CUESTIONARIO 12 1.- ¿Cuál es el grupo responsable de la reacción positiva con la prueba xantoproteica? ¿La seroalbúmina dará positiva la reacción? Los grupos aromáticos son el grupo responsable para que la reacción xantoproteica se lleve acabo de forma positiva. La manera de detectar esto será por la formación de derivados nitrados de color amarillo que por la alcalinización intensifican su color a través del uso de ácido nítrico. La seroalbúmina es un tipo de albumina más importante del plasma de la sangre y esta está formada por 585 aminoácidos. Al ser un tipo de albúmina no reacciona positivamente en la reacción xantoproteica. 2.- ¿La albúmina de huevo contiene aminoácidos azufrados? La albúmina de huevo contiene aminoácidos azufrados en su composición, ya que al realizar la prueba para encontrar aminoácidos azufrados y a las proteínas que la contienen; esta dio positivo. La prueba se realizo añadiendo 20 gotas de albúmina en un tubo de ensayo. Luego, agregar 8 gotas de NaOH al 40% y calentar. Finalmente, añadir 5 gotas de acetato de plomo al 10% y observamos el cambio de color. La reacción nos da una solución que cambio a un color marrón. La reacción es positiva, por lo que se entiende que la albúmina presenta aminoácidos azufrados. Esta prueba fue efectiva, pues la albúmina o clara tiene una glicoproteína llamada ovomucoide (12% de su composición) que contiene aminoácidos azufrados 3.- ¿Cuál o cuáles de los siguientes aminoácidos dan reacción positiva con el reactivo de Millón? a) Triptófano, b) Tirosina, c) Histidina, d) Fenilalanina, Fenilalanina, e)Metionina, f)Glicina La tirosina, triptófano y fenilalanina. Ya que en su estructura presentan restos fenólicos. Los cuales presentan una coloración rojo-salmón al reaccionar con el reactivo de millón (mezcla de mercurio y acido nítrico). TIROSINA
4.- ¿Con qué prueba reconocería Ud. Los enlaces peptídicos de una proteína? A través de la reacción de Biuret, ya que las proteínas y péptidos dan una coloración violeta característica la reaccionar con una solución sulfato cúprico 5.- Si se tiene una solución neutra de proteína y se le añade algunos mL de soda al 10%. Indicar si precipita la proteína al añadir unos mL. de: a).- Ferricianuro de potasio b).- Sulfato de cobre (II) La soda vuelve a la proteína a su forma básica o aniónica en la cual forma precipitados sólo con cationes. Entonces sólo con el Sulfato de cobre (metal pesado-cationes) se forma precipitado y no con el ferricianuro de potasio (aniones). 6.- Explique a qué se debe el fenómeno de la desnaturalización de las proteínas. La desnaturalización de las proteínas se da cuando se modifica únicamente el ordenamiento espacial de la cadena (estructura secundaria y terciaria)por destrucción de las fuerzas intermoleculares que mantienen esta disposición geométrica, sin alteración de los enlaces peptídicos, manteniéndose además la estructura primaria. Estas proteínas suelen ser más reactivas y más fácilmente hidrolizadas por las enzimas. Las atracciones intermoleculares débiles conservan con delicadeza la estructura terciaria de una molécula globular. Con frecuencia un ligero cambio en la temperatura o en el pH la estructura terciaria y causa que la proteína se desnaturalice. La desnaturalización ocurre en condiciones tan suaves que la estructura primaria permanece intacta, pero la estructura terciaria se desdobla de una forma globular específica a una cadena enrollada al azar.
7.- ¿Por qué el ácido nítrico produce una coloración amarrilla cuando se pone en contacto con un pedazo de cabello o piel? El acido nítrico concentrado, al reaccionar con proteínas hace que los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos forme un compuesto aromático nitrado de color amarillo o anaranjado, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, aromáticos de la queratina. 8.- ¿Cómo separaría Ud. una mezcla de aminoácidos?
La separación de aminoácidos se puede llevar a cabo por cromatografía encapa fina empleando diversos tipos de fases estacionarias en la modalidad de cromatografía de adsorción. El gel de sílice es la fase estacionaria con la que mejores resultados se obtienen. Introducir la fase móvil en la cámara de desarrollo, de forma que alcance un nivel de 1 cm aproximadamente, y tapar para que toda la atmósfera interior se sature del eluyente. Cortar una placa cromatográfica, con unas dimensiones aproximadas de 5x10 cm. Con ayuda de una regla y un lápiz, trazar muy suavemente sobre la placa, señalar 2 puntos equidistantes de los bordes y entre si, 1 cm del borde inferior. Depositar de forma espaciada entre 5 y 10µL de cada una de las disoluciones patrón de aminoácidos, así como la del problema, sobre los puntos anteriores Se deberá evitar que las manchas se extiendan excesivamente (no más de 0.5cm de diámetro).Dejar secar la placa entre 15 y 20 minutos. Introducir la placa en la cámara de desarrollo, cerrar la cubeta y esperar hasta que el líquido eluyente (fase móvil) suba hasta las proximidades del borde superior (aprox. 90-120 minutos). Sacar la placa y marcar con cuidado la posición que ha alcanzado el frente de disolvente. Secar la placa durante unos10 minutos. A continuación, pulverizar sobre ella la disolución de ninhidrina, y secar de nuevo durante otros 10 minutos. Al cabo de ese tiempo, deberán hacerse claramente visibles las manchas correspondientes a cada uno de los aminoácidos. Medir los valores de R de cada uno de los aminoácidos e identificar los que están presentes en la disolución problema. 9.- Aplicación de la reacción de un aminoácido con la ninhidrina
Esta técnica se utiliza para detectar concentraciones bajas de aminoácidos, utilizándose para revelar su presencia en cromatogramas y fracciones procedentes de otras técnicas de separación. La presencia de aldehídos resultantes de la degradación de la ninhidrina por reacción con los aminoácidos modifica, bajo ciertas condiciones, el color formado, lo que sirve para identificar el tipo de aminoácido en cromatografía. Haga la ecuación.
La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) reacciona con aminoácidos que tengan el grupo amino libre, dando lugar a la formación de amoniaco y anhídrido carbónico, con reducción
del reactivo (ninhidrina)a hidrindantina . La hidrindantina reacciona a su vez con el amoniaco y otra molécula de ninhidrina para dar un compuesto de adición doble que presenta una coloración azul-púrpura. Las aminas primarias (R-CH2-NH2) dan también positiva la prueba de la ninhidrina, aunque en este caso no se libera CO2.
BIBLIOGRAFÍA
CUEVA M. PEDRO, FUKUSAKI Y. ALEJANDRO Y LEÓN C. JUAN. Manual de Laboratorio de Química Orgánica.2da Edición. Juan Gutemberg Editores-Impresores E.I.R.L. Lima, Perú.2010.
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JUAN J. LEÓN CAM.2011. Perú. Introducción a la Química Orgánica.
