INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA LABORATORIO DE ECOLOGIA MICROBIANA
PRACTICA 5. DIVERSIDAD MICROBIANA EN SUELO. LABORATORIO 1
GRUPO 4QM1
OBJETIVO
Determinar la diversidad de algunos grupos microbianos en una muestra de suelo rizosférico. Comparar la diversidad microbiana de diferentes comunidades (muestras de suelo dela practica de campo) mediante la aplicación de índices de similitud .
RESULTADOS Tabla 5.1 Calculo del porcentaje de humedad de estación siete: % Humedad = [(Pi-Pf)/10] x100
Pi= Peso Inicial 97.4g. Pf= Peso Final 95.4 g. % Humedad= [(97.4 gr 95.4 gr)/10] x 100 –
= 20% Tabla 5.2 Cálculo del porcentaje de humedad de suelo en estación tres:
%Humedad = {Pi 10− Pf }X100 %Humedad = {96.910− 96.1} X100 X100 = 8% UFC en (B.H 1 1 ) B. H = No.de colonias X g dilución
UFC en (B.S) = UFC g 1 − %H
Tabla 5.3 Parámetros fisicoquímicos del suelo de las diferentes estaciones.
Tablas 5.4 Cuantificación (UFC/g de Suelo) De Los Diferentes Grupos Microbianos
Tabla 5.5 Morfología Colonial de las Cepas Dominantes de Bacterias Mesofilicas Aerobias En Agar CPS-EL Característica
Colonia 1
Colonia 2
Colonia 3
Color
Blanca
Blanca
Blanca
Tamaño
2mm
1mm
3mm
Forma
Circular
Circular
Miceloide
Bordes
Entero
Entero
Irregular
Elevación
Convexa
Convexa
Plano difusa
Luz Reflejada
Brillante
Brillante
Mate
Luz Transmitida
Translúcida
Translúcida
Translucida
Superficie
Lisa
Lisa
Finamente granular
Aspecto
Húmeda
Húmeda
Seca
Elevación
Papilad
Convexa
a Consistencia
Suave
Suave
Duro
Pigmento
No
No
No
Difusible
Plano
Bajo
difusa
convexa
Luz Reflejada
Mate
Brillante
Mate
Brillante
Luz
Translu
Opaca
Translu
Opaca
Transmitida
cida
Superficie
Arbore
cida Lisa
Arbore
scente
Lisa
scente
Aspecto
Seco
Húmedo
Seca
Húmedo
Consistencia
Duro
Suave
Suave
Suave
Pigmento Difusible
No
No
No
No
ABUNDANCIA Y DIVERSIDAD ENTRE EL MEDIO CPS-EL Y EL MEDIO AAP (COMPARACIÓN). Tabla 5.6 Morfología Colonial De Los Diferentes Grupos Microbianos Característica
Actino micetos
Pseudomonas fluorescentes
Bacillus spp
Bacterias Corinefor mes
Color
Blanca
Beige
Blanca
Morado +++
Tamaño
2mm
4mm
15mm
Puntiform e
Forma
Irregul
Circular
Rizoide
ar Bordes
Ondula do
Puntiform e
Entero
Irregula r
El medio agar caseína peptona almidón con extracto de levadura presenta mayor abundancia en microorganismos porque el extracto de levadura es un factor de crecimiento, haciendo a éste un medio muy nutritivo. El medio agar almidón peptona permite el desarrollo de mayor diversidad de m.o.´s porque contiene glicerol que puede funcionar como otra fuente de carbono además de almidón, y contiene moléculas que funcionan como aceptores de electrones además del oxígeno, como: azufre y fósforo.
Entero
COEFICIENTE DE SIMILITUD.
Sitio de muestreo Ecosistema Ecosistema Ecosistema Ecosistema Ecosistema Ecosistema Ecosistema Ecosistema
1 2 3 4 5 6 7 8
Colonia 1 + + + -
Colonia 2 + -
Colonia 3 + + + + + + + +
Colonia 4 + + + + + +
Colonia 5 + + + + + + + -
Colonia 6 + + + + +
Colonia 7 + + + + + + +
Colonia 8 + + + + + + + +
Sumatoria
6 7 7 4 5 6 5 5
DENDOGRAMA.
DISCUSIÓN. En cada estación el suelo tiene humedad en distintos porcentajes y por ésta razón no podrían hacerse comparaciones entre ellos, la solución está en recurrir a calcular el peso de suelo en base seca, es decir despreciando la humedad. En la prueba y conteo de microorganismos en las diferentes estaciones, se observa una cantidad mayor de microorganismos en el suelo de la zona en donde principia el cuerpo de agua analizado, que en la última zona de suelo analizado, esto puede explicarse porque el agua influye en este proceso de dispersión de microorganismos en suelo, y estos se van estancando a lo largo de todo el tramo recorrido. El suelo funciona a manera de filtro o barrera física. La observación anterior tiene dos excepciones: hongos filamentosos y bacterias corineformes. Los hongos no requieren de tanta humedad para tener un desarrollo óptimo, por ejemplo; en la estación 3 se forma una cascada y la humedad es muy alta, no presentó una
cantidad alta de UFC´s comparando con otras estaciones. En las diferentes estaciones se observan características fisicoquímicas muy semejantes. En general, se observa que la temperatura se mantiene casi constante en todas las estaciones. Está temperatura que oscila en los 16º parece ser favorable para el crecimiento de los diferentes microorganismos, aunque en la literatura se habla de una temperatura óptima de 20 a 30º, lo cual no era posible por la estación del año en la que nos encontramos.
CONCLUSIÓN. •Existe
una gran diversidad de microorganismos en una muestra de suelo rizosférico de las cascadas de Atlihuetzia, Tlaxcala. Los índices de similitud de las muestras se hacen en función de la coincidencia de presencia y de abundancia de las •
características del par de comunidades que se comparan. •La
diversidad microbiana en las diferentes estaciones es muy grande obteniéndose el mayor índice de similitud entre 1 y 3.
CUESTIONARIO. 1.- ¿En qué tipo de suelos predominan los hongos y los actinomicetos y por qué? En suelo rizosférico ya que las plantas absorben del suelo por medio de sus raíces agua y nutrientes entonces es justo donde se concentran, alrededor de las raíces estando disponibles también para los microorganismos que habitan ahí, además los actinomicetos al fijar nitrógeno y los hongos al descomponer materia orgánica proporcionan los nutrientes de forma simple para las plantas. Algunas plantas producen sustancias que benefician el crecimiento de hongos y actinomicetos además de brindarles un ambiente adecuado y en algunos casos protección frente a otros microorganismos.
2.- ¿A qué puede atribuirse la dominancia de ciertas bacterias sobre otras poblaciones en su muestra de suelo? A que estas poblaciones dominantes pueden ser autóctonas de ese hábitat por lo tanto son capaces de crecer en las condiciones ambientales propias del lugar, son capaces de tener actividad metabólica, son funcionales y competitivos, en cambio algunas otras poblaciones recesivas que fueron aisladas pueden ser poblaciones alóctonas y quizá las condiciones ambientales no sean las ideales para estos microorganismos. Cabe mencionar que solo se aislaron y se analizaron pequeñas
cantidades de los microorganismos totales que hay en la muestra de suelo ya que muchos de estos microorganismos no se desarrollan en los medios de cultivo que se utilizaron en el laboratorio.
3. ¿Qué influencia tiene la rizosfera sobre la distribución de microorganismos en el suelo? Cerca de las raíces se encuentra una humedad relativa más alta comparada a la humedad del suelo donde no hay raíces, gracias a la absorción del agua que hacen las plantas; la porosidad del suelo, gracias a la estructura de las raíces ayuda a la aireación; la formación de micro y macro agregados de materia orgánica, crean un ambiente lleno de nutrientes y el pH forman un hábitat ideal para los microorganismos, además, la rizosfera puede considerarse como una zona de amortiguamiento microbiológico, donde la microbiota sirve de protección a la planta de algún patógeno. En los primeros centímetros del suelo existe mayor cantidad de restos orgánicos y O2 por lo que allí se dispone la mayor cantidad de microorganismos con metabolismos aeróbicos.
BIBLIOGRAFÍA. ●
Thompson Louis M. y Frederick. R. Troeh. Los suelos y su fertilidad. Cuarta edición. Editorial Reverté (2005) Barcelona, España. ISBN: 84-291-1041-0 pp. 44 y 45.
●
Julio L.G. “Fijación y movilización biológica de nutrientes” Volumen 1. Ed. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Madrid, 1991. Página 207 (Libro electrónico)