UNIVERSIDAD UNIVERSIDAD PEDAGOGICA NACIONAL FACULTAD FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGIA LICENCIATURA EN QUIMICA GUÍA DE LABORATORIO LABORATORIO SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Y BIOSEGURIDAD DOCENTE: Sonia Muñoz Miranda I. OBJETIVOS Familiarizar a los estudiantes con las normas de seguridad en el laboratorio Diferenciar entre Seguridad en el laboratorio y Bioseguridad Adquirir destreza en el manejo y funcionamiento de los principales elementos y equipos utilizados en el recinto de actividades experimentales Manipular un fluido biolgico atendiendo a las normas establecidas !dentificar las semejanzas y diferencias que existen entre suero y plasma
II. MARCO M ARCO CONCEPTUAL "l trabajo en el laboratorio de biolog#a$ de gen%tica de la misma forma el de qu#mica o de biolog#a molecular tiene asociados riesgos qu#micos$ f#sicos$ biolgicos y psicofisiolgicos& 'os riesgos riesgos qu#micos qu#micos est(n est(n relacionados relacionados con con las sustancias sustancias de naturalez naturaleza a qu#mica qu#mica que se se utilizan utilizan en el labora laboratorio torio y son son por una u otra razn peligrosos& Al manipular este tipo de sustancias es importante conocer$ evaluar sus peli peligr gros os y dete determ rmin inar ar la form forma a apro apropi piad ada a para para el mane manejo jo segu seguro ro&& "sta "sta informacin se obtiene obtiene de las etiquetas$ etiquetas$ )ojas de seguridad$ seguridad$ suministradas por el fabricante y otras fuentes 'as etiquetas incluyen el nombre del producto$ formula qu#mica$ el pictograma de seguridad$ el porcentaje de pureza$ las frases de riesgo entre otras& "s importante no olvidar el uso de etiquetado del puesto de trabajo cuando el produc producto to es transf transferi erido do a otro otro conten contenedo edorr difere diferente nte al origin original& al& "ste "ste debe debe contener el nombre del producto$ del fabricante$ frases de riesgo y consejos de prudencia& Algunas de las frases de de riesgo son* +, "xplosivo en estado seco + ,- !nflamable + ,. +eacciona violentamente con el agua + /- 0uede perjudicar la capacidad reproductora + /, 0uede perjudicar el feto en el seno materno
"ntre los consejos de prudencia denominados como frases S se tienen* S , 1ons%rvese bajo llave S . Mant%ngase lejos de locales )abitados S 2 Mant%ngase el recipiente bien cerrado S ,3 0rot%jase del calor 'as )ojas de seguridad informan sobre las propiedades f#sicas$ qu#micas y toxicolgicas de la sustancia y los procedimientos recomendados para una manipulacin segura$ uso de equipos para proteccin$ primeros auxilios$ tratamientos de desec)os$ derrames y otros& 'a clasificacin de las sustancias qu#micas depende de su peligrosidad y son txicas$ muy txicas$ corrosivas$ irritantes$ f(cilmente inflamables$ extremadamente inflamables$ comburentes$ explosivas$ nocivas$ peligros$ para el medio ambiente$ radiactivos y biolgicamente peligroso&
4omado de* )ttp*55666&sprl&upv&es5images5manualbellasf7-&jpg
"l riesgo f#sico esta determinado por una variedad de agentes a saber* Mec(nico* objeto en movimiento 4%rmico* altas o bajas temperaturas "l%ctrico* alto voltaje y conexiones el%ctricas +adiaciones* radioactividad !ncendios !luminacin +uido o vibraciones* por funcionamiento de equipos Microclima* condiciones de temperatura de las instalaciones • • • • • • • •
'os riesgos biolgicos )acen referencia a agentes biolgicos y materiales que son potencialmente peligrosos para los seres )umanos$ animales y5o plantas& Se pueden identificar seg8n el tipo de material biolgico que se manipula$ los procedimientos de rutina realizados en el laboratorio$ el manejo de des)ec)os biolgicos$ el aseo y desinfeccin de las (reas de trabajo$ la disponibilidad de
implementos de proteccin personal$ los protocolos de reconocimiento$ las enfermedades relacionadas con el trabajo$ los accidentes e incidentes mas comunes como pinc)azos$ cortaduras$ e in)alaciones$ las enfermedades ocupacionales adquiridas en el laboratorio& "ntre los agentes Biopeligo!o! se encuentran* ciertas bacterias$ )ongos$ virus$ ric9ettsias$ clamidias$ par(sitos$ productos recombinantes$ al%rgenos$ cultivos de c%lulas )umanas y animales y los agentes infecciosos potenciales que contengan estas c%lulas$ viroides$ priones y otros agentes infecciosos que se contemplan en leyes$ normativas y normas& Agentes potenciales de lesiones y accidentes* Manipulacin
0rocedimiento
4ransporte
Almacenamiento
"s importante recordar que )ay comportamientos que no se deben propiciar en el laboratorio como son* el no uso de materiales adecuados o la omisin de las normas de bioseguridad&
M"#e$o %e e!i%&o! !'li%o! 1ada laboratorio debe contar con canecas para la eliminacin de residuos slidos& 1aneca verde* residuos biodegradables$ se utiliza con bolsa verde& 1aneca blanca* no utiliza bolsa y se emplea para desec)ar vidrio no contaminado 1aneca roja* se utiliza para la eliminacin de residuos slidos altamente contaminantes por )aber estado en contacto con sustancias txicas$ se emplea con bolsa roja& M"#e$o %e e!i%&o! l()&i%o! 'as sustancias l#quidas utilizadas en el laboratorio deben ser eliminadas de acuerdo al tipo de sustancia& Algunas requieren ser almacenadas en contenedores para su posterior inactivacin$ otras deben ser tratadas para ser desec)adas :nitrato de plata; y otras a trav%s del caño sin consecuencias ambientales& 'as soluciones para tincin deben ser cuidadosamente descartadas& 'os medios de cultivo slidos utilizados para crecimiento de microorganismos y los que se utilizan para crecimiento de material vegetal aunque no est%n contaminados con bacterias no patgenas$ )ongos y levaduras deben ser esterilizados antes de ser descartados&
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO 'a seguridad biolgica o bioseguridad es la aplicacin del conocimiento$ las t%cnicas y el uso de elementos y equipos para prevenir la exposicin del
personal$ el laboratorio y el medio ambiente a agentes potencialmente infecciosos o biopeligrosos& 'os accidentes que ocurren durante el trabajo en el laboratorio generalmente se debe a descuido$ desconocimiento o por no atender las instrucciones establecidas$ generando riesgos que pueden afectar la integridad no slo de los operarios del laboratorio$ sino tambi%n de la comunidad y en ocasiones )asta la familia es afectada algunas normas de precaucin universal que son indispensables para el adecuado desempeño en el laboratorio* "vitar el contacto de piel o mucosa con sangre u otras secreciones de origen )umano o animal&
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0recauciones generales de bioseguridad que debe adoptar el personal en un laboratorio= es importante conocer la distribucin de las diferentes secciones del laboratorio para evitar posibles riesgos de contaminacin de las muestras que produzcan alteraciones en los resultados finales&
o tocar con las manos enguantadas ojos$ nariz u otras mucosas expuestas& 4oda muestra de laboratorio es considerada como potencialmente de riesgo$ ya que no est( exenta del riesgo de infeccin con patgenos que pueden introducirse al organismo por v#a oral o )ematgena& Siempre que trabaje con muestras tenga$ en cuenta todas las precauciones necesarias para no tener contacto directo con las mismas& Mantener el laboratorio limpio y ordenado$ evite la presencia de material y equipos que no tengan relacin con el trabajo$ tales como maletas$ libros$ cuadros$ matas y adornos& Desinfectar el (rea antes y despu%s de cada sesin de trabajo& >o pipetear l#quidos con la boca& >o comer$ beber$ fumar o aplicar cosm%ticos si est( en el laboratorio$ tampoco guarde alimentos ni enseres en las (reas de procesamiento& 'levar a cabo todos los procedimientos t%cnicos de forma tal que sea m#nimo el riesgo de producir aerosoles$ salpicaduras o derrames& 0ara la desinfeccin del (rea de trabajo utilizar )ipoclorito al -&3? :3---ppm; por ,3 minutos$ tambi%n se puede utilizar alco)ol antis%ptico&
T*+i#o! %e &!o ,o+-# e# &# l"o"/oio 0ara la identificacin de los equipos y normalizacin relacionada con las medidas de bioseguridad se debe tener en claro varias definiciones como son* Bioseguridad seguridad biolgica* Se refiere a los principios$ t%cnicas y pr(cticas aplicadas con el fin de evitar la exposicin no intencional a patgenos y toxinas$ o su liberacin accidental& 0roteccin biolgica bioproteccin* Se refiere a las medidas de proteccin de la institucin y del personal destinadas a reducir el riesgo de p%rdida$ robo$ uso incorrecto$ desviaciones o liberacin intencional de patgenos o toxinas& Biopeligro* es un agente de origen biolgico que tiene la capacidad de producir efectos delet%reos en los seres )umanos$ por ejemplo microorganismos toxinas y al%rgenos derivados de plantas y animales& +iesgo Biolgico* se incluyen los agentes infecciosos o etiolgicos :que producen enfermedades;$ los materiales potencialmente infecciosos$ ciertas toxinas y otros materiales biolgicos peligrosos& 1arcingeno* Agente que se sabe o se sospec)a que causa c(ncer& 1orrosivo* Agente qu#mico que destruye el tejido o los materiales por contacto directo& Mut(geno* Agente que induce mutaciones en el material gen%tico& 4eratgeno* Agente que se sabe o sospec)a que ocasiona daño al feto& 4xico* Sustancia que ocasiona daño a la salud$ por exposicin corta o prolongada$ cuando es ingerida$ in)alada o absorbida por la piel o mucosas&
III. REACTIVOS @"D4A -$7 ml por 3 ml de sangre @xalato de potasio al 7-? @Ceparina >a1l -&3? :3--- ppm53---mg5';
>a1! -$3? 1a1!7 7$3? Agua destilada
>ota* @Se utilizar( anticoagulante sino se cuenta con tubos para muestra de sangre con )eparina o "D4A&
IV. MATERIALES , Agitador de vidrio , 4r#pode
Algodn ,- tubos de ensayo
, colador 7 tubos de centrifuga celdas para espectrofotmetro , tubo para suero :vacutainer;
, esp(tula , tubo )eparinizado :vacutainer;
, vanoye , gradilla 1entr#fuga Microscpio "spectrofotmetro Corno 0lanc)a de calentamiento
, pinzas para tubos de ensayo , 0laca de vidrio refractario . pipetas :,$ 7$ 3$,- ml; , mec)ero , pipeta 0asteur , pipeteador , vidrio de reloj& , vaso de precipitado 73- ml , termmetro
No/": +ecuerde que para toda practica de laboratorio es indispensable* papel aluminio$ papel absorbente$ cinta de enmascarar y bayetilla o toalla& V. PROCEDIMIENTO ". P0,/i," %e pipe/eo* 4ome un tubo de ensayo con agua destilada mida , ml de agua y luego vierta el l#quido lentamente a otro tubo& +epita el mismo procedimiento con una pipeta de 7 y 3 ml& . Pep"",i'# %el "1o M"(": Caga el montaje de un baño serolgico o baño mar#a y caliente agua a ebullicin& ,. Sep"",i'# %e !&eo 2 pl"!+": ,&
". Co"g&l",i'#:
Diluya ,$3 ml de plasma con $3 ml de >a1! -$3?$ adicione 7 ml de& 1a1l 7 7$3? mezcle por inversin y deje el tubo a 2E1 al baño mar#a durante ,minutos& bserve el resultado&
. O/e#,i'# %e gl'&lo! o$o!: +otule 7 tubos de$ ensayo$ a uno de ellos agr%guele ,- ml de agua destilada y al otro ,- ml de >a1! -$3?& A cada tubo adicinele 7 gotas de sangre& Mezcle bien y observe la diferencia de aspectos que se presentan despu%s de agregar la sangre& 4rasvase a tubos de centrifuga y centrifugue por ,- minutos a --rpm& ,. Re,o#o,i+ie#/o 2 +"#e$o %e e)&ipo!: "l profesor dar( algunas instrucciones para recordar el manejo de la centr#fuga$ el baño mar#a y el espectrofotmetro& VI. RESULTADOS VII DISCUSION DE RESULTADOS VIII. BIBLIOGRAFÍA B"+>AB"!$ Dante& Seguridad& Manual para el laboratorio& 7 ed& Alemania* Merc9 gaA$ DG/.7H$ ,HH& +D+IJ<"K$ L= A+J4"$ "& y +D+IJ<"K$ & 4emas de seguridad biolgica& 1uba* F%lix (rela$ 7--,& p& Manual de procedimientos& Jestin !ntegral de +esiduos Cospitalarios y Similares en 1olombia$ Ministerio del Medio Ambiente$ Ministerio de Salud&7--7& H p& Ju#a de laboratorio Bioseguridad&
CONSULTA ,& "squematice una etiqueta e identifique los aspectos relevantes que se deben tener en cuenta al manipular sustancias qu#micas& 7& Nu% diferencia existe entre normas de seguridad en el laboratorio y bioseguridadO & Nu% significa suero )emolizadoO .& bservando el diagrama de la cascada de coagulacin establezca diferencias entre suero y plasma en cuanto a m%todo de obtencin y composicin qu#mica& 3& Dada la informacin que aparece en el cuadro de la p(gina siguiente determine el pictograma de seguridad y las frases +5S para el (cido p#crico utilizadas en la desproteinizacin del suero& /&
2& Determine si existe alguna diferencia o contin8a igual las frases +5S& & "scriba 7 preguntas y sus respectivas respuestas$ que considere se deben incluir en esta gu#a de laboratorio& H& PNu% pasos se deben realizar al momento de presentarse un accidente de riesgo biolgico en el laboratorioO ,-& PNue tipos de enfermedades se adquieren por el mal uso de residuos biolgicosO
EL SIGNIFICADO DE LOS COLORES Y DE LA SE3ALI4ACI5N "l sistema para la identificacin de riesgos por sustancias se complementa de una señal de seguridad$ en que la informacin sobre los tipos y grados de riesgo y el equipo de proteccin personal pueden ser identificados de una manera sencilla por todo el personal del centro laboral que est% involucrado con el uso y manejo de dic)as sustancias$ as# como tambi%n de una )oja de datos de seguridad que permite conocer m(s la sustancia como se observa en la figura a continuacin&
4omado de* )ttp*55666&slides)are&net5angelaandreacs,5labGnoG,GbioseguridadGmodificadoG7-,-
FA14+"S D" 1AJ<'A1!> :1AS1ADA D" 1AJ<'A1!>;
4omado de* )ttp*55med&javeriana&edu&co5fisiologia5images5clotting&gif
