DETERMINACION DE VITAMINA C CON 2.6 DICLOROFENOLINDOFENOL INTRODUCCION El enanti enantiome ometr tro o L del acido acido asc ascór órbic bico o (ascór (ascórbi bico co proce procede de de su capaci capacidad dad para para preveni prevenirr y curar curar el escorbuto), escorbuto), también también conocido conocido como vitamina vitamina C , es un acido orgánico y un antioxidante perteneciente al grupo de vitaminas hidrosolubles. o se sinteti!a en el organismo, por lo cual tiene "ue ser aportada en la dieta. #e encuentra, principalmente en verduras y $rutas $rescas y en las !umos de c%tricos. La mayor%a de las especies animales y vegetales sinteti!an su propia vitamina C& por lo cual no constituye una vitamina para ellos. La s%ntesis se reali!a en etapas catali!adas por cuatro en!imas "ue convierten la glucosa en acido ascórbico. producto
'g** g de producto $resco
guayaba
+-
imenton
-
brocoli
*
/i0i
1*
$resa
2*
Limón y naran3a
4* Contenido de vitamina C por cada ** g
#e considera "ue las necesidades diarias de acido ascórbico para un adulto no exceden de los 2* mg y "ue las cantidades superiores a las - g diarios causan acidi5cación de la orina e incrementa el consiguiente riesgo de cálculos urinarios. La $ormula molecular de la vitamina C es y su masa molecular6 molecular6 2, gmol. #e presenta en $orma de cristales blancos con ligero tono amarillo y posee un sabor acido caracteristico. La vitamina C se disuelve rápidamente en agua y etanol, pero es insoluble en cloro$ormo cloro$ormo y eter. 7na solución acuosa acuosa del 48 tiene un p9 de +,+ : +,4. El acido ascórbico se oxida $ácilmente en presencia de la lu! y el aire por lo "ue se utili!a, como revelador $otogra5co y como conservante. El acido ascórbico y sus sales de sodio, potasio y calcio (ascorbatos minerales) son solubles en agua por lo "ue no protegen a las grasas de la oxidación. Los ascorbatos minerales se preparan a partir de reacc reacción ión del acido acido con con los respe respecti ctivos vos carbon carbonato atoss y bicar bicarbon bonato atoss de calci calcio, o, magnesio, potasio y sodio. Los ascorbatos minerales pueden ser me3or tolerados "ue la vitamina en su $orma acida.
El ascorbatos como antioxidantes debido a "ue su oxidación es menos energética "ue la de otras especies. Las especies oxidantes, tales como el radical hidroxilo $ormado a partir del peróxido de hidrogeno, contienen un electron no apareado "ue las hace extremadamente reactivas y da;inas a nivel molecular, tanto para el ser humano como para las plantas. Esto se debe a su interaccion con los acidos nucleicos, las prote%nas i los l%pidos. Las especies oxidantes con oxigenos reactivos pueden abstraer un atomo de hidrogeno del ascorbato, "ue se convierte en monodeshidroascorbato "ue inmediatamente pierde otro electron para convertirse en deshidroascorbato. La vitamina C debe su acide! a los grupos <=9 próximos al doble enlace. 7no de estos, el "ue se encuentra sobre el carbono mas ale3ado del grupo carbonilo, $orma un doble enlace con el carbono próximo (carbono gamma) cediendo un par de electrones, y convirtiéndose en un grupo oxonio (>=9?). #imultáneamente, el doble enlace C>C se mueve hacia el carbono del grupo ester de la lactona, y consecuentemente, el par de electrones del doble enlace carbonilo (C>=) se trans5ere al atomo de oxigeno de oxigeno para $ormar un enolato (C:=:). 7na ve! $ormada, la especie oxonio:enolato se desprotona dando a un carbonilo el carbono gamma& este protón es el causante de la acide! del acido ascórbico. Este enolato entra en resonancia con la especie oxonio: enolato, lo cual le da gran estabilidad. El acido ascórbico también posee dos tautomeros inestables "ue se interconvierten rápidamente con la intervención del proton.las especies dicetona pueden ser dos6 la ,+ dicetona i la ,-.
El método usado en la práctica se basa en el poder reductor del acido ascórbico. El acido ascórbico se determina por valoración con el colorante +,2 dicloro$enolindo$enol "ue es reducido por el acido ascórbico a una $orma incolora en medio acido. La $orma oxidada del reactivo es a!ul y la reducida incolora.
OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL - @eterminar la presencia y cantidad de vitamina c en muestras de !umos de $rutas mediante el uso de +,2 @icloro$enolindo$enol.
OBJETIVO ESPECIFICO - @etectar la presencia y cantidad de vitamina c en muestras de !umos de $ruta comerciales Aampico y Bruba. - Aomar conciencia de la importancia de conocer la composición de los alimentos "ue consumen como un primer paso para conseguir una dieta e"uilibrada y saludable.
FUNDAMENTO TEORICO
La vitamina C es una vitamina hidrosoluble sensible al calor. u%micamente hablando, se trata de ácido L:ascorbico y sus sales, los ascorbatos (los más comunes, "ue son ascorbatos de sodio y de calcio). Accin La vitamina C es un co$actor en!imático implicado en diversas reacciones 5siológicas (hidroxilación). Es necesaria para la s%ntesis del colágeno y de los glóbulos ro3os, y contribuye al buen $uncionamiento del sistema inmunitario. Aambién 3uega un papel en el metabolismo del hierro, en la trans$ormación de dopamina en noradrenalina y en la bios%ntesis de carnitina. Da3o su $orma oxidada, atraviesa la barrera hemato:ence$álica para acceder al cerebro y a varios órganos. 'uy $rágil en solución, se destruye al contacto con el aire, por la lu! o el calor. #e trata de un antioxidante, molécula capa! de contrarrestar la acción nociva de oxidantes como los radicales libres. Con este 5n, también se emplea la $orma : del ácido ascórbico, la cual, al contrario "ue la $orma L:, no presenta actividad vitam%nica. F7CG=E# La vitamina C se necesita para el crecimiento y reparación de te3idos en todas las partes del cuerpo. #e utili!a para6 •
Formar una prote%na importante utili!ada para producir la piel, los tendones, los ligamentos y los vasos sangu%neos.
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#anar heridas y $ormar te3ido cicatricial.
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eparar y mantener el cart%lago, los huesos y los dientes. La vitamina C es uno de muchos antioxidantes, los cuales son nutrientes "ue blo"uean parte del da;o causado por los radicales libres.
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Los radicales libres se producen cuando el cuerpo descompone el alimento o cuando usted está expuesto al humo del tabaco o a la radiación. La acumulación de radicales libres con el tiempo es ampliamente responsable del proceso de enve3ecimiento. Los radicales libres pueden 3ugar un papel en el cáncer, la cardiopat%a y trastornos como la artritis. Los antioxidantes también ayudan a reducir el da;o corporal causado por los "u%micos y contaminantes tóxicos como el humo del cigarrillo. El cuerpo no puede producir la vitamina C por s% solo, ni tampoco la almacena. or lo tanto, es importante incluir muchos alimentos "ue contengan esta
vitamina en la dieta diaria. @urante muchos a;os, la vitamina C ha sido un remedio popular para el res$riado comHn. •
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La investigación muestra "ue, para la mayor%a de las personas, los suplementos de vitamina C o los alimentos ricos en dicha vitamina no reducen el riesgo de contraer el res$riado comHn. #in embargo, las personas "ue toman suplementos de vitamina C regularmente podr%an tener res$riados ligeramente más cortos o s%ntomas algo más leves. Aomar un suplemento de vitamina C después de "ue empiece un res$riado no parece servir. GIE#AB @GBGB EC='E@B@B En abril del +*** en Gnstituto de 'ecicina en EE 77 publico las ultimas recomendaciones sobre las ingestas diarias de vitamina c. Estas sond e 1* mgdia para un 9omre adulto y 4 mgdia para una mu3er adulta (lo "ue supone un aumento sobre las ingestas de 2* mgdia recomendadas anteriormente). Las dosis máximas tolerables se situan en los +*** mgdia. @EFGCGECGB Las encuestas alimentarias en muchos pa%ses de Bsia, J$rica y Bmérica Latina indican "ue grandes segmentos de sus poblaciones consumen mucho menos cantidad de vitamina C de la "ue se considera esencial o deseable. #in embargo, el escorbuto, la en$ermedad clásica y seria "ue resulta de una carencia grave de vitamina C, ahora parece ser relativamente poco comHn. ingHn pa%s in$orma "ue el escorbuto es un problema importante de salud, pero en cambio se veri5can epidemias en los campos de re$ugiados, durante hambrunas y a veces en las cárceles. El escorbuto se reconoció por primera ve! en los siglos K y KG como una en$ermedad grave de los marinos en via3es largos por mar, pues no ten%an acceso a alimentos $rescos, incluyendo $rutas y verduras (véase el Cap%tulo ). Bntes de la era de la investigación sobre vitaminas, la marina inglesa estableció como práctica suministrar limones y otros $rutos c%tricos a los navegantes para evitar el escorbuto. La vitamina C o ácido ascórbico es un nutriente esencial y necesario para la $ormación y mantenimiento saludable del material intercelular (véase el Cap%tulo )& "ue es como un cemento "ue une células y te3idos. En el escorbuto, las paredes de los vasos sangu%neos muy pe"ue;os, los capilares,
carecen de solide! y se vuelven $rágiles, sangran y su$ren hemorragias en diversos sitios. La carencia moderada de vitamina C puede incidir en una cicatri!ación pobre de las heridas. Como se mencionó en el Cap%tulo -, la vitamina C aumenta la absorción de hierro y por lo tanto inMuye en la reducción de la anemia por carencia de hierro. Blgunos anticonceptivos orales disminuyen los niveles de vitamina C en el plasma. MANIFESTACIONES CL!NICAS
#e pueden presentar los siguientes s%ntomas y signos6 •
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cansancio y debilidad& enc%as inMamadas "ue sangran $ácilmente en la base de los dientes (Foto -4)& hemorragias en la piel (Foto -2)& otras hemorragias, por e3emplo, sangrado nasal, sangre en la orina o en las heces, estr%as hemorrágicas deba3o de las u;as o hemorragias subperiósticas&
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demora en la cicatri!ación de las heridas&
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anemia.
7n su3eto con escorbuto "ue muestre algunos de los s%ntomas anteriores, aun"ue no pare!ca muy gravemente en$ermo, puede $allecer de repente por insu5ciencia card%aca. Bun"ue el escorbuto es una en$ermedad relativamente rara, la inMamación y sangrado de las enc%as es bastante $recuente en ciertas regiones geográ5cas y puede deberse a $alta de vitamina C. La carencia subcl%nica de vitamina C también puede ocasionar una cicatri!ación lenta de las heridas o Hlceras. Los pacientes "ue se van a someter a cirug%a deben recibir vitamina C si muestran carencia. La anormalidad en los niveles de vitamina C puede también contribuir a la anemia durante el embara!o.
PROCEDIMIENTO E"PERIMENTAL Aomar 4 ml de muestra en un Erlenmeyer de +4 ml y se disuelve con * ml de agua destilada recientemente hervida y en$riada se a;ade * ml de acido oxálico al +8 y se agita la solución. #e procede a la valoración con dicloro$enolindo$enol contenido en una bureta graduada hasta "ue se obtiene coloración débilmente rosada. El cambio de coloración suele ser di$%cil observar debido a la coloración "ue posee la solución problema. En este caso se a;ade éter cuando se provee "ue esta a punto de alcan!ar el punto 5nal de la valoración para distinguir los colores.
DATOS # CALCULOS
RESULTADOS # OBSERVACIONES La muestra de Bruba dio resultados de 6
La muestra de Aampico dio como resultado de6
La vitamina C es un $uerte reductor "ue cambia el color de la disolución de +,2 dicloro$enolindo$enol al pasar este de su estado oxidado a reducido. La disolución patrón de vitamina c es de concentración conocida6 8 en masa, por lo "ue 4 gotas (aprox *,2 ml) contendrá *,*- mg de vitamina c. Como con 4 gotas de este patrón logramos la decoloración del indicador del indicador sabemos "ue son necesarios como máximo *,*- mg de vitamina C para reducir *,- ml de la disolución del indicador. #abiendo esto podemos calcular la cantidad de vitamina C "ue contienen los distintos !umos investigados segHn el volumen "ue necesitemos para producir la decoloración. Los resultados obtenidos son acordes a los datos estad%sticos respectivos "ue se conoc%a de las muestras anali!adas.
CONCLUSIONES En nuestra práctica de laboratorio se determino la presencia y la cantidad en mg de itamina C en las muestras de los !umos de $rutas comerciales de Bruba y Aampico. Con los conocimientos teóricos ad"uiridos entendimos "ue el consumo de la itamina C es importante para tener una dieta e"uilibrada y saludable ya "ue
su de5ciencia puede conducirnos a di$erentes en$ermedades en distintas etapas de la vida.
CUESTIONARIO $. INDICAR OTROS METODOS PARA LA DETERMINACION DE VITAMINA C.
odemos indicar los siguientes métodos6 La determinación de Bcido Bscórbico puede reali!arse $ácilmente mediante titulación con @CFG pero solo se esta determinando BB y en algunos casos pueden ocurrir inter$erencias. El método de @E7A#C9 N OEEP# con el derivado de "uinolina Muorescente $ormado con $enilendiamina proporciona una manera con5able de medir la vitamina c QtotalR. #i ha de determinarse el acido ascórbico A=ABL, 9LC puede proporcionar una alternativa con5able suponiendo "ue utili!an condiciones apropiadas, extracción para la reducción B@B a BB previo a cuanti5cación con 9LC. 2. %UE INCOVENIENTES TIENE EL USO DEL METODO 2&6 DICLOROFENOLINDOFENOL PARA LA DETERMINACION DE VITAMINA C.
El método aun"ue es bastante usado, sin embargo da valores demasiados altos, si existen en la solución otras sustancias reductoras como compuestos orgánicos con grupos sul5drilos y el anhidro sul$uroso, 'ic()*)+,n)(in')+,n)( no presente como aditivo. Bdemás el 2&6 reacciona con el acido dehidroascorbico, presente en los productos naturales y dotados también de actividad 5siológica de la vitamina C. El inconveniente mas comHn seria a la hora de titular encontrar el color rosado "ue nos indica "ue la titulación ah 5nali!ado y as% proceder a la lectura de cuanto gastamos de nuestro reactivo en cuestión.
7GE#G@B@ 'BN= @E #B #G'= FBC7LAB@ @E CGECGB# N AEC=L=IGB GIEGEGB @E BLG'EA=#
@EAE'GBCG= @E GAB'GB C C= +,2 @GCL==FE=LG@=FE=L @=CEAE6 LGC. 'BGB E#A9E IGBGG S. ='DE#6 BLB= LG'BC9G C== #AEFFG CBGLE# C9GG=# T9BGCE CBGLE# C9GG=#
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