Laboratorio de Bioquímica II
Practica # 10. Determinación de colesterol sérico y HDL colesterol Universidad Autónoma de Ciudad Juárez – Instituto de Ciencias Biomédicas Licenciatura en Química – Laboratorio de Bioquímica II Adriana Lucely Euan Ku 91883 – Equipo No. 4
Introducción Los lípidos se clasifican de acuerdo a si son saponificables o no saponificables, dentro de esta ultima clasificación se encuentra los esteroles al cual pertenece el colesterol, este lípido se encuentra en tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de lo vertebrados. Se encuentra en altas concentraciones en el hígado, medula espinal, páncreas y cerebro. Desempeña diversas funciones dentro del cuerpo humano, ya se estructural y como precursor de la vitamina D, hormonas sexuales, hormonas corticoesteroidales, sales biliares y de las balsas 2 de lípidos . Debido a su insolubilidad en agua, el colesterol plasmático solo existe en la forma de complejo llamado lipoproteínas, principalmente LDL y HDL, que tiene la capacidad de fijar y transportar grandes cantidades de colesterol; el primero se relaciona mucho con la arteriosclerosis. Las lipoproteínas plasmáticas son partículas que solubilizan y transportan el colesterol en el torrente sanguíneo. La función principal de las lipoproteínas de alta densidad o HDL en el metabolismo lipídico es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). El HDL colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de HDL colesterol es una herramienta útil en la identificación de 1 individuos de alto riesgo . La concentración aceptada como normal de colesterol en plasma sanguíneo (colesterolemia) de personas sanas es de 150 a 280 mg/dL, sin embargo varían mucho las concentraciones. Cuando la concentración 1 aumenta se habla de hipercolesterolemia .
Adriana Lucely Euan Ku - 91883
Objetivo Determinar la concentración de colesterol total sérico y el de HDL, y su influencia en implicaciones clínicas Materiales y reactivos Suero Solución patrón Reactivo de colesterol colesterol Sobrenadante II
Metodología Para preprara el sobrenadante: se tomó 0.05 ml de suero + 0.05 ml de reactivo precipitante de HDL- COLESTEROL, se mezcló , se dejo reposar 5 min y se centrifugó 5 min a 3000 3000 rpm
Se prepararon 6 tubo de acuerdo a la sigueiente tabla
Reactivos (ml) Suero (ml) Patrón (ml) Agua (ml) Sobrenad ante II R Colesterol (ml)
Blanc o ---
Patrón
HDL
P1
P2
P3
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---
0.05
0.05
0.05
---
0.05
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---
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0.05
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0.05
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2
2
2
2
2
2
Todos los tubo se mezclaron y se dejó dejó que se lleve a cabo la reaccion durante 20 min y se anadió anadió 0.2 ml de H2SO4
Todo lo anterior se realizo sobre hielo y luego se ó suavemente
Se leyeron las absorbancias a una longitud de onda de 640 nm
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Laboratorio de Bioquímica II
Cálculos [Colesterol T]=Abs Prob/Abs patrón x [patrón] [HDL colest.]=absProb/abs patrón x [patrón] Factor de riesgo coronario=colesterol T/HDL
Resultados Tabla 1. Absorbancias de los diferentes parámetros medidos
Parámetros Blanco Patrón HDL-colesterol Problema 1 Problema 2 Problema 3
Absorbancia 0 0.012 0.150 0.162 0.152 0.173
Tabla 2. Resultado de los diferentes parámetros determinados
Parámetros Problema 1 Problema 2 Problema 3 HDL colesterol (p. 2) FRC
Resultados (mg/dL) 2491.08 2267.33 2580.58 2237.5 1.013
Discusión De acuerdo con los resultados obtenidos es posible observar que los valores de las tres muestras problemas están mu fuera del rango 2 normal (> 280 mg/dL) , debido a que hubo una falla en el equipo (espectrofotómetro) y por eso los resultados de las Absorbancias nos arrojaron valores indeseados, lo mismo que para el patrón, al salir muy baja la Absorbancia (0.012). Ver tabla 1 y 2. De acuerdo a la bibliografía los valores de referencia de colesterolemia son: por debajo de los 200 mg/dL es la concentración deseable ya que se relaciona con un bajo riesgo de enfermedad cardiovascular, cuando los valores están entre los 240 y 270 mg/dl hay un riesgo intermedio y, cuando es mayor a los 280 mg/dL se dice que hay un alto riesgo cardiovascular muy alto, por ello es recomendando iniciar un 1 cambio en el estilo de vida (dieta y ejercicio) .
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Los valores normales de colesterol HDL son de 40-60 mg/dL, sin embargo si los valores sobrepasan un poco, es muy aceptable debido a que las HDL son consideradas como Factor Protector, ya que es el encargado de recolectar el colesterol de los tejidos y llevarlos al hígado para su procesamiento, por otro lado están las LDL (Low Density Lipoproteín), consideradas como Factor de Riesgo y cuyos valores están por debajo de los 140 mg/dL. Con respecto al factor de riesgo coronario, el valor es muy bajo (1.033 mg/dL) lo que indica que no se relaciona con un factor de riesgo cardiovascular, sin embargo el promedio normal en hombres es de 3.43 y en mujeres de 3.27.
Conclusión El colesterol sérico total tiene una utilidad comprobada en el diagnóstico de hiperlipoproteinemia, arteriosclerosis, enfermedades hepáticas y tiroidales. El colesterol total y el colesterol HDL, junto con una determinación de triglicérido proveen una información valiosa para la predicción de la enfermedad coronaria del corazón, y para el genotipo de lipoproteína de acuerdo a la clasificación de Fredickson. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo), en cambio el colesterol HDL (colesterol bueno) se transporta al hígado para su metabolización y excreción por vía biliar y por tanto no se asocia con riesgo de enfermedades coronarias . Bibliografía
1. Ferri, Fred. Consultor Clínico de Medicina Interna: Claves Diagnosticas y Tratamientos. Editorial Océano Mosby. Cuarta edición. Barcelona, España. 2006. Pág.421, 1271 2. Murray, Robert; Mayes, Peter A, et al. Harper, Bioquímica Ilustrada. Editorial Manual Moderno. 16ª Edición. México, D.F. 2005. Pág. 125, 131.
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