PRACTICA Nº 5. PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR
INTRODUCCION Toda célula posee un sistema complejo de membranas cuya función es el intercambio de materiales, entre la célula y el medio acuoso externo o fluido extracelular y entre los organelos y la célula, sirve como medio de compartición entre el interior celular y sus metabolitos. Se entiende por osmosis el paso de sustancias a través de membranas semipermeable que separa dos soluciones de diferente concentración. Como el agua es el solvente universal tiende a difundirse desde un volumen de agua pura hasta una solución químicamente mas concentrada, o en otros términos se refiere a un fenómeno de difusión de agua a través de una membrana, desde la región de mayor potencial de agua (agua pura o la solución más diluida o hipotonica) a la región de menor potencial de agua (solución más concentrada químicamente o hipertonica). Estos fenómenos son de gran importancia biológica, porque mediante ellos se logra en parte llevar a cabo procesos de trasporte e intercambio de sustancias. OBJETIVOS
Observar y analizar procesos de osmosis y calcular porcentaje de plasmólisis en las células vegetales, según soluciones de concentraciones diferentes.
MATERIALES Y REACTIVOS (con * deben ser traídos por el estudiante) *Hojas de elodea (es una planta de acuario), microscopios, agua destilada, soluciones de glucosa o sacarosa y de NaCl con las siguientes concentraciones: 0,01 – 0,05 – 0,15 – 0,25 – 0,40M (Molar), *lápiz de cera (opcion, lápiz fino para ojos), *pinzas de diseccion.
Pinzas de disección
Lápiz de cera
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PROCEDIMIENTO Plasmolisis en Células Vegetales Tome 11 láminas y a cada una de ellas en el lado derecho con el lápiz de cera márquelas con el tipo de solución y su concentración, es decir 5 para solución de azúcar y 5 para solución salina, y una para agua de acuario. En el lado izquierdo de cada lámina coloque dos o tres gotas de solución según el marcaje realizado anteriormente, y sobre estas gotas una hoja joven de elodea (se extrae del apice del tallo), luego cubra el montaje con una laminilla. No permita que se moje la lamina por debajo, si esto sucede, séquela con papel absorbente; tampoco permita que se seque el liquido en los montajes. A los 5 minutos de haber colocado las hojas, inicie la observación con la solución de azúcar 0,05M, observe al microscopio las células que están en el campo de visión, y determine si hay separación de la membrana con respecto a la pared celular. Para determinar si la membrana se separa de la pared y en qué porcentaje (plasmolizacion de la celula), se utilizan los cloroplastos como indicadores de este fenómeno, ya que estos están distribuidos hacia la periferia de la membrana. Igualmente, para efectos prácticos se debe considerar que una solución de determinada concentración produce plasmolisis si el 50% de las células observadas en el campo de visión están plasmolisadas. De acuerdo con lo anterior debe determinar el porcentaje de células plasmolisadas y el porcentaje de plasmolizacion de las celulas en cada preparado. Por ejemplo: en un preparado se puede observar el 40% de células plasmolisadas en un 70% de plasmolizacion en cada una.
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Compare su observación con el control, es decir, agua de acuario. Repita el procedimiento con las otras concentraciones.
A partir de que concentración observo plasmolisis? Cuales concentraciones resultaron hipotónicas, cuales hipertónicas y cuales isotónicas? Solución Glucosa
% Cel Plasmolisadas
% Plasmolizacion
La Solucion es…
0,01M 0,05M 0,15M 0,25M 0,40M Solución Salina
0,01M 0,05M 0,15M 0,25M 0,40M
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CUESTIONARIO 1. Defina: Gradiente de concentración Difusión Osmosis Presión osmótica Plasmólisis Citolisis Solución hipotónica, isotónica e hipertónica 2. ¿Qué diferencias hay entre ósmosis y difusión? 3. ¿Qué diferencias hay entre transporte activo y pasivo? 4. Esquematice el antes y el después de una célula en un medio hipertónico ¿Qué le sucede en ultimo termino? 5. Esquematice el antes y el después de una célula en un medio hipotónico ¿Qué le sucede en ultimo termino?
BIBLIOGRAFÍA HUMPHRY, D. G, DYKE, H. Van & WILLIS, D. 1969. Life in the laboratory. Hercourt, Brace & World. N.Y. JAMES, O.W. 1967. Introducción a la fisiología vegetal. Ediciones Omega. Barcelona KIMBALL, J.W. 1982. Biología 4a edición. Fondo Educativo Interamericano S.A. México. MOORE, T. 1974. Research experiences in plant Phisiology. A laboratory manual. Springer – Verlag. Heidelberg. SALOM, F. & CANTARINO, M.H. 1979. Curso de prácticas de biología general. H. Blume. Ediciones Madrid.
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