UJI BIURET

LAPO AN PRAKTIKUM BIOKIMIA PENETAPAN KADAR PROTEIN SECARA B URET

Trusted by over 1 million members

Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.

PERCOBAAN VI PENETAPAN KADAR PROTEIN SECARA BIURET

I.

TUJUAN

Dapat menetapkan kadar protein dengan metode Biuret.

II.

DASAR TEORI

Protein berasal dari kata Yunani kuno proteos artinya “yang utama”. Dari asal kata ini dapat diambil kesimpulan kesimpulan bagaimana pentingnya protein dalam dalam kehidupan. Protein terda



tertentu berbanding berbanding lurus dengan dengan kadar protein dan cara ini sering dipakai dalam dalam pengujian protein (Montgomery, 1993). Kerugian dari metode ini adalah hasil penetapannya tidak murni menunjukkan kadar protein, melainkan bisa saja kadar senyawa, yang mengandung benzena, gugus fenol, gugus sulfhidrin, ikut terbaca kadarnya. Selain itu, waktu penetapan yang dipergunakan juga lama, sehingga sering kali dinilai kurang efektif (Lehninger, 1982).

III.

ALAT DAN BAHAN

1. Alat : Tabung reaksi

2.

Bahan : Reagen Biuret



3. Penyiapan sampel Pipet 1 ml albumin telur, masukkan dalam labu ukur 10,0 ml Encerkan dengan aquadest hingga batas

Replikasi sampel 3 kali 4. Pembua Pembuatan tan kurv kurvaa baku baku dan peny penyiap iapan an samp sampel el Semua seri larutan baku dan sampel ditambahkan reagen Biuret

Vortex sampai homogen

Diamkan selama 30 menit pada suhu ruang



Absorbansi sampel

Konsentrasi sampel

̅

No.

− ̅

|

− ̅|

(y)

(x)

1.

0,378

2,081

*

-0,408

0,166

2.

0,382

2,106*

-0,383

0,147

3.

0,464

2,604

0,115

0,013

4.

0,467

2,622

0,133

0,018

5.

0,467

2,622

0,133

0,018

6.

0,451

2,525

0,036

1,296 x 10

7.

0,448

2,507

0,018

3,24 x 10

2,489

-3

-4



VI.

PEMBAHASAN

Pada percobaa percobaan n kali ini, praktikan praktikan melakuka melakukan n penetapan penetapan kadar protein protein secara secara Biuret dengan dengan menggunakan spektrofotometer. spektrofotometer. Prinsipnya adalah adalah pengukuran serapan cahaya cahaya oleh ikatan kompleks berwarna ungu yang yang terjadi bila protein bereaksi bereaksi dengan ion Cu2+ dalam suasana basa. Reaksi Biuret menggunakan menggunakan 3 macam reagen, yaitu reagen reagen A, B, dan C. Reagen A terdiri dari CuSO4 dalam dalam aquade aquadest. st. CuSO CuSO4 ini berfungsi sebagai penyedia ion Cu

2+

yang nantinya akan

membentuk kompleks dengan dengan protein. Reagen B mengandung mengandung KI dalam aquadest. KI ini berfungsi untuk mencegah terjadinya reduksi pada Cu

2+

sehingga tidak mengendap. Sedangkan pada reagen C

terdiri dari Na-sitrat, Na2CO3, dan NaOH NaOH.. Na-sitr Na-sitrat at dan Na Na2CO3 berfungsi berfungsi sebagai sebagai buffer buffer dan NaOH berfungsi untuk menyediakan suasana basa. Suasana basa akan membantu membentuk Cu(OH) 2 2+

yang nantinya akan menjadi Cu

-

dan 2OH .





mg/mL), dan sampel sampel 9 (2,726 mg/mL). mg/mL). Keadaan yang tidak sesuai dengan rentang rentang kadar larutan larutan baku dapat dipengaruhi beberapa faktor antara lain : 1. Parti artik kel Besar kecilnya partikel dapat menyebabkan pemantulan. Pemantulan ini akan mempengaruhi besarnya absorbansi. Makin besar partikel, absorbansi makin besar juga.





VII.

KESIMPULAN

1. Kadar Kadar prote protein in dapat dapat dite ditentu ntukan kan deng dengan an metod metodee Biuret Biuret.. 2. Prinsip Prinsip metode metode Biuret Biuret adalah adalah reaksi reaksi protein protein dengan dengan ion Cu Cu2+ pada suasana basa yang menghasilkan warna ungu dan absorbansinya diukur pada λ 540nm. -2

3. Didapa Didapatka tkan n persa persamaa maan n kurva kurva baku baku y = 0,16 0,1645 45 x + 3,56 3,56 x 10 dari standar yang telah





0,6

0,5

(sampel 4 dan5) (sampel 6) (sampel 9)

UJI BIURET

Recommend Documents