Multibren* U See shaded sections - updated information versus edition from August 2003
Automatic:
See chapter "Equipment".
Intended Use
Calculating the reference curve
Quantitative determination of brinogen in plasma.
Summary and Explanation Depressed levels of brinogen are observed in a) acquired hypo- or abrinogenemia. Acquired brinogen deciency deciency states occur especially as a result of intravascular proteolysis of brinogen by thrombin (disseminated intravascular coagulation, e.g. in obstetrics, after surgery), snake venoms or plasmin (primary hyperbrinolysis after streptokinase, urokinase or tPA therapy). Furthermore, moderate hypobrinogenemias may occur in cases of diminished production ( in acute or chronic liver diseases), loss into the intravascular space (e.g. in ascites or acute hemorrhage and burns) or increased degradation (in shock or carcinoma). b) congenital hypohypo- and abrinogenemias. Temporarily elevated levels of brinogen are observed as a result of the behavior of brinogen as an ”acute-phase protein”: a) Transitory hyperbrinogenemias may occur after operations, traumas, traumas, myocardial infarction and infections1. b) Persistent hyperbrinogenemias may be seen in patients with neoplasias and chronic inammatory diseases. Levels of brinogen increase slightly with age. Elevated brinogen levels are a risk factor for cardiovascular disease 2.
Principle of the Method Modication of the Clauss method. Citrated plasma is brought to coagulation by a large excess of thrombin. Here the coagulation time depends largely on the brinogen content of the specimen.
Reagents Materials provided Multifbren* U, [REF] OWZG 21 8 x l 5 mL or Multifbren* U, [REF] OWZG 15 14 x l 2 mL
Calculating the reference curve is done with the Fibrinogen Calibrator Kit. These calibrators are tested as samples in the particular coagulation analyzer. The graphic representation of the values obtained is best plotted in a log-log format. A new reference curve must be calculated each time there is a change in the device used or a change in the lot of Multibren* U. Internal Quality Control
Normal range: Control Plasma N, Ci-Trol ® Level 1 Pathological range: Control Plasma P Two levels of quality control material (normal and pathologic range) have to be measured at start of the test run, with each calibration, upon reagent vial changes and at least every eight hours on each day of testing. The controls should be processed just like the samples. Each laboratory should determine its own quality control range, either by means of the target values and ranges provided by the manufacturer of the controls or by means of its own range established in the laboratory. If the control values lie outside the range determined beforehand, then the reagent, calibration curve and coagulation analyzer should be checked. Do not release patient results until the cause of deviation has been identied and corrected. Calculating the Analytical Results
The results can be evaluated either with the enclosed table or with a reference curve calculated in the laboratory. Fibrinogen concentration is given in g/L. The data provided in the evaluation table are only valid for reagents with matching lot numbers and the indicated coagulation analyzers. A separate reference curve must be calculated for each coagulation analyzer, automated or not. The reference curves from the evaluation table can be veried with the help of Control Plasma N, Ci-Trol ® Level 1 or with Control Plasma P. If the measured results lie outside of the indicated range, then a reference curve specic to the laboratory should be calculated.
Limitations of the Procedure
Each pack of Multibren* U contains a lot- and method-specic evaluation table. Composition Multibren* U: bovine thrombin (50 IU/mL), brin-aggregation retarding peptide (gly-pro-arg-proala-amide, 0.15 g/L), calcium chloride (1.5 g/L), hexadimethrine bromide, polyethylene glycol 6000, sodium chloride, Tris, bovine albumin; Preservative: sodium az ide (< 0.1 %). Warnings and Precautions 1. For in-vitro diagnostic diagnostic use only.
2. Contains sodium azide (< 0.1 %) as a preservative. Sodium Sodium azide can react with copper or lead pipes in drain lines to form explosive compounds. Dispose of properly in accordance with local regulations. Preparations of the Reagents
Dissolve the Multibren* U with the amount of distilled or deionized water indicated on the label. Mix carefully once more before using. Bring the reagents to +37 °C before measuring (not required for automated coagulation analyzers with heated reagent probes). Storage and Stability
Stored unopened at +2 to +8 °C Multibren* U may be used by the expiry date given on the label. Stability after reconstitution: +37 °C 8 hours +15 to +25 °C 1 day +2 to +8 °C 5 days ≤-20 °C 2 months Information about on-board stability is specied in the Reference Guides (Application Sheets) for the different coagulation analyzers. Materials required, but not provided
Fibrinogen Calibrator Kit Kaolin Suspension for Fibrintimer (BFT* II) Control Plasma N Control Plasma P Ci-Trol ® Level 1 Coagulation analyzer (see chapter "Equipment")
Degradation products of brin(ogen) lead to prolonged coagulation times and therefore to diminished recovery of brinogen. Heparin (up to 2 U/mL) does not affect the test. Therapy with direct thrombin inhibitors, e.g. hirudin, may contribute to diminished recovery 3.
Some analyzers in the KC 4/10/40 series may yield false results when running the test. With the articially prepared (e.g. diluted) control plasmas for the lower range of some manufacturers, recovery may be above the declared range if the sample matrix is not sufciently plasma-like. In such cases, it is recommended that the Control Plasma P fr om Siemens should be used. Siemens has validated use of these reagents on various analyzers to optimize product performance and meet product specications. User dened modications are not supported by Siemens as they may affect performance of the system and assay results. It is the responsibility of the user to validate modications to these instructions or use of the reagents on analyzers other than those included in Siemens Application Sheets or these Instructions for Use. Results of this test should always be interpreted in conjunction with the patient’s medical history, clinical presentation and other ndings.
Expected Values 1.8 – 3.5 g/L4 Systematic deviations from this range may be determined by the particular device. It may be necessary to calculate a reference range specic to the laboratory.
Specic Performance Characteristics Measurement Range and Sensitivity
The measurement range lies between 0.8 and > 12 g/L, and is even lower for more sensitive coagulation analyzers. Precision
The precision of Multibren* U in the BCS ® was calculated with Control Plasma N and Control Plasma P for 5 days in 8-fold determination. The coefcient of variation within series was 2.9 % and 7.2 % for Control Plasma N and Control Plasma P, respectively. From day to day, it was 1.6 % and 3.4 %.
Bibliography
Equipment
Multibren* U can be used on automated coagulation analyzers. Siemens Healthcare Diagnostics provides Reference Guides (Application Sheets) for several coagulation analyzers. The Reference Guides (Application Sheets) contain analyzer/assay specic handling and performance information which may differ from that provided in these Instructions for Use. In this case, the information contained in the Reference Guides (Application Sheets) supersedes the information in these Instructions for Use. Please also consult the instruction manual of the instrument manufacturer!
1. Cooper J, Douglas AS. Fibrinogen level as a predictor predictor or mortality in survivors of myocardial Infarction. Fibrinolysis. 1991; 5: 105-8. 2. Cook NS, Ubben, D. Fibrinogen as a major risk factor in cardiovascular disease. TiPS. 1990; 11: 444-51. 3. Dempe CE, Keller A, Kirchner A, Heene DL. The inuence nuence of hirudin on plasma brinogen assays. Thromb Haemost.1998; 80: 716-7. 4. Wagner C, Dati F. Fibrinogen. In: Thomas L, ed. Clinical Laboratory Diagnostics. Diagnostics. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998; 609-12. Ci-Trol and BCS are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics. * Multibren and BFT are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics. Diagnostics.
Specimens Mix 1 part sodium citrate solution (0.11 mol/L) with 9 parts venous blood. Centrifuge the blood specimen at 1500 x g for no less than 15 minutes at room temperature. Remove the supernatant plasma and store at +15 to +25 °C until required for the test. Stability of the samples: +15 to +25 °C 8 hours
Procedure Manual:
Bring Multibren* U to +37 °C before using. Pipette into a test tube warmed to +37 °C: Sample
100 µL
Incubate for 60 seconds at +37 °C Multibren* U (+37 °C) Determine coagulation time
200 µL
OWZG G15 E0501 (847)
1
Edition July 2008
Multibren* U
Erstellung der Bezugskurve
Schattierte Abschnitte - Aktualisierte Informationen gegenüber der Ausgabe August 2003
Anwendungsbereich Quantitative Bestimmung von Fibrinogen in Plasma.
Die Erstellung der Bezugskurve erfolgt mit dem Fibrinogen Kalibrator Kit. Diese Kalibratoren werden als Proben mit dem entsprechenden Gerinnungsmessgerät getestet. Für die graphische Darstellung empehlt sich eine doppelt logarithmische Auftragung (log/log). Bei jedem Gerätewechsel und für jede Charge Multibren* U muss eine neue Bezugskurve erstellt werden. Interne Qualitätskontrolle
Diagnostische Bedeutung Erniedrigte Fibrinogenspiegel treten auf bei a) erworbener Hypo- oder Abrinogenämie. Erworbene Fibrinogenmangelzustände treten besonders infolge intravaskulärer Proteolyse von Fibrinogen durch Thrombin (Verbrauchskoagulopathie, z. B. in der Geburtshilfe, nach chirurgischen Eingriffen), Schlangengifte oder Plasmin (primäre Hyperbrinolyse nach Streptokinase-, Urokinase- oder tPA-Therapie) auf. Weiterhin können mäßige Hypobrinogenämien bei verminderter Produktion (bei akuten oder chronischen Lebererkrankungen), bei Verlust in den intravaskulären Raum (z. B. bei Aszites oder akuter Blutung sowie Verbrennungen) oder bei vermehrtem Abbau (bei Schock oder Karzinomen) vorkommen. b) angeborenen Hypo- und Abrinogenämien. Vorübergehend erhöhte Fibrinogenwerte werden infolge des Verhaltens von Fibrinogen als “Akute-Phase-Protein” beobachtet: a) Transitorische Hyperbrinogenämien können nach Operationen, Traumen, Herzinfarkt und Infektionen vorkommen1. b) Länger bestehende Hyperbrinogenämien können bei Neoplasien und chronisch entzündlichen Erkrankungen festgestellt werden. Mit zunehmendem Alter werden geringfügig steigende Fibrinogenspiegel beobachtet. Erhöhte Fibrinogenspiegel sind ein Risikofaktor für kardiovaskuläre Erkrankungen 2.
Prinzip der Methode Modikation der Methode nach Clauss. Citrat-Plasma wird mit einem großen Überschuss an Thrombin zur Gerinnung gebracht. Die Gerinnungszeit hängt hierbei weitgehend vom Fibrinogengehalt der Probe ab.
Reagenzien Inhalt der Handelspackungen Multifbren* U, [REF] OWZG 21 8 x l 5 ml oder Multifbren* U, [REF] OWZG 15
14 x l 2 ml Jede Packung Multibren* U enthält eine chargen- und methodenspezische Auswertetabelle. Zusammensetzung
Multibren* U: Thrombin vom Rind (50 IU/ml), Fibrinaggregation-verzögerndes Peptid (GlyPro-Arg-Pro-Ala-amid, 0,15 g/l), Calciumchlorid (1,5 g/l), Hexadimethrinbromid, Polyethylenglycol 6000, Natriumchlorid, Tris, Albumin vom Rind; Konservierungsmittel: Natriumazid (< 0,1 %). Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen 1. Nur zur in-vitro diagnostischen Anwendung.
2. Enthält Natriumazid (< 0,1 %) als Konservierungsmittel. Natriumazid kann mit kupfer- oder bleihaltigen Abussrohren explosive Verbindungen eingehen. Entsorgen Sie bitte ordnungsgemäß entsprechend den örtlichen Richtlinien. Vorbereitung der Reagenzien
Multibren* U mit der auf dem Etikett angegebenen Menge destilliertem oder entionisiertem Wasser lösen. Vor Gebrauch noch einmal vorsichtig mischen. Vorwärmen auf +37 °C (nicht notwendig bei automatischen Gerinnungsmessgeräten mit beheizten Reagenzpipettoren). Haltbarkeit und Lagerungsbedingungen
Multibren* U ist ungeöffnet bei +2 bis +8 °C gelagert bis zu dem auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum verwendbar. Stabilität nach Rekonstitution: +37 °C 8 Stunden +15 bis +25 °C 1 Tag +2 bis +8 °C 5 Tage ≤-20 °C 2 Monate Die Angaben zur Stabilität auf dem Gerät sind in den Referenzhandbüchern (Applikationsvorschriften) für die einzelnen Gerinnungsmessgeräte aufgeführt. Zusätzlich benötigte Materialien
Normalbereich: Kontroll-Plasma N, Ci-Trol ® Level 1 Pathologischer Bereich: Kontroll-Plasma P Bei jedem Wechsel der Reagenzaschen, zu Beginn eines Testlaufes, bei jeder Kalibration und mindestens alle 8 Stunden an jedem Testtag müssen zwei Kontrollen (eine im Normalbereich und eine im pathologischen Bereich) gemessen werden. Die Kontrollen sollten wie die Proben behandelt werden. Jedes Labor sollte seinen Qualitätskontrollbereich entweder anhand der vom Hersteller der Kontrollen angegebenen Sollwerte und -bereiche oder anhand des im Labor bestimmten eigenen Bereichs festlegen. Liegen die Kontrollwerte außerhalb des vorher festgelegten Bereichs, sollten Reagenz, Kalibrationskurve und Gerinnungsmessgerät überprüft werden. Die Ergebnisse der Patientenproben dürfen nicht freigegeben werden, bevor der Grund der Abweichung eruiert und korrigiert wurde. Berechnung der Analysenergebnisse
Es kann wahlweise über die beiliegende Auswertetabelle oder über eine selbst erstellte Bezugskurve ausgewertet werden. Die Fibrinogen-Konzentration wird in g/l angegeben. Die in der Auswertetabelle gemachten Angaben sind nur für Reagenzien mit gleicher Chargenbezeichnung und die angegebenen Gerinnungsmessgeräte gültig. Für automatisierte oder andere Gerinnungsmessgeräte ist jeweils eine eigene Bezugskurve zu erstellen. Die Bezugskurven aus der Auswertetabelle können mit Hilfe von Kontroll-Plasma N, Ci-Trol ® Level 1 oder mit Kontroll-Plasma P überprüft werden. Liegen die gemessenen Ergebnisse außerhalb des angegebenen Bereichs, sollte eine eigene Bezugskurve erstellt werden.
Einschränkungen der Testdurchführung Fibrin(ogen)-Spaltprodukte führen zu verlängerten Gerinnungszeiten und damit erniedrigter Wiederndung des Fibrinogens. Heparin (bis 2 U/ml) stört den Test nicht. Unter Therapie mit direkten Thrombininhibitoren, z. B. Hirudin, kann es zu erniedrigter Wiederndung kommen 3. Bei manchen Gerinnungsmessgeräten der Serie KC 4/10/40 kann es bei der Abarbeitung des Tests zu Fehlbestimmungen kommen. Bei künstlich, z. B. durch Verdünnung, hergestellten Kontrollplasmen für den erniedrigten Bereich einiger Hersteller kann es zu Wiederndung oberhalb des deklarierten Bereichs kommen, wenn die Probenmatrix nicht ausreichend plasmaähnlich ist. In diesem Fall wird die Verwendung von Kontroll-Plasma P von Siemens empfohlen. Siemens hat den Einsatz dieser Reagenzien auf verschiedenen Analysengeräten auf optimale Produktleistung und Einhaltung der Produktspezikationen überprüft. Vom Benutzer vorgenommene Änderungen werden von Siemens nicht unterstützt, da sie die Leistung des Systems und die Testergebnisse beeinussen können. Es liegt in der Verantwortung des Benutzers, Änderungen an diesen Anleitungen oder die Verwendung dieser Reagenzien auf anderen als in den Applikationsvorschriften von Siemens oder diesen Gebrauchsanweisungen genannten Analysengeräten zu validieren. Resultate dieses Tests sollten stets in Verbindung mit der Vorgeschichte des Patienten, dem klinischen Bild und anderen Untersuchungsergebnissen interpretiert werden.
Erwartete Werte 1,8 - 3,5 g/l 4 Systematische Abweichungen von diesem Bereich können gerätebedingt sein. Gegebenenfalls muss ein eigener Referenzbereich durch das Labor erstellt werden.
Leistungsmerkmale des Tests Messbereich und Empndlichkeit
Der Messbereich reicht von 0,8 bis >12 g/l, bei empndlich messenden Gerinnungsmessgeräten auch tiefer. Präzision
Die Präzision von Multibren* U am BCS ® wurde mit Kontroll-Plasma N und Kontroll-Plasma P an 5 Tagen in 8-fach-Bestimmung ermittelt. Der Variationskoefzient in der Serie lag bei 2,9 % bzw. 7,2 % für Kontroll-Plasma N und Kontroll-Plasma P und von Tag zu Tag bei 1,6 % und 3,4 %.
Literatur Siehe Seite 1. Ci-Trol und BCS sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics. * Multibren und BFT sind Warenzeichen von Siemens Healthcare Diagnostics.
Fibrinogen Kalibrator Kit Kaolin-Suspension für Fibrintimer (BFT* II) Kontroll-Plasma N Kontroll-Plasma P Ci-Trol ® Level 1 Gerinnungsmessgerät (siehe Kapitel "Geräte")
Ausgabe Juli 2008
Geräte
Multibren* U kann manuell oder an automatischen Gerinnungsmessgeräten verwendet werden. Siemens Healthcare Diagnostics stellt für verschiedene Gerinnungsmessgeräte Referenzhandbücher (Applikationsvorschriften) zur Verfügung. Diese enthalten geräte-/ testspezische Informationen zur Abarbeitung und zu Leistungsdaten, die von den Informationen in dieser Gebrauchsanweisung abweichen können. In diesem Fall ersetzen die Informationen in den Referenzhandbüchern (Applikationsvorschriften) die Informationen in dieser Gebrauchsanweisung. Bitte auch die Bedienungsanleitung des Geräteherstellers beachten!
Multibren* U Paragraphes surlignés - informations mises à jour par rapport à l’édition de Août 2003
Domaine d’utilisation
Untersuchungsmaterial
Détermination quantitative du brinogène dans le plasma.
1 Teil Natriumcitrat-Lösung (0,11 mol/l) mit 9 Teilen Venenblut mischen. Sofort bei Raumtemperatur mindestens 15 Minuten bei ca. 1500 x g zentrifugieren, überstehendes Plasma abhebern und bis zum Test bei +15 bis +25 °C aufbewahren. Stabilität der Proben: +15 bis +25 °C 8 Stunden
Intérêt diagnostique
Testdurchführung Manuell:
Multibren* U vor Gebrauch auf +37 °C erwärmen. In ein auf + 37 °C temperiertes Teströhrchen pipettieren: Probe
100 µl
60 Sekunden bei +37 °C inkubieren Multibren* U (+37 °C)
200 µl
Gerinnungszeit bestimmen Automatisch:
Siehe Kapitel "Geräte".
OWZG G15 E0501 (847)
2
Un taux diminué de brinogène est observé dans les cas suivants : a) hypo ou abrinogénémie acquise. Les états de décits acquis en brinogène apparaissent surtout suite à une protéolyse intravasculaire du brinogène due à la thrombine (coagulopathie de consommation, par ex. au moment de l’accouchement ou après une intervention chirurgicale), à un venin de serpent ou à la plasmine (hyperbrinolyse primaire suite à un traitement à la streptokinase, à l’urokinase ou aux tPA). Par ailleurs, des hypobrinogénémies modérées peuvent également apparaître en cas de production diminuée de brinogène (dans les maladies hépatiques aiguës ou chroniques), en cas de perte de volume intravasculaire (par ex. en cas d’ascite, d’hémorragie aiguë ou encore de brûlure), ainsi qu’en cas d’une augmentation de sa dégradation (en cas de choc ou de carcinome). b) hypo ou abrinogénémie congénitale. Des valeurs de brinogène passagèrement augmentées sont observées suite au comportement du brinogène comme « protéine de la phase aiguë » : a) hyperbrinogénémie transitoire apparaissant après une opération, un traumatisme, un infarctus du myocarde ou une infection 1, b) hyperbrinogénémie plus longue observée dans les néoplasies ou les maladies inammatoires chroniques. Le taux de brinogène augmente faiblement avec l’âge. Un taux de brinogène augmenté constitue un facteur de risque pour les maladies cardiovasculaires 2.
Principe de la méthode Modication de la méthode de Clauss. Le plasma citraté est additionné de thrombine en large excès pour l’amener à coaguler. Le temps de coagulation alors obtenu est largement dépendant de la concentration en brinogène de l’échantillon.
Réactifs Conditionnements Multifbren* U, [REF] OWZG 21
8 x l 5 ml ou
Multifbren* U, [REF] OWZG 15
14 x l 2 ml Chaque coffret de Multibren* U contient un tableau d’évaluation spécique au lot et à la méthode. Composition
Multibren* U : thrombine bovine (50 UI/ml), peptide retardant l’agrégation de la brine (GlyPro-Arg-Ala-amide, 0,15 g/l), chlorure de calcium (1,5 g/l), bromure d’hexadiméthrine, polyéthylène glycol 6000, chlorure de sodium, Tris, albumine bovine ; agent de conservation : azide de sodium (< 0,1 %). Mises en garde et précautions d’emploi 1. Réservé à un usage de diagnostic in-vitro .
2. Contient de l’azite de sodium (< 0,1 %) comme conservateur. L’ azite de sodium peut réagir avec les tuyaux d’évacuation en cuivre ou en plomb et former des composés explosifs. L’évacuer conformément aux réglementations locales. Préparation des réactifs
Reconstituer Multibren* U avec le volume d’eau distillée indiqué sur l’étiquette. Agiter de nouveau avec précaution avant emploi. Porter les réactifs à +37 °C avant de commencer le test (le préchauffage n'est pas nécessaire pour les appareils automatisés de coagulation sur lesquels les seringues de pipetage sont chauffées). Stabilités et conditions de conservation
À conserver entre +2 et +8 °C dans l’emballage fermé. Ne pas utiliser Multibren* U après la date d’expiration mentionnée sur l’étiquette Stabilité après reconstitution : +37 °C 8 heures +15/+25 °C 1 jour +2/+8 °C 5 jours ≤-20 °C 2 mois Les informations relatives à la stabilité du produit dans l’automate sont mentionnées dans les ches d’application de l’automate de coagulation utilisé. Autres réactifs et matériel nécessaires
Les courbes d’étalonnage du tableau d’évaluation peuvent être vériées à l’aide du plasma de contrôle N, de Ci-Trol ® Niveau 1 ou du plasma de contrôle P. Si les résultats mesurés ne sont pas compris dans l’intervalle de référence, une courbe d’étalonnage spécique au laboratoire doit être calculée.
Limites de réalisation du test La présence de produits de dégradation de la brine (ou du brinogène) entraîne des temps de coagulation allongés, et donc une restitution moindre du brinogène. L’héparine (jusqu’à 2 U/ml) ne perturbe pas le test. Un traitement aux inhibiteurs directs de la thrombine, comme par ex. l’hirudine, peut provoquer une restitution diminuée 3. Sur certains appareils de coagulation de la série KC 4/10/40, on peut obtenir pour ce test des résultats erronés. Avec certains plasmas de contrôle établis articiellement par le fabricant à un niveau bas, par ex. par dilution, on peut obtenir une restitution supérieure au domaine déclaré si la matrice de l’échantillon n’est pas sufsamment comparable au plasma. Dans ce cas-là, il est r ecommandé d’utiliser le Plasma de contrôle P de Siemens. Siemens a validé l’utilisation de ces réactifs sur plusieurs analyseurs an d’optimiser les performances du produit et répondre à ses spécications. Les modications apportées par l’utilisateur ne sont pas sous la responsabilité de Siemens dans la mesure où elles peuvent affecter les performances du système et les résultats des dosages. Il est de la responsabilité de l’utilisateur de valider toutes modications apportées à ces instructions ou à l’utilisation des réactifs sur les analyseurs autres que ceux mentionnés dans les protocoles d’application Siemens ou dans la présente notice d’utilisation. Les résultats de ce test doivent toujours être interprétés en rapport avec les antécédents médicaux du patient, les signes cliniques et autres constatations.
Valeurs attendues 1,8 – 3,5 g/l4 Des déviations systématiques par rapport à ce domaine peuvent être dues à l’appareil utilisé. Le laboratoire devra éventuellement établir son propre domaine de référence.
Caractéristiques du test Domaine de mesure et sensibilité
Le domaine de mesure s’étend de 0,8 à > 12 g/l ; il peut être inférieur avec certains appareils de coagulation sensibles. Précision
La précision de Multibren* U sur le BCS ® a été déterminée avec le Plasma de contrôle N et le Plasma de contrôle P, selon des mesures effectuées 8 fois sur 5 jours. Le coefcient de variation à l’intérieur d’une série était de 2,9 % et de 7,2 % pour le plasma de contrôle N et le plasma de contrôle P, respectivement. Il était respectivement de 1,6 % et de 3,4 % de jour en jour.
Littérature Cf. page 1.
Kit de calibration Fibrinogène Suspension de kaolin pour Fibrintimer (BFT* II) Plasma de contrôle N Plasma de contrôle P Ci-Trol ® Niveau 1 Appareil de coagulation (cf. paragraphe « Matériel »)
Ci-Trol et BCS sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics. * Multibren et BFT sont des marques commerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.
Matériel
Edition Juillet 2008
Multibren* U peut être utilisé manuellement ou sur un appareil automatisé de coagulation. Siemens Healthcare Diagnostics propose des Guides de référence (ches d’application) pour plusieurs analyseurs de coagulation. Les Guides de référence (ches d’application) contiennent des informations sur les performances et l’utilisation des différents appareils / dosages, qui peuvent différer de celles mentionnées dans la présente notice. Le cas échéant, les informations fournies dans les Guides de référence (ches d’application) annulent et remplacent celles contenues dans la présente notice d’utilisation. En outre, veuillez consulter le manuel de formation du fabricant de l’appareil !
Vedere sezioni ombreggiate - informazioni aggiornate rispetto all’edizione attuale da Agosto 2003
Echantillons à tester
Settore d’impiego
Mélanger 1 part de solution de citrate de sodium (0,11 mol/l) avec 9 parts de sang veineux. Centrifuger l’échantillon sanguin à 1500 x g pendant au moins 15 minutes à température ambiante. Retirer le plasma surnageant et conserver entre +15 et +25 °C jusqu’au test. Stabilité de l’échantillon : +15/+25 °C 8 heures
Réalisation du test Méthode manuelle :
Préchauffer Multibren* U à +37 °C avant son emploi. Pipeter dans un tube à essai préchauffé à +37 °C Echantillon
100 µl
Laisser incuber 60 sec à +37 °C Multibren* U (+37 °C)
200 µl
Mesurer le temps de coagulation Méthode automatique :
Cf. paragraphe « Matériel » Etablissement de la courbe d’étalonnage
L’établissement de la courbe d’étalonnage s’effectue à l’aide du Kit de Calibration Fibrinogène. Tester les Calibrateurs du kit sur l’appareil de coagulation utilisé comme des échantillons. Pour la représentation graphique, il est recommandé d’utiliser une échelle bi-logarithmique (log/log). Etablir une nouvelle courbe d’étalonnage à chaque changement d’appareil ou de lot de Multibren* U. Contrôle de qualité interne
Domaine normal : Plasma de contrôle N Ci-Trol ® Niveau 1 Domaine thérapeutique : Plasma de contrôle P Deux contrôles (domaine normal et domaine pathologique) doivent être mesurés au début de chaque série de test, à chaque étalonnage, à chaque changement de acon de réactif et au moins toutes les heures sur une journée de travail. Les contrôles doivent être manipulés comme les échantillons. Chaque laboratoire doit établir son propre domaine de contrôle qualité, soit en utilisant les valeurs cibles et les domaines de valeurs fournis par le fabricant des contrôles, soit en utilisant son propre intervalle de conance établi dans le laboratoire. Si la valeur d’un contrôle n’est pas comprise dans l’intervalle de conance prédéni, il y a lieu de contrôler le réactif, la courbe d’étalonnage et l’appareil de coagulation. Les résultats de patient ne doivent pas être validés tant que l’origine des valeurs aberrantes n’a pas été identiée et corrigée. Calcul des résultats d’analyse
Les résultats peuvent être évalués à l’aide du tableau joint ou d’une courbe d’étalonnage calculée au laboratoire. La concentration de brinogène est exprimée en g/l. Les données mentionnées dans le tableau d’évaluation sont valables uniquement pour les numéros de lot correspondants et pour les appareils de coagulation spéciés. Une courbe d’étalonnage doit être calculée pour chaque appareil de coagulation, qu’il soit automatisé ou non. OWZG G15 E0501 (847)
3
Multibren* U Determinazione quantitativa del brinogeno nel plasma.
Signicato diagnostico Livelli diminuiti di brinogeno si vericano nelle: a) ipobrinogenemie o abrinogenemie acquisite. Stati di carenza acquisita di brinogeno si vericano soprattutto in seguito a proteolisi intravascolare del brinogeno dovute alla trombina (coagulopatia da consumo, ad es. in ostetricia, dopo interventi chirurgici), veleno di serpente o plasmina (iperbrinolisi primaria dopo terapia con streptochinasi, urochinasi o tPA). Inoltre, possono subentrare modeste ipobrinogenemie in caso di diminuita produzione (malattie del fegato acute o croniche), perdita nello spazio intravascolare (per es. ascite o emorragia acuta o ustioni) oppure aumentata degradazione (per es. shock o carcinomi). b) ipobrinogenemie o abrinogenemie congenite. Livelli di brinogeno temporaneamente elevati si riscontrano quando il brinogeno si comporta da ”proteina della fase acuta” nei seguenti casi: a) Iperbrinogenemie transitorie che possono vericarsi dopo interventi chirurgici, traumi, infarto del miocardio e infezioni 1. b) Iperbrinogenemie prolungate si possono vericare nelle neoplasie e nelle malattie inammatorie croniche. Con la vecchiaia, si nota un livello di brinogeno in leggero aumento. Un elevato livello di brinogeno costituisce un fattore di rischio nelle malattie cardiovascolari 2.
Principio del metodo Metodo di Clauss modicato. Il plasma citratato viene fatto coagulare con una quantità di trombina in eccesso. Il tempo di coagulazione dipende largamente dal contenuto di brinogeno del campione in esame.
Reagenti Contenuto della confezione Multifbren* U, [REF] OWZG 21 8 x l 5 mL oppure Multifbren* U, [REF] OWZG 15 14 x l 2 mL
Ogni confezione di Multibren* U contiene una tabella di valutazione lotto- e metodo-specica. Composizione
Multibren* U : trombina bovina (50 UI/mL), peptide ritardante l’aggregazione del brinogeno (Gly-Pro-Arg-Pro-Ala-ammide 0,15 g/L), cloruro di calcio (1,5 g/L), esadimetrimbromuro, polietilenglicole 6000, cloruro di sodio, Tris, albumina bovina. Conservante: sodio azide (< 0,1 %). Avvertenze e precauzioni
1. Solo per uso diagnostico in-vitro . 2. Contiene azoturo di sodio (< 0,1 %) come conservante. L’azoturo di sodio può reagire con le tubazioni in rame o piombo nelle linee di scarico formando composti esplosivi. Provvedere allo smaltimento in modo appropriato e secondo le normative locali.
Preparazione dei reagenti
Ricostituire il Multibren* U con la quantità di acqua distillata indicata sull’etichetta. Miscelare con cautela, ancora una volta prima dell’uso. Portare i reagenti a + 37 °C prima di effettuare le misurazioni (non necessario nel caso di sistemi di coagulazione automatica che utilizzano sonde r iscaldate).
Valori attesi 1,8 - 3,5 g/L4 Le deviazioni sistematiche da questo intervallo possono essere dovute allo strumento utilizzato. Il laboratorio dovrebbe calcolare un proprio intervallo di riferimento.
Caratteristiche speciche del test
Conservazione e stabilità
Multibren* U può essere utilizzato no alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conservato chiuso a +2/+8 °C. Stabilità dopo ricostituzione: +37 °C 8 ore +15/+25 °C 1 giorno +2/+8 °C 5 giorni ≤-20 °C 2 mesi Le informazioni relative alla stabilità on board sono specicate nei Protocolli Applicativi per i vari analizzatori per coagulazione. Altro materiale necessario
Kit Fibrinogeno calibratore Sospensione di caolino per Fibrintimer (BFT** II) Plasma di controllo N Plasma di controllo P Ci-Trol ® Livello 1 Analizzatore per coagulazione (v. capitolo “Strumentazione”)
Intervallo di misura e sensibilità
L’intervallo di misura è compreso fra 0,8 e >12 g/L, con strumentazione sensibile anche più basso. Precisione
La precisione del Multibren* U sul BCS ® è stata calcolata con il Plasma di controllo N e Plasma di controllo P, per 5 giorni in determinazioni ripetute 8 volte. Il coefciente di variazione intra-serie era compreso tra 2,9 % e 7,2 % per il Plasma di controllo N e Plasma di controllo P rispettivamente e inter-serie dell’1,6 % e 3,4 %.
Bibliograa Vedi pagina 1. Ci-Trol e BCS sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics. *
Multibren e BFT sono marchi di Siemens Healthcare Diagnostics.
Strumentazione
Multibren* U può essere utilizzato manualmente o su analizzatori per coagulazione automatici. Siemens Healthcare Diagnostics fornisce Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) per diversi analizzatori per coagulazione. Le Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) contengono informazioni sulla manipolazione e sulle prestazioni speciche per i diversi analizzatori/ test che possono essere diverse da quelle fornite nelle presenti Istruzioni per l‘uso. In questo caso, le informazioni contenute nelle Guide di Riferimento (Protocolli Applicativi) sostituiscono le informazioni delle presenti Istruzioni per l’uso. Consultare anche il manuale di istruzioni del produttore dello strumento.
Campioni in esame Miscelare 1 parte di soluzione di citrato di sodio (0,11 mol/L) con 9 parti di sangue venoso. Centrifugare il campione di sangue a 1500 x g per almeno 15 minuti a temperatura ambiente. Rimuovere il plasma sovranatante e conservare a +15/+25 °C no al momento del test. Stabilità del campione: +15/+25 °C 8 ore
Procedura Manuale:
Portare il Multibren* U a +37 °C prima dell’uso. Distribuire in una cuvetta riscaldata a +37 °C: Campione
100 µL
Incubare per 60 sec. a +37 °C Multibren* U (+37 °C)
200 µL
Determinare il tempo di coagulazione Automatico:
V. capitolo “Strumentazione”. Preparazione della curva di calibrazione
La curva di calibrazione viene realizzata con l’impiego del kit Fibrinogeno Calibratore. Questi calibratori vengono esaminati come campioni sul relativo analizzatore per coagulazione. Per la rappresentazione graca dei valori ottenuti, si consiglia una riproduzione bilogaritmica (log/Log). Ad ogni variazione dello strumento e per ogni nuovo lotto di Multibren*U deve essere realizzata una nuova curva di calibrazione. Controllo di qualità interno
Intervallo normale: Plasma di controllo N, Ci-Trol ® Livello 1 Intervallo patologico: Plasma di controllo P È necessario misurare due livelli di materiale di controllo di qualità (intervallo normale e patologico) all’inizio del test, con ogni calibrazione, al cambio del acone di reagente, e almeno ogni 8 ore di ogni giorno di utilizzo. I controlli devono essere elaborati esattamente come i campioni. Ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli di controllo di qualità, tramite i valori e gli intervalli target forniti dal produttore dei controlli, oppure per mezzo di intervalli di condenza stabiliti nel laboratorio. Se i valori di controllo sono fuori dall’intervallo di controllo precedentemente determinato, vericare il reagente, la curva di calibrazione e l’analizzatore per coagulazione. Non refertare i risultati dei pazienti nché non è stata individuata e corretta la causa della deviazione. Calcolo dei risultati analitici
La valutazione dei risultati può essere effettuata tramite la tabella dei valori allegata oppure con una curva di calibrazione realizzata nel laboratorio. La concentrazione di brinogeno viene espressa in g/L. I dati indicati nella tabella di valutazione sono validi solo per reagenti con il medesimo numero di lotto e con gli analizzatori di coagulazione indicati. Con ogni strumento di coagulazione, automatizzato e non, occorre determinare la relativa curva di calibrazione. Le curve di calibrazione della tabella di valutazione possono essere vericate con il Plasma di Controllo N, Ci-Trol ® Livello 1 o Plasma di controllo P. Se i risultati ottenuti si trovano al di fuori dell’intervallo di accettabilità, occorre determinare una propria curva di calibrazione.
Limitazioni della procedura I prodotti di degradazione del brinogeno/brina e portano a tempi di coagulazione prolungati e conseguente diminuzione della riproducibilità del brinogeno. L’eparina (no a 2 U/mL) non pregiudica l’esito del test. Una terapia con inibitori diretti della trombina, ad es. irudina, può portare ad una diminuita riproducibilità 3. Con alcuni strumenti della serie KC 4/10/40 si possono vericare determinazioni errate nell’esecuzione del test. Con plasmi di controllo prodotti articialmente (ad es. mediante diluizione) nell’intervallo basso di alcuni produttori, può vericarsi una riproducibilità al di sopra dell’intervallo dichiarato se la matrice dei campioni non è sufcientemente simile al plasma. Si consiglia in questo caso, di utilizzare il Plasma di controllo P della Siemens. Siemens ha validato l’uso di questi reagenti su vari analizzatori per ottimizzare le prestazioni e rispettare le speciche dei prodotti. Le modiche denite dall’utente non sono supportate da Siemens poiché possono inuire sulle prestazioni del sistema e sui risultati del test. Pertanto è responsabilità dell’utente validare tutte le modiche apportate a queste istruzioni, l’uso dei reagenti su analizzatori diversi da quelli inclusi nei fogli di istruzioni o nelle istruzioni d’uso fornite da Siemens. I risultati di questo test devono essere sempre interpretati alla luce della anamnesi del paziente, della presentazione clinica e valutando contestualmente l’esito di altri accertamenti.
OWZG G15 E0501 (847)
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Edizione Luglio 2008
Multibren* U Observe las secciones resaltadas - Es información actualizada de la edición anterior desde el Agosto 2003
Campos de aplicación Determinación cuantitativa de brinógeno en plasma.
Signicado diagnóstico Niveles bajos de brinógeno se encuentran en: a) Hipo- o abrinogenemias adquiridas. Los estados de deciencia de brinógeno adquiridos aparecen especialmente como consecuencia de una proteólisis intravascular del brinógeno mediante trombina (coagulopatía de consumo por ej., en la asistencia al parto, después de una intervención quirúrgica), veneno de serpiente o plasmina (hiperbrinólisis primaria después de una terapéutica con estreptoquinasa, uroquinasa o tPA) . Además, se puede presentar hipobrinogenemia moderada por producción disminuida (enfermedades agudas o crónicas del hígado), por perdida en los espacios intravasculares (por ej., en la ascitis o en hemorragias agudas, así como en quemaduras), o por una desintegración incrementada (por ej., en shock o en carcinomas). b) Hipo- o abrinogenemias congénitas. Valores elevados pasajeros de brinógeno se van a encontrar, como consecuencia del comportamiento del brinógeno como "proteína de fase aguda" en: a) Hiperbrinogenemias transitorias pueden aparecer después de operaciones, traumas, infarto cardíaco e infecciones 1. b) Hiperbrinogenemias de larga insistencia pueden ser determinadas en neoplasias y en enfermedades infecciosas crónicas. Con el aumento de la edad se observa un aumento poco importante del nivel de brinógeno. Niveles elevados de brinógeno son un factor de riesgo a enfermedades cardiovasculares 2.
Principio del método Modicación del método de Claus. El plasma citratado se va a llevar a coagulación agregando una cantidad en exceso de trombina. El tiempo de coagulación depende, en este caso, además del contenido de brinógeno en la muestra.
Reactivos Contenido del envase comercial Multifbren* U, [REF] OWZG 21
8 x l 5 ml o
Multifbren* U, [REF] OWZG 15
14 x l 2 ml Cada kit de Multibren* U contiene una tabla de evaluación especíca del lote y del método. Composición
Multibren* U: Trombina bovina (50 UI/ml), péptido retardador de la agregación de brina (GlyPro-Arg-Pro-Ala-amida, 0,15 g/l), cloruro de calcio (1,5 g/l), hexadimetrinbromuro, polietilenglicol 6000, cloruro de sodio, Tris, albúmina bovina; agente de conservación: azida sódica (< 0,1 %). Advertencias y medidas de seguridad
1. Sólo para ser utilizado en diagnósticos in-vitro . 2. Contiene azida de sodio (< 0,1 %) como conservante. La azida de sodio puede reaccionar con tuberías de cobre o de plomo en los conductos de drenaje y formar compuestos explosivos. Elimine este producto de forma apropiada conforme a la normativa local. Preparación de reactivos
Disolver el Multibren* U con la cantidad de agua destilada indicada en la etiqueta. Antes de usar, mezclar cuidadosamente. Los reactivos deben alcanzar una temperatura de +37 °C antes de la medición (esto no es necesario en el caso de analizadores de coagulación automatizados con pipetas de reactivos termostatizadas). Conservación y estabilidad
Almacenado sin abrir entre +2 y +8 °C, Multibren* U puede utilizarse hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Estabilidad después de la reconstitución: +37 °C 8 horas entre +15 y +25 °C 1 día entre +2 y +8 °C 5 días ≤-20 °C 2 meses Encontrará información especíca sobre la estabilidad a bordo de los diferentes analizadores de coagulación en las Hojas de aplicación. Materiales adicionales necesarios
Kit de calibradores para Fibrinógeno Suspención de caolín para el Fibrintimer (BFT* II) Plasma control N Plasma control P Ci-Trol ® Nivel 1 Aparato de medida de la coagulación (ver capitulo "Equipo“)
Equipo
Multibren* U puede emplearse en procedimientos manuales o en analizadores de coagulación automatizados. Siemens Healthcare Diagnostics tiene a su disposición Guías de Referencia (Hojas de aplicación) para varios analizadores de coagulación. Las Guías de Referencia (Hojas de aplicación) contienen información especíca sobre el manejo y el rendimiento de los analizadores/ensayos que puede diferir de la ofrecida en estas instrucciones de uso. En ese caso, la información contenida en las Guías de Referencia (Hojas de aplicación) reemplaza la información de estas instrucciones de uso. Le rogamos consulte también el Manual de Instrucciones del fabricante del instrumento!
Material a investigar Mezcle 1 parte de solución de citrato sódico (0,11 mol/l) con 9 partes de sangre venosa. Centrifugue la muestra de sangre a 1500 x g durante al menos 15 minutos a temperatura ambiente. Retire el plasma sobrenadante y manténgalo entre +15 y +25 °C hasta la realización del análisis. Estabilidad de la muestra: entre +15 y +25 °C 8 horas Procedimiento Manual:
Calentar el Multibren* U a +37°C antes de usarlo. Pipetear en un tubo de ensayo precalentado a +37 °C: Muestra
100 µl
Incubar 60 segundos a +37 °C Multibren* U (+37 °C)
200 µl
Determinar el tiempo de coagulación Automático:
Ver capitulo "Equipo“.
Multibren* U Secções sombreadas - Informações actualizadas versus a edição de Agosto de 2003
Campo de aplicação Determinação quantitativa de brinogénio no plasma.
Signicado diagnóstico Níveis baixos de brinogénio encontram-se em caso de a) hipobrinogenemia ou abrinogenemia adquiridas. As deciências de brinogénio adquiridas ocorrem especialmente em consequência de proteólise intravascular do brinogénio pela trombina (coagulopatia de consumo), p. ex., em obstetrícia, após intervenções cirúrgicas, venenos de serpente ou plasmina (hiperbrinólise primária ou terapia com estreptoquinase, uroquinase ou tPA). Além disso, podem ocorrer hipobrinogenemias moderadas no caso de produção reduzida (nas doenças hepáticas agudas ou crónicas), perda no espaço intravascular (p. ex., ascites ou hemorragia aguda, assim como queimadelas) ou aumento de degradação (em caso de choque ou carcinomas). b) hipobrinogenemias ou abrinogenemias congénitas. Níveis temporários de brinogénio elevados são encontrados como resultado do comportamento do brinogénio como uma ”proteína de fase aguda”: a) as hiperbrinogenemias transitórias podem ocorrer após operações, traumas, enfarte do miocárdio e infecções 1. b) as hiperbrinogenemias persistentes podem ser observadas nas neoplasias e doenças inamatórias crónicas. Com o aumento da idade, observam-se níveis de brinogénio ligeiramente ascendentes. Os níveis de brinogénio elevado constituem um factor de risco para as doenças cardiovasculares 2.
Elaboración de la curva de referencia
Princípio metodológico
La elaboración de la curva de referencia se efectúa con el Kit de calibradores para brinógeno. Estos calibradores van a ser medidos como muestras en los respectivos aparatos de medida de la coagulación. Para la representación gráca se recomienda usar papel logarítmico doble (log/log) Para cada cambio de aparato y para cada nuevo lote de Multibren* U se debe elaborar una nueva curva de referencia.
Modicação do método de Clauss. O plasma citratado é levado à coagulação com um grande excesso de trombina. Neste caso, o tempo de coagulação depende largamente do teor de brinogénio da amostra.
Reagentes
Control de calidad interno
Conteúdo das embalagens comerciais Multifbren* U, [REF] OWZG 21
Rango normal: Plasma control N, Ci-Trol ® Nivel 1 Rango patológico: Plasma control P Al iniciar un ciclo de pruebas, con cada calibración, al cambiar el frasco de reactivo y en cada turno de trabajo deben medirse dos niveles de control (intervalo normal y patológico). Los controles deben procesarse como si fueran muestras. Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo de control de calidad, ya sea por medio de valores objetivo e intervalos proporcionados por el fabricante de los controles, o por medio de sus propios intervalos de conanza establecidos en el laboratorio. Si los valores de control se encuentran fuera del intervalo de conanza determinado previamente, el reactivo, la curva de calibración y el analizador de coagulación deberán examinarse. Los resultados de los pacientes no deberán validarse hasta identicar y corregir la causa de la desviación. Cálculo de los resultados del análisis
Los resultados pueden evaluarse o con la tabla adjunta o con una curva de calibración realizada por el laboratorio. La concentración de brinógeno se indica en g/l. Los datos proporcionados en la tabla de evaluación sólo son válidos para reactivos con idéntico número de lote y con los analizadores de coagulación indicados. Debe realizarse una curva de referencia para cada analizador de coagulación, sea éste automatizado o no. Las curvas de referencia de la tabla de evaluación pueden vericarse con la ayuda del Plasma de control N, Ci-Trol ® Nivel 1 o Plasma de control P. Si los resultados obtenidos se encuentran fuera del intervalo indicado, deberá realizarse una nueva curva de calibración especíca del laboratorio.
8 x l 5 ml ou
Multifbren* U, [REF] OWZG 15
14 x l 2 ml Cada embalagem de Multibren* U contém uma tabela de avaliação especíca do lote e do método. Composição
Multibren* U: Trombina bovina (50 IU/ml), péptido retardador da agregação da brina (Gly-ProArg-Pro-Ala-Amido, 0,15 g/l), cloreto de cálcio (1,5 g/l), brometo de hexadimetrina, polietileno glicol 6000, cloreto de sódio, Tris, albumina bovina; conservante: Azida de sódio (< 0,1 %). Advertências e medidas de precaução 1. Só para uso diagnóstico in-vitro .
2. Contém azida de sódio (< 0,1 %) como conservante. A azida de sódio pode reagir com os tubos de cobre ou de chumbo das canalizações de esgotos formando compostos explosivos. Elimine este produto de forma correcta e de acordo com as regulamentações locais. Preparação dos reagentes
Dissolver Multibren* U com a quantidade de água destilada indicada no rótulo. Antes usar, misturar cuidadosamente uma vez mais. Aquecer os reagentes para +37 °C antes de proceder a medições (não é necessário para analisadores de coagulação automatizados com pipetas de reagentes aquecidas). Estabilidade e condições de conservação
Limitaciones del procedimiento Productos de degradación brino(geno)líticos conducen a tiempos de coagulación prolongados y por lo tanto a una baja recuperación de brinógeno. La heparina (hasta 2 U/ml) no altera el test. Una terapéutica con inhibidores directos de trombina, por ej., hirudina, puede llevar a una recuperación disminuida 3. Para algunos aparatos de medida de la coagulación de la serie KC 4/10/40 se puede llegar a determinaciones erradas al realizar el test. Con plasmas de control articialmente preparados, por ej., por dilución, para establecer plasmas de control para los rangos bajos de algunos fabricantes, se puede llegar a tener una recuperación por encima del rango declarado, si la matriz de las muestras no es lo sucientemente similar al plasma. En estos casos se recomienda usar el Plasma control P de Siemens. Siemens ha validado el uso de los reactivos en varios analizadores para optimizar el rendimiento del producto y cumplir con las especicaciones del mismo. Las modicaciones denidas por el usuario no están garantizadas por Siemens dado que pueden afectar al rendimiento del sistema y a los resultados del ensayo. Es responsabilidad del usuario validar las modicaciones realizadas a estas instrucciones o el uso de los reactivos en analizadores distintos a los incluidos en las hojas de aplicaciones de Siemens o en estas instrucciones de uso. Los resultados de esta prueba deberán interpretarse siempre de acuerdo con la historia clínica del paciente, la sintomatologia clínica y otras observaciones.
Valores esperados 1,8 - 3,5 g/l Las desviaciones sistemáticas de este rango pueden ser dependientes del aparato. En este caso, el laboratorio deberá establecer su propio rango de referencia. 4
Características del test Rango de medida y sensibilidad
El rango de medida va de 0,8 hasta > 12 g/l; para aparatos de medida de la coagulación más sensibles aún más abajo. Presición
La presición del Multibren* U en el BCS ® fue determinada con Plasma control N y Plasma control P, durante 5 días en determinaciones óctuplas. El coeciente de variación intra- serie fue de 2,9 % y 7,2 % para el Plasma de control N y Plasma de control P respectivamente. El CV inter.-serie, fue de 1,6 % y 3,4 %.
Conservado por abrir entre +2 e +8 °C, o Multibren* U pode ser utilizado até à data de validade indicada no rótulo. Estabilidade após a reconstituição: +37 °C 8 horas +15 a +25 °C 1 dia +2 a +8 °C 5 dias ≤-20 °C 2 meses Informação acerca da estabilidade no equipamento é especicada nas folhas de instruções de aplicação para os diferentes analisadores de coagulação. Outros materiais necessários
Kit calibrador de brinogénio Suspensão de caulino para Fibrintimer (BFT* II) Plasma de controlo N Plasma de controlo P Ci-Trol ® Level 1 Coagulómetro (veja o capítulo “ Equipamento”) Equipamento
Multibren* U pode ser utilizado manualmente ou em analisadores de coagulação automatizados. A Siemens Healthcare Diagnostics fornece guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) para diversos analisadores de coagulação. Os guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) contêm informações especícas sobre o manuseamento e desempenho do analisador/teste que podem diferir das fornecidas nestas instruções. Nesse caso, as informações contidas nos guias de consulta (folhas de instruções de aplicação) substituem as informações dadas nestas instruções. Consulte ainda o manual de instruções do fabricante do aparelho.
Material de análise Misture 1 parte de solução de citrato de sódio (0,11 mol/l) com 9 partes de sangue venoso. Centrifugue a amostra de sangue a 1500 x g por um período não inferior a 15 minutos à temperatura ambiente. Retire o plasma sobrenadante e conserve entre +15 e +25 °C até ser preciso para o teste. Estabilidade da amostra: +15 a +25 °C 8 horas
Execução do teste Manual:
Literatura Ver página 1. Ci-Trol y BCS son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics. * Multibren y BFT son marcas comerciales de Siemens Healthcare Diagnostics.
Antes de usar, aquecer Multibren* U a +37 °C. Pipetar para um tubo de ensaio temperado a +37 °C: Amostra
100 µl
Incubar durante 60 seg. a +37 °C Multibren* U (+37 °C) Determinar tempo de coagulação
200 µl
Automática: Edición Julio 2008
OWZG G15 E0501 (847)
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Veja o capítulo “ Equipamento”.
Preparação da curva de referência
A preparação da curva de referência é efectuada com o kit calibrador de brinogénio. Estes calibradores são testados como amostras com o coagulómetro correspondente. Para a representação gráca, é aconselhável fazer uma plotagem em escala logarítmica dupla (log/log). É necessário preparar uma nova curva de referência para cada mudança de equipamento e de lote de Multibren* U. Controlo de qualidade interno
Intervalo normal: Plasma de controlo N, Ci-Trol ® Level 1 Intervalo patológico: Plasma de controlo P É necessário medir dois níveis de material de controlo de qualidade (intervalo normal e intervalo patológico), no início de cada processamento de teste, com cada calibração, depois da troca de frascos de reagentes e, pelo menos, de oito em oito horas em cada dia de realização de testes. Os controlos devem ser processados exactamente como as amostras. Cada laboratório deverá estabelecer o seu próprio intervalo de controlo de qualidade, quer por meio de valores alvo e intervalos fornecidos pelo fabricante dos controlos quer por meio do seus próprios intervalos de conança, denidos no laboratório. Se os valores de controlo se situarem fora do intervalo de conança previamente determinado, deve então vericar-se o reagente, a curva de calibração e o analisador de coagulação. Os resultados dos pacientes não devem ser transmitidos até a causa do desvio ter sido identicada e corrigida Cálculo dos resultados da análise
Os resultados podem ser avaliados com a tabela em anexo ou com uma curva de referência calculada no laboratório. A concentração de brinogénio é dada em g/l. Os dados fornecidos na tabela de avaliação só são válidos para reagentes com números de lote correspondentes e para os analisadores de coagulação indicados. É necessário calcular uma curva de referência separada para cada analisador de coagulação, independentemente de ser ou não automatizado. As curvas de referência da tabela de avaliação podem ser vericadas com a ajuda de Plasma de Controlo N, Ci-Trol ® Level 1 ou com o Plasma de Controlo P. Se os resultados medidos estiverem fora do intervalo indicado, nesse caso deverá calcular-se uma curva de referência especíca do laboratório.
Limitações de execução do teste Os produtos de degradação de brina(ogénio) a levam a tempos de coagulação prolongados, originando, assim, uma recuperação reduzida do brinogénio. A heparina (até 2 U/ml) não perturba o teste. Sob o efeito de terapia com inibidores directos da trombina, como p. ex., a hirudina, pode ocorrer uma recuperação reduzida 3. Nalguns coagulómetros da série KC 4/10/40 podem ocorrer determinações erradas durante o processamento do teste. Nos plasmas de controlo preparados articialmente, p. ex., diluídos, para o intervalo inferior de alguns fabricantes, pode ocorrer uma recuperação acima do intervalo declarado, se a matriz da amostra não for sucientemente semelhante ao plasma. Neste caso, é aconselhável utilizar o Plasma de controlo P da Siemens. A Siemens validou a utilização destes reagentes em vários analisadores, com o intuito de optimizar o desempenho do produto e satisfazer as especicações do produto. As modicações denidas pelo utilizador não são suportadas pela Siemens, na medida em que podem afectar o desempenho do sistema e os resultados do ensaio. Constitui responsabilidade do utilizador validar as modicações efectuadas nestas instruções ou em relação ao uso dos reagentes noutros analisadores que não os incluídos nas folhas de instruções de aplicação da Siemens ou nestas instruções de utilização. Os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médico do doente, estado clínico e outros dados de interesse.
Valores expectáveis 1,8 – 3,5 g/l4 Os desvios sistemáticos destes intervalos podem ser devidos aos aparelhos. Se for necessário, o laboratório deverá estabelecer um intervalo de referência próprio.
Características de performance do teste Intervalo de medição e sensibilidade
O intervalo de medição situa-se entre 0,8 a >12 g/l, e ainda é inferior para os coagulómetros com medição sensível. Precisão
A precisão de Multibren* U no BCS ® foi determinada com os Plasmas de controlo N e P durante 5 dias com determinações repetidas oito vezes . O coeciente de variação dentro da série foi de 2,9 % e 7,2 % para o Plasma de Controlo N e o Plasma de Controlo P, respectivamente. De dia para dia, foi de 1,6 % e 3,4 %.
Bibliograa Veja página 1. Ci-Trol e BCS são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics. * Multibren e BFT são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics.
Edição Julho 2008
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