Baga Bagaim iman anak akah ah bent bentuk uk sel sel bakt bakter erii yang yang tera terama mati ti mela melalu luii tekn teknik ik pewarnaan negatie 1 !. Pewar Pewarnaa naan n "r "ram am 0. Baga Bagaim iman anak akah ah pros prosed edur ur dan dan tekn teknik ik pewa pewarn rnaa aan n /ram /ram 1 &. Bagai agaim manak anakah ah dasa dasarr kim kimia pew pewar arna naan an /ram /ram 1 (. Bagaim Bagaimana anakah kah cara membeda membedakan kan kelompo kelompok k bakter bakterii /ram positif positif dan /ram negatie 1 D. U#i kata katalas lasee $akter $akterii 0. Bagaim Bagaimanak anakah ah prosed prosedur ur uji kata katalas lasee bakteri bakteri 1 &. Bagaim Bagaimanak anakah ah cara membedakan membedakan bakteri bakteri katalas katalasee positi positiff dan katala katalase se negatie 1 E. U#i m%tili m%tilitas tas $akte $akteri ri 0. Bagai agaim manak anakah ah pro prossedur edur uji uji mot motil ilit itas as bakt bakter erii 1 &. Bagai gaimanak nakah moti otilitas pada ada ba bakteri 1
1.& 'u 'u#uan #uan Praktikum Praktikum A . Pewarnaan sederhana
0. *ntuk mengetahui mengetahui prosed prosedur ur dan dan teknik teknik pewarnaa pewarnaan n sederhana. sederhana. &. *ntu *ntuk k menge mengeta tahui hui bentuk bentuk sel sel bakte bakteri ri yang yang tera terama mati ti mela melalu luii tekni teknik k pewarnaan sederhana. B. Pewarnaan Negatie
0.
*ntu *ntuk k men menge geta tahu huii pro prose sedu durr dan dan tekn teknik ik pewa pewarn rnaa aan n nega negati tif. f.
&. *ntuk mengetahui bentuk sel bakteri yang teramati melalui teknik pewarnaan negatif. !. Pewarnaan "ram 0. *ntuk mengetahui prosedur dan teknik pewarnaan /ram. &. *ntuk mengetahui dasar kimiawi pewarnaan /ram. (. *ntuk membedakan kelompok bakteri /ram positif dan /ram D. 0. &. E. 0. &.
negatie. U#i katalase $akteri *ntuk mengetahui prosedur uji katalase bakteri. *ntuk membedakan bakteri katalase positif dan katalase negatie. U#i m%tilitas $akteri *ntuk mengetahui prosedur uji motilitas bakteri. *ntuk mengetahui motilitas pada bakteri.
BAB II 'IN(AUAN PU)'A*A A. Pewarnaan )ederhana
#ewarnaan sederhana yaitu pewarnaan dengan menggunakan satu macam !at warna dengan tujuan hanya untuk melihat bentuk sel bakteri dan untuk mengetahui morfologi dan susunan selnya . pewarnaan ini dapat menggunakan pewarnaan basa pada umumnya antara lain kristal iolet , metylen blue , karbol fuchsin dan safranin $lay ,0223). #ewarnaan sederhana merupakan teknik pewarnaan yang paling banyak digunakan. 4isebut sederhana karena hanya menggunakan satu jenis !at warna untuk mewarnai organisme tersebut. ebanyakan bakteri mudah bereaksi dengan pewarnaan-pewarnaan sederhana karena sitoplasamanya bersifat basofilik $suka dengan basa). Berbagai macam tipe morfologi bakteri $kokus, basil, spirilum, dan sebagainya) dapat dibedakan dengan menggunakan pewarna sederhana, yaitu mewarnai sel-sel bakteri hanya digunakan satu macam !at warna saja. Sedangkan !at-!at warna yang digunakan untuk pewarnaan sederhana umumnya bersifat alkalin $komponen kromoforiknya bermuatan positif). 5ujuan pengecatan sederhana ini adalah untuk melihat bentuk sel. B. Pewarnaan Negati+
5ujuan pewarnaan negatif adalah untuk mempelajari penggunaan prosedur pewarnaan negatif untuk mengamati morfologi organisme yang sukar diwarnai oleh pewarna sederhana. Bakteri tidak diwarnai, tapi mewarnai latar belakang. 4itujukan untuk bakteri yang sulit diwarnai, seperti spirochaeta. #ewarnaan negatif, metode ini bukan untuk mewarnai bakteri tetapi mewarnai latar belakangnya menjadi hitam gelap. #ada pewarnaan ini mikroorganisme kelihatan transparan $tembus pandang). 5eknik ini berguna untuk menentukan morfologi dan ukuran sel. #ada pewarnaan ini olesan tidak mengalami pemanasan atau perlakuan yang keras dengan bahan-bahan kimia, maka terjadinya
penyusutan dan salah satu bentuk agar kurang sehingga penentuan sel dapat diperoleh dengan lebih tepat. Metode ini menggunakan cat nigrosin atau tinta cina. #ewarnaan negatif memerlukan pewarna asam seperti eosin atau negrosin.pewarna asam memiliki negatif charge kromogen, tidak akan menembus atau berpenetrasi ke dalam sel karena negatie charge pada permukaan bakteri. oleh karena itu, sel tidak berwarna mudah dilihat dengan latar belakang gelap. !. Pewarnaan "ram
#ewarnaan gram ini bertujuan untuk mlihat bakteri bersifat gram positif atau negatif dan bentuknya. #ewarnaan /ram atau metode /ram adalah suatu metode empiris untuk membedakan spesies bakteri menjadi dua kelompok besar, yakni gram positif dan gram negatif, berdasarkan sifat kimia dan fisik dinding sel mereka. Metode ini diberi nama berdasarkan penemunya, ilmuwan 4enmark Hans 6hristian /ram $07(802() yang mengembangkan teknik ini pada tahun 03 untuk membedakan antara pneumokokus dan bakteri lebsiella pneumoniae. #ada uji pewarnaan /ram, suatu pewarna penimbal $counterstain) ditambahkan setelah metil ungu, yang membuat semua bakteri gram negatif menjadi berwarna merah atau merah muda. #engujian ini berguna untuk mengklasifikasikan kedua tipe bakteri ini berdasarkan perbedaan struktur dinding sel mereka. 4alam pewarnaan gram diperlukan empat reagen yaitu 9 "at warna utama $iolet kristal), Mordan $larutan :odin) yaitu senyawa yang digunakan untuk mengintensifkan warna utama, pencuci ; peluntur !at warna $alcohol ; aseton) yaitu solen organic yang digunakan uantuk melunturkan !at warna utama, !at warna kedua ; cat penutup $safranin) digunakan untuk mewarnai kembali sel-sel yang telah kehilangan cat utama setelah perlakuan denga alcohol. a. Bakteri /ram
mempertahankan warna ungu gelap setelah dicuci dengan alcohol, sementara bakteri gram negatie tidak. 6iri-ciri bakteri gram negatif yaitu9 0. Struktur dinding selnya tipis, sekitar 0' 8 07 mm, berlapis tiga atau multilayer. &. 4inding selnya mengandung lemak lebih banyak $00-&&=), peptidoglikan terdapat didalam (. lapisan kaku, sebelah dalam dengan jumlah sedikit > 0'= dari berat kering, tidak mengandung asam tekoat. 3. urang rentan terhadap senyawa penisilin. 7. #ertumbuhannya tidak begitu dihambat oleh !at warna dasar misalnya kristal iolet. ?. +esistensi terhadap alkali $0= OH) lebih pekat @. 5oksin yang dibentuk %ndotoksin
b. Bakteri /ram #ositif Bakteri gram positif adalah bakteri yang mempertahankan !at warna metil ungu sewaktu proses pewarnaan /ram. Bakteri jenis ini akan berwarna biru atau ungu di bawah mikroskop, sedangkan bakteri gram negatie akan berwarna merah muda. #erbedaan klasifikasi antara kedua jenis bakteri ini terutama didasarkan pada perbedaan struktur dinding sel bakteri $ditya,&'0'). 6iri-ciri bakteri gram positif yaitu9 0.
Struktur dinding selnya tebal, sekitar 07-' nm, berlapistunggal atau monolayer.
&.
4inding selnya mengandung lipid yang lebih normal $0-3=), peptidoglikan ada yang sebagai lapisan tunggal. omponen utama merupakan lebih dari 7'= berat ringan. Mengandung asam tekoat. (. Bersifat lebih rentan terhadap penisilin. 3. #ertumbuhan dihambat secara nyata oleh !at-!at warna seperti ungu kristal. 7. omposisi nutrisi yang dibutuhkan lebih rumit.
?. Aebih resisten terhadap gangguan fisik. @. +esistensi terhadap alkali $0= OH) larut . 5idak peka terhadap streptomisin 2. 5oksin yang dibentuk %ksotoksin %ndotoksin
D. U#i katalase $akteri
*ji katalase pada suatu mikroba berguna untuk mengidentifikasi kelompok bakteri yang dapat menghasilkan en!im katalase. 6ara yang dilakukan adalah dengan meneteskan satu tetes H&O& (= pada biakan murni bakteri yang telah digoreskan pada kaca benda dengan menggunakan ose yang kemudian secara langsung diamati perubahan yang terjadi. $
E. U#i m%tilitas $akteri #ergerakan suatu bakteri dapat diamati dengan menggunakan metode yang
disebut D preparat basah tetes gantung D yaitu suatu metode yang dibuat dengan cara memberi setetes cairan yang mengandung mikroba $ aEuades F mikroba ) pada gelas penutup kemudian gelas penutup tersebut diletakkan pada gelas benda cekung dengan permukaan yang diberi tetesan menghadap ke bagian yang cekung. /erakan mikroba akan tampak pada preparat tersebut dan tidak berhamburan kemana-mana. Selain menggunakan metode ini, pergerakan bakteri dapat juga dilihat dengan menggunakan medium khusus yang disebut motility test medium. medium ini setengah padat sehingga arah pertumbuhan bakteri pada medium akan membentuk pola yang khas. 4ari pola pertumbuhan ini akan diketahui bakteri yang ditanam dapat bergerak atau tidak. $ sri,dkk., &'07 ) BAB III
ME',DE PENELI'IAN &.1 Alat dan Bahan A. Pewarnaan sederhana 'a$el 1. lat dan bahan pewarnaan sederhana N%.
Alat
Bahan
0.
#embakar spiritus
Biakan bakteri
&.
Garum inokulasi
Methylene blue
(.
Mikroskop
lcohol
3.
kaca benda
Spiritus
7.
5issue
Euades steril
?.
pipet
-
B. Pewarnaan negatie 'a$el 2. lat dan bahan pewarnaan negatie N%.
Alat
Bahan
0.
#embakar spiritus
Biakan bakteri
&.
Garum inokulasi
(.
Mikroskop
lcohol
3.
kaca benda
Spiritus
7.
5issue
Euades steril
?.
pipet
-
!. Pewarnaan "ram 'a$el &. lat dan bahan pewarnaan /ram N%.
Alat
Bahan
0.
#embakar spiritus
Biakan bakteri
&.
Garum inokulasi
6rystal iolet
(.
Mikroskop
/rams :odine
3.
aca benda
lkohol 27 =
7.
tissue
Safranin
?.
pipet
lcohol
@.
-
Spiritus
.
-
Euades steril
D. U#i katalase 'a$el -. lat dan bahan uji katalase bakteri. N%.
Alat
Bahan
0.
#embakar spiritus
Biakan bakteri
&.
Garum inokulasi
H&O& (=
(.
Mikroskop
lcohol
3.
kaca benda
Euades steril
7.
5issue
-
?.
pipet
-
E. U#i m%tilitas 'a$el . lat dan bahan uji motilitas bakteri N%.
Alat
Bahan
0.
#embakar spiritus
Biakan bakteri
&.
Garum inokulasi
Euades steril
(.
Mikroskop
lcohol
3.
kaca benda cekung
Spiritus
7.
5issue
-
?.
aca penutup
-
@.
pipet
-
.
spet
-
&.2 !ara *er#a A. Pewarnaan sederhana 0. Mengambil kaca benda dan membersihkannya dengan menggunakan
alcohol. &. Memberi satu tetes aEuades steril pada kaca benda.
(. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. 3. Mensuspensikan dengan aEuades pada kaca benda. 7. Mengeringanginkan preparat sebagai salah satu cara fiksasi bakteri. ?. Menetesi preparat kering dengan methylene blue. @. Membiarkan selama 0 menit. . Mencuci dengan air mengalir. 2. Mengeringkan preparat dan mengamati di bawah mikroskop. B. Pewarnaan negatie 0. Mengambil kaca benda dan membersihkan dengan menggunakan alcohol. &. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose dan meletakkan di ujung kaca benda. (. Memberi satu tetes nigrosin pada biakan bakteri di kaca benda. 3. Meratakan nigrosin F bakteri dengan menggunakan kaca benda. 7. Mengeringanginkan preparat pewarnaan negatie. ?. Mengamati di bawah mikroskop. !. Pewarnaan "ram 0. Mengambil kaca benda dan membersihkan dengan menggunakan alcohol. 2. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. (. Mewarnai dengan menggunakan crystal iolet dan membiarkan selama 0 3. 7. ?. @.
menit. Mencuci dengan air mengalir. Menambahkan /rams iodine dan membiarkan selama 0 menit. Mencuci dengan air mengalir. Menambahkan grams :odine 27 = setetes demi setetes sampai tidak ada
pewarna yang tersisa. . Mencuci dengan menggunakan air mengalir. 2. Mewarnai dengan pewarna penutup safranin dan membiarkan selama 0 menit. 0'. Mencuci dengan menggunakan air mengalir. 00. Mengeringanginkan preparat dan mengamati di bawah mikroskop. D. U#i katalase 0. Membersihkan kaca benda dengan alcohol &. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. (. Menetesi dengan H&O& (= . 3. Mengamati terbentuknya gelembung dibawah mikroskop. E. U#i m%tilitas 0. Membersihkan kaca benda cekung dan gelas penutup dengan aEuades steril. &. Memberi satu tetes aEuades steril pada kaca penutup. (. Menambahkan biakan bakteri pada tetesan aEuades pada kaca penutup. 3. Meletakkan gelas penutup pada kaca benda cekung dengan posisi cairan menghadap pada cekungan kaca benda.
7. Mengamati pergerakan mikroba di bawah mikroskop.
BAB I/ HA)IL DAN PEMBAHA)AN 1.1 Hasil Pengamatan A. Pewarnaan sederhana 'a$el 0. 1 Hasil pengamatan pewarnaan sederhana pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. :rine +istiana M. $03'('&'3'??) #ewarna
Methlene $lue
/ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
Streptobacillua
Jarna sel
Biru
'a$el 0. 2 Hasil pengamatan pewarnaan sederhana pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. +ia :ndi +. $03'('&'3'() #ewarna /ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel
Methlene $lue
'a$el 0. & Hasil pengamatan pewarnaan sederhana pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. ida husnia $03'('&'3'3) #ewarna
Methlene $lue
/ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel
'a$el 0. - Hasil pengamatan pewarnaan sederhana pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. Berliana Oka irana #utri $03'('&'3'2) #ewarna
Methlene $lue
/ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
4iplobacillus
Jarna sel
Biru
'a$el 0. Hasil pengamatan pewarnaan sederhana pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. %ringga Baharuddin $03'('&'3'22)
#ewarna
Methlene $lue
/ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel
B. Pewarnaan negatie 'a$el . 1 Hasil pengamatan pewarnaan negati pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. :rine +istiana M. $03'('&'3'??) #ewarna
Nigr%sine
/ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
Monobacillus
Jarna sel
5ransparant
'a$el . 2 Hasil pengamatan pewarnaan negati pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. +ia :ndi +. $03'('&'3'()
#ewarna
Nigr%sine
/ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel
'a$el . & Hasil pengamatan pewarnaan negati pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. ida husnia $03'('&'3'3) #ewarna
Nigr%sine
/ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
6occus
Susunan sel
Monococcus
Jarna sel
transparant
'a$el . - Hasil pengamatan pewarnaan negati pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. Berliana Oka irana #utri $03'('&'3'2) #ewarna /ambar organisme representatif
Nigr%sine
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
4iplobacillus
Jarna sel
5ransparan
'a$el . Hasil pengamatan pewarnaan negati pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. %ringga Baharuddin $03'('&'3'22) #ewarna
Nigr%sine
/ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel
!. Pewarnaan "ram 'a$el 3. 1 Hasil pengamatan pewarnaan /ram pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. :rine +istiana M. $03'('&'3'??) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
Streprobacillus
Jarna sel
Merah
/ram
'a$el 3. 2 Hasil pengamatan pewarnaan /ram pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. +ia :ndi +. $03'('&'3'() /ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel /ram
'a$el 3. & Hasil pengamatan pewarnaan /ram pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. ida husnia $03'('&'3'3) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
4iplobacillus
Jarna sel
*ngu
/ram
#ositif
'a$el 3. - Hasil pengamatan pewarnaan /ram pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. Berliana Oka irana #utri $03'('&'3'2) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
Bentuk sel
Basil
Susunan sel
4iplobacillus
Jarna sel
merah
/ram
negatif
'a$el 3. Hasil pengamatan pewarnaan /ram pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. %ringga Baharuddin $03'('&'3'22)
/ambar organisme representatif Mikroorganisme Bentuk sel Susunan sel Jarna sel /ram
D. U#i katalase $akteri 'a$el 4. 1 Hasil pengamatan uji katalase bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. :rine +istiana M. $03'('&'3'??) /ambar organisme representatif Mikroorganisme katalase
'a$el 4. 2 Hasil pengamatan uji katalase bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. +ia :ndi +. $03'('&'3'() /ambar organisme representatif Mikroorganisme katalase
'a$el 4. & Hasil pengamatan uji katalase bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. ida husnia $03'('&'3'3)
/ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
katalase
negatif
'a$el 4. - Hasil pengamatan uji katalase bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. Berliana Oka irana #utri $03'('&'3'2) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
katalase
negatif
'a$el 4. Hasil pengamatan uji katalase bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. %ringga Baharuddin $03'('&'3'22) /ambar organisme representatif Mikroorganisme katalase
E. U#i m%tilitas $akteri
'a$el 15. 1 Hasil pengamatan uji motilitas bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. :rine +istiana M. $03'('&'3'??) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
motilitas
immotil
'a$el 15. 2 Hasil pengamatan uji motilitas bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. +ia :ndi +. $03'('&'3'() /ambar organisme representatif Mikroorganisme
Bakteri
motilitas
immotil
'a$el 15. & Hasil pengamatan uji motilitas bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. ida husnia $03'('&'3'3) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
Bakteri
motilitas
immotil
'a$el 15. - Hasil pengamatan uji motilitas bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. Berliana Oka irana #utri $03'('&'3'2) /ambar organisme representatif
Mikroorganisme
bakteri
motilitas
:mmotile
'a$el 15. Hasil pengamatan uji motilitas bakteri pada mikroskop dengan
perbesaran 3'I0'. %ringga Baharuddin $03'('&'3'22) /ambar organisme representatif Mikroorganisme katalase BAB V PENUTUP
.1
)im6ulan
dapun simpulan ini akan menyajikan jawaban dari rumusan masalah yang telah kami tuliskan. Simpulan dalam praktikum kali ini adalah 9 A. Pewarnaan sederhana 0. prosedur pewarnaan sederhana adalah 9 a. Mengambil kaca benda dan membersihkannya dengan menggunakan
alcohol. b. Memberi satu tetes aEuades steril pada kaca benda. c. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. d. Mensuspensikan dengan aEuades pada kaca benda. e. Mengeringanginkan preparat sebagai salah satu cara fiksasi bakteri. f. Menetesi preparat kering dengan methylene blue. g. Membiarkan selama 0 menit. h. Mencuci dengan air mengalir. i. Mengeringkan preparat dan mengamati di bawah mikroskop. &. Bentuk sel bakteri yang kami peroleh adalah 9 Basil dan coccus B. Pewarnaan negatie 0. prosedur pewarnaan negatif adalah 9 a. Mengambil kaca benda dan membersihkan dengan menggunakan
alcohol. b. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose dan meletakkan c. d. e. f.
di ujung kaca benda. Memberi satu tetes nigrosin pada biakan bakteri di kaca benda. Meratakan nigrosin F bakteri dengan menggunakan kaca benda. Mengeringanginkan preparat pewarnaan negatie. Mengamati di bawah mikroskop.
&. bentuk bakteri yang kami peroleh dari pewarnaan negatie adalah 9 basil dan coccus !. 6ewarnaan "ram 0. prosedur pewarnaan /ram adalah 9 a. Mengambil kaca benda dan membersihkan dengan menggunakan
alcohol. $. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. c. Mewarnai dengan menggunakan crystal iolet dan membiarkan selama 0 menit. d. Mencuci dengan air mengalir. e. Menambahkan /rams iodine dan membiarkan selama 0 menit. f. Mencuci dengan air mengalir.
g. Menambahkan grams :odine 27 = setetes demi setetes sampai tidak ada pewarna yang tersisa. h. Mencuci dengan menggunakan air mengalir. i. Mewarnai dengan pewarna penutup safranin dan membiarkan selama 0 menit. j. Mencuci dengan menggunakan air mengalir. k. Mengeringanginkan preparat dan mengamati di bawah mikroskop. &. 4asar kimiawi pewarnaan gram adalah 9 menggunakan pewarna crystal iolet, /rams iodine, lkohol 27 = dan Safranin (. 6ara membedakan bakteri /ram positif dan /ram negatie adalah 9 apabila /ram positif, maka warna akhir dari pewarnaan bakteri adalah ungu sedangkan untuk /ram negatie, warna akhir dari pewarnaan adalah merah muda sampai merah. D. U#i katalase $akteri 0. prosedur uji katalase bakteri adalah 9 a. Membersihkan kaca benda dengan alcohol b. Mengambil biakan bakteri dengan menggunakan ose. c. Menetesi dengan H&O& (= . d. Mengamati terbentuknya gelembung dibawah mikroskop.
&. Bakteri katalase positif adalah bakteri yang menghasilkan en!im katalase yang ditandai dengan adanya gelembung udara $ O& ) yang dapat di lihat pada preparat pengamatan. Sedangkan untuk bakteri katalase negatie adalah bakteri yang tidak ditemukan adanya gelembung udara $ O& ) pada saat pengamatan preparat yang menandakan bahwa bakteri tersebut tidak menghasilkan en!im katalase. E. U#i m%tilitas $akteri 0. prosedur uji katalase bakteri adalah 9 a. Membersihkan kaca benda cekung dan gelas penutup dengan aEuades
steril. b. Memberi satu tetes aEuades steril pada kaca penutup.
c. Menambahkan biakan bakteri pada tetesan aEuades pada kaca penutup. d. Meletakkan gelas penutup pada kaca benda cekung dengan posisi cairan menghadap pada cekungan kaca benda. e. Mengamati pergerakan mikroba di bawah mikroskop. &. motilitas bakteri pada pengamatan kelompok kami adalah immotile yang berarti tidak adanya pergerakan bakteri. .2 )aran Praktikan harus menguasai prosedur praktikum dengan benar baik dalam praktikum pewarnaan sederhana, negative, pewarnaan gram, uji katalase dan uji motilitas. Serta harus cekatan, teliti dan selalu menerapkan teknik aseptis pada alat, bahan, tempat praktikum maupun diri praktikan baik sebelum, selama atau sesudah kegiatan praktikum untuk mencegah terjadinya kontaminasi.
DA7'AR PU)'A*A
sri, Mahanani 5ri, /untur 5rimulyono, dan Aisa Aisdiana. &'07. Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Dasar. Surabaya 9 KM:# *nesa :brahim, Muslimin. &''@. Mikrobiologi, Prinsip dan Aplikasi. Surabaya9 *nesa #ress. Marlina, &''. :dentifikasi bakteri Vibrio parahaemolitycus dengan metode biolog dan deteksi gen ToxR nya secara #6+. urnal !ains dan Teknologi "armasi, Lol 0(.
