Practica 2 Determinación
in vitro
de la permeación de salicilato de sodio en la rata
Objetivo: Determ Objetivo: Determinar inar in vitro el curso temporal de la difusión de salicilato de sodio a través de la mucosa gastrointestinal. vitro o salici Hipó Hipóte tesi sis: s: Si admi admini nist stra ramo mos s in vitr salicilat lato o de sodio sodio en estóm estómago ago y duod duodeno eno,, ento entonce nces s por por las caract caracter eríst ístic icas as de la membr membran ana a del duod duodeno eno,, la permea permeaci ción ón del salicilato de sodio será mayor en el mismo.
Fundamento químico de reacción: reactivo de Trinder - salicilato de sodio El método de Trinder es un test colorimétrico en el que el ácido salicílico es determinado midiendo la absorbancia del compleo ion férricosalicilato. El método de Trinder se basa en la formación de un compleo de color p!rpura por reacción de los salicilatos con nitrato férrico y la precipitación simultanea de las proteínas séricas en presencia de cloruro merc!rico en medio ácido. El reactivo de Trinder en general está conformado por "#g de $g%l $g%l,, &'#m '#m( de $%l &) y "#g de *e+) e+)- -- agregand ando agu agua csp &(. +/aruma,'#&0
-
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Resultados !jemplo de c"lculos matem"ticos %oncentración de salicilato de sodio para curva tipo +1g2ml3 btención de concentración de salicilato de sodio para las muestras +1g2ml3 %oncentración total en la probeta +mg20#ml3 En sistemas compuestos por estomago o intestino dentro de una probeta llena con 0#ml de 4inger determinamos la permeación del salicilato de sodio, en la 5gura & se observa cómo se lleva a cabo la permeación, en un curso de # a &"# minutos, de este fármaco en el estómago y en el duodeno de rata cuanti5cada como la concentración de salicilato de sodio en mg20#ml. Durante todo el e6perimento, la permeación del salicilato de sodio en el estómago no fue signi5cativa por lo que en la 5gura se observa que desde el minuto cer cero 7ast 7asta a el minu minuto to &"# &"# no 7ay 7ay la su5c su5cie ient nte e per permeac meació ión n como como para para pode poderr ser ser registrada en la grá5ca. En cambio en el duodeno a partir del minuto -#, en el equipo 0, la concentración de salicilato de sodio en el 4inger fue de -.8mg, en el minuto "# en los dos equipos restantes la concentración del salicilato de sodio en los 0#ml fue de ".-mg en el equipo " y de 9.#0mg en el equipo 9 mientras que en el equipo 0 fue de 0mg. Se
observa que la concentración aumenta ampliamente conforme pasa el tiempo pero a partir del minuto &## el aumento de concentración que registraron los equipos 0 y 9 se 7ace más estrec7o, el equipo 0 va de &&.#:mg 7asta 5nalmente en el minuto &"# &&.;'mg y en el equipo 9 va de &-.-0mg a &-.""mg en el minuto &', sin embargo en el minuto &"# la concentración regresa a &-.-0mg. (os resultados en el equipo " no se 7acen tan estrec7os lo que indica que si 7ubiéramos alargado el tiempo de e6perimentación 7ubiese sido posible observar la misma tendencia que la de los equipos 0 y 9.
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) l m 0 5 / g10 m ( ] o i d o s e d o t a l i 5 c i l a S [
Equipo Equipo Equipo Equipo Equipo Equipo
1 2 3 4 5 6
0 0
50
100
150
Tiempo (min) *igura &. %urso temporal de la permeación de salicilato de sodio en estómago y duodeno de rata, representado por la medición de la concentración de salicilato de sodio en 0#ml de 4inger. Equipo &=-3 estomago, equipo "=9
Discusión (as membranas celulares act!an como barrearas de permeabilidad selectiva, permitiendo que ciertos medicamentos pasen con facilidad, otros con di5cultad e impidiendo casi totalmente el paso de algunos de ellos. (a selectividad en el paso de los fármacos a través de las membranas celulares se relaciona con las propiedades 5sicoquímicas y con la con5guración estructural tanto de los componentes de las membranas de las células como de las moléculas de los fármacos +
(as membranas corporales son parcialmente permeables, es decir dean pasar el agua y las sustancias disueltas siempre que el tama>o de partículas sea peque>o +?oldstein et al,&8:; como el salicilato de sodio, cabe destacar que la velocidad de difusión depende del gradiente de concentración. En la práctica pusimos en evidencia a la difusión facilitada ya que administramos el salicilato de sodio en el estómago e intestino introduciéndolos en una probeta colocándolos para despues cuanti5car la cantidad del mismo que se difundía 7acia los 0#ml de 4inger que estaban en la probeta, entonces se puede a5rmar que 7abía un gradiente de concentración. (a mucosa del estómago posee un epitelio cilíndrico monoestrati5cado semeante al intestinal y de características de absorción diferentes. Dic7a mucosa, a la inversa de lo que se cree 7abitualmente, es importante como vía de absorción de medicamentos pero desde luego, no tanto como la del intestino, órgano de absorción por e6celencia +(itter,&8;# ya que la absorción intestinal es favorecida por la enorme super5cie de las vellosidades intestinales +
(a permeación del salicilato de sodio es favorecida en el duodeno. (a difusión pasiva depende del gradiente de concentración.
4eferencias ?oldstein A, AronoB (, Calman S. &8:;. *armacología. ' edición. (imusa, e6ico. pp &8:=&88 ?uyton A. '##&. Tratado de 5siología médica . && edición. c?raB $ill Fnteramericana, é6ico. pp ;&'
(itter . &8;#. *armacología. E6perimental y clínica, 9 edición. El ateneo, Argentina. pp ;-=8& /aruma Gillamarín * Tesis HFnternetI. HActuali@ado3 &0 *eb '#&0, citado3 el & de ar@o de '#&9I.Disponible en3 7ttp322dspace.ucuenca.edu.ec27andle2&'-"09:;82'&9'-
