INTRODUCCIÓN La cromatografía fue inventada por el botánico ruso Mikhail Tswett a principios del siglo XX, empleando esta técnicapara separar algunos pigmentos de las plantas, el nombre de este método viene del griego choma (color ! graphein (escritura" el cual es un método de separa separaci# ci#n, n, identi identific ficaci aci#n #n ! determ determina inaci# ci#n n de los compon component entes es $uímic $uímicos os deme%cl deme%clas as comple&as ocupando dos fases inmiscibles entre ellas' n la cromatografía en capa fina, se utili%a una placa(generalmente de aluminio $ue se recubre con fase estacionaria $ue puede ser al)mina o silica gel, en la cual sepresentara un fen#meno de adsorci#n selectiva' La fase m#vil ascenderá por capilaridad por la placa arrastrando a supaso los componentes de la me%cla (o también llamados solutos logrando separarlos" las fases involucradas en estetipo de cromatografía son* solido+li$uido, las separaciones están basadas en las diferencias en la velocidad demigraci#n entre los componentes de la fase m#vil, polaridad (generalmente la fase estacionaria será más polar $ue lafase m#vil, de forma $ue los componentes menos polares se despla%aran con una ma!or velocidad , tamao de lapartícula, temperatura, pure%a de los disolventes, entre otros' La cromatografía bidimensional, se basa en desarrollar un cromatograma con dos fases m#viles distintas en diferentes direcciones'
FUNDAMENTO n la cromatografía, en general se fundamentan en las velocidades de migraci#n de las distintas sustancias $ue se $uieren separar, $ue están gobernadas por sus solubilidades relativas en la fase estacionaria polar ! la fase m#vil no polar' n un solo paso de separaci#n cada soluto se distribu!e entre ambas fases de acuerdo con su coeficiente de partici#n ( es una constante de e$uilibrio definido '-ara n sistema de solventes ! un tipo de papel determinado , cada sustancia tiene un valor de .f característico' /na me%cla comple&a $ue no se separa por completo en un solo cromatograma en papel usa la cromatografía bidimensional en papel' 0asada en el principio anterior, con la diferencia en la técnica' La muestra se aplica en una es$uina ! el cromatograma se corre en forma paralela a uno de los bordes del papel, al terminar el primer cromatograma la ho&a se rota 123 ! se reali%a una cromatografía paralela al segundo borde utili%ando otro sistema desolventes' 4ado $ue cada compuesto migra a una velocidad característica en un sistema de solventes determinado, la segunda cromatografía debería incrementar en grado sustancial la separaci#n de la me%cla de componentes'
Concepto: 5romatografía bidimensional es una variante de la cromatografía en papel empleada para separar me%clas comple&as, donde a muestra se cromatografía primero en una direcci#n, se seca el papel, ! después se cromatografía en direcci#n perpendicular con otro disolvente' 4e este modo se obtiene un mapa bidimensional de los componentes de la me%cla separados' /na ve% separados los componentes de la muestra, parte de ellos o todos se someten a etapas adicionales de separaci#n ba&o diferentes condiciones, en otra columna o, en el caso de la cromatografía plana, en direcci#n perpendicular'
APLICACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA 6 7uellas dactilares estudio de proteínas'
8 Me%clas comple&as como los aminoácidos* El papel se atomiza con una solución de Ninhidrina y se seca en la estufa para que este compuesto reaccione de la siguiente
forma:
Esta reacción de coloración, muy sensible, es capaz de detectar cantidades tan pequeñas como 1 µg de aminoácido !a reacción de la Ninhidrina es espec"fica para los aminoácidos y se puede emplear tanto cualitati#amente como cuantitati#amente
9 :eparaciones 84 se han aplicado al análisis de la gasolina ! otras me%clas de petr#leo, ! más recientemente a las me%clas de proteínas'
Ventajas de la co!ato"a#$a %&d&!ens&onal ;frecen un gran aumento en su má k8 ? =22, con el tiempo de separaci#n total todavía de @ 62 minutos'
