preinforme bioquimica

Universidad Industrial de Santander Tecnología en Regencia de Farmacia

PRACTICA DE LABORATORIO- PREINFORME ASTRID CONTRERAS ISABEL VARGAS JESICA ROJAS CAROLINA BIOQUÍMICA FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

OBJETIVOS El desarrollo de este laboratorio permitirá corroborar, con la práctica, lo aprendizajes aprendizajes teóricos logrados l ogrados hasta el momento. En forma específica, esta experiencia le permitirá: 1. Establecer la relación entre la velocidad de reacción y la concentración concentración de la enzima, manteniendo constante los factores de la actividad enzimática. 2. Confrontar la fundamentación fundamentación sobre la cinética de la actividad enzimática con los resultados obtenidos en el laboratorio. 3. Identificar la función de la catalasa en los seres vivos como la oxidoreductasa.

FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA


la

conocida

importancia

biológica

de

los

sistemas

tampón.

En la mayor parte de los casos el pH óptimo está próximo a la neutralidad, en consonancia con el pH intracelular, pero existen enzimas con pH óptimo muy diverso según sea el pH del medio en el que habitualmente actúan (los enzimas proteolíticos del jugo gástrico tienen pHs óptimos próximos a 2 ya que este es el pH de dicho jugo). Por último existen algunos enzimas a los que el pH no afecta en absoluto. -EFECTO DE LA TEMPERATURA.


análoga

al

pH

óptimo

estudiado

anteriormente;

hay que resaltar que esa aparente temperatura óptima no es más que el resultado de dos procesos contrapuestos: 1) el incremento habitual de la velocidad de reacción con la temperatura y 2) la desnaturalización térmica del enzima.


1. Colocar en un tubo de ensayo 25 ml de agua destilada y enfriarla sobre hielo picado. 2. Obtener 0.02ml de sangre de la punta del dedo y para ello se hace un pinchazo con lanceta estéril. 3. Dejar caer 0.02 ml de la sangre sobre el agua destilada y lavar varias veces la pipeta en el agua. 4. Mantener la solución en agua helada para evitar el deterioro de la enzima.

Procedimiento 1. Tomar 5 tubos de ensayo y numerarlos 2. A cada tubo agregar 3 ml de H2O2 al 0.24% y pH 7 3. A cada uno de los tubos agregar solución enzimática de catalasa así: Tubo 1 0.0ml Tubo 2 0.1 ml Tubo 3 0.2ml Tubo 4 0.3ml Tubo 5 0.4ml Tubo 6 0.8ml 4. Dejar reposar por 5 min      


Tubo

Ml de MICROMOL H2O2 DE H2O2

ML DE ML DE MICROMOLREMANEN ENZIMA H2SO4

1

0.0

2

0.1

3

0.2

4

0.4

5

0.8

MICROMOL DESTRUIDO EN 5MIN

VELOCIDAD MMOL DESTR.1MIN


preinforme bioquimica

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