PRACTICA DE LABORATORIO N° 4 CATÁLISIS ENZIMATICA E INORGÀNICA
BIOQUÍMICA
PRESENTADO POR: ISA KATHERINE POLO ARIAS WENDY VANESSA RIOS MORALES YOEMIS TORDECILLA ARRIETA ANDRÉS MAURICIO ALEMÁN MEDRANO HAN !REDY ABAD EVIS RAQUEL DURANDO PRESENTADO A: AMELIA ESPITIA ESPITI A ARRIETA GRUPO " B MONTERÍA# NOCHE VI SEMESTRE
UNIVERSIDAD DE C$RDOBA !ACULTAD DE EDUCACI$N Y CIENCIAS HUMANAS DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACI$N AMBIENTAL MONTERÍA% MARZO &' DE &(")
INTRODUCCI$N Las Las célu célula lass llev llevan an a cabo cabo simu simult ltáne áneam amen ente te una gran gran cant cantid idad ad de reacci reaccione oness químicas químicas necesarias para la vida. Muchos de los productos productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no fuera por la participación de las enzimas, algunas reacciones no se producirían tan rápido. Las enzimas, en su mayoría proteínas o !" #riboenzimas$, son catalizadores químicos que agilizanuna reacción que envuelve la formación o rompimiento de enlaces químicos. Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razón por lo cual no se necesitan en grandes cantidades. Las enzimas act%an sobre los sustratos formando un comple&o enzima'sustrato( esto ocurre en un lugar en específico conocido conocido como el sitio activo de la enzima. Las enzimas son muy selectivas selectivas porque pocas moléculas pueden interactuar bien con este sitio. Las enzimas son proteínas que realizan la catálisis de las reacciones químicas que se llevan a cabo en los seres vivos. "unque las reacciones enzimáticas obedecen a los mismos principios de la cinética química, se diferencian de éstas por el hecho de que las enzimas son saturadas por los substratos. )stos análisis &uegan un papel importante en la bioquímica ya que son valiosas herramientas herramientas para comparar la acción catalíti catalítica ca de la enzima catalasa catalasa y cómo influye la temperatura allí.
INTRODUCCI$N Las Las célu célula lass llev llevan an a cabo cabo simu simult ltáne áneam amen ente te una gran gran cant cantid idad ad de reacci reaccione oness químicas químicas necesarias para la vida. Muchos de los productos productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no fuera por la participación de las enzimas, algunas reacciones no se producirían tan rápido. Las enzimas, en su mayoría proteínas o !" #riboenzimas$, son catalizadores químicos que agilizanuna reacción que envuelve la formación o rompimiento de enlaces químicos. Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razón por lo cual no se necesitan en grandes cantidades. Las enzimas act%an sobre los sustratos formando un comple&o enzima'sustrato( esto ocurre en un lugar en específico conocido conocido como el sitio activo de la enzima. Las enzimas son muy selectivas selectivas porque pocas moléculas pueden interactuar bien con este sitio. Las enzimas son proteínas que realizan la catálisis de las reacciones químicas que se llevan a cabo en los seres vivos. "unque las reacciones enzimáticas obedecen a los mismos principios de la cinética química, se diferencian de éstas por el hecho de que las enzimas son saturadas por los substratos. )stos análisis &uegan un papel importante en la bioquímica ya que son valiosas herramientas herramientas para comparar la acción catalíti catalítica ca de la enzima catalasa catalasa y cómo influye la temperatura allí.
OBETIVOS •
*omparar la acción catalítica de la enzima catalasa, con la de un catalizador inorgánico como el bió+ido de manganeso #Mn-$ al descomponer el peró+ido de hidrogeno #--$.
•
bservar el efecto de la temperatura sobre la acción catalítica de una enzima y comparar el mismo efecto de temperatura sobre un catalizador inorgánico.
•
bservar la acción de un inhibidor.
•
Medir la actividad catalítica en base a la producción de calor.
MARCO TEORICO
Las enzimas son proteínas de alto peso molecular, act%an como catalizadores y controlan los procesos metabólicos de la célula, determinando el inicio y la marcha de algunas reacciones. Los catali catalizado zadores res son sustan sustancia ciass que aceler aceleran an o retard retardan an la veloci velocidad dad de una reacción, sin sufrir un cambio químico en el proceso. " los que aceleran una reacción se les llama positivos y a los que las retardan, negativos. Las enzimas act%an generalmente como catalizadores positivos. Las enzimas realizan una determinada función, por e&emplo, la enzima de la saliva #la amilasa$ act%a sobre los almidones que comemos y los transforma en maltosa. Las células utilizan procesos catalíticos para acelerar la velocidad de cada reacción. Las reacciones catalizadas por enzimas se encuentran ba&o estricto control celular. Los biólogos han encontrado que casi todas las reacciones químicas de los seres vivos se llevan a cabo con la ayuda de catalizadores. *ada enzima interviene en una sola reacción( debido a la forma de su superficie, sólo pueden acoplarse en ella ciertos tipos moleculares. Las reacciones químicas químicas en los organismos organismos vivos actuales, se realizan realizan dentro de un margen de temperatura muy estrecho. /arías enzimas sólo pueden funcionar en presencia de uno o más iones o de determinadas moléculas llamadas activadores enzimáticos. )stas moléculas no toman parte directa en la acción, pero mantienen a la enzima, en un estado catalítico activo. )ntre los iones más comunes encontramos al potasio #01$, el magnesio #Mg11$, el calcio #*a11$, el cobalto #*o11$, el zinc #2n11$ y el aluminio #"l111$. " estas moléculas activadoras se les llama coenzimas y también pueden ser proteínas. )l mecanismo de la acción enzimática, conocido como mecanismo Michaelis' Menten, involucra una especie de reacciónate, llamado sustrato, que se une a un lugar activo de la enzima, con lo que resulta una comple&o enzima' sustrato. )ste comple&o se disocia para generar un producto y la enzima original.
La reacción que se presenta en la e+periencia a realizar se puede describir en la siguiente forma3
*atalasa
--
- 1
-
Mn& --
- 1
-
!ACTORES QUE A!ECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA: C*+,-+./0,12+ 3- 565./0.*: " mayor concentración del sustrato, a una concentración fi&a de la enzima se obtiene la velocidad má+ima. 4espués de que se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentración del sustrato no tiene efecto en la velocidad de la reacción.
C*+,-+./0,12+ 3- 0 -+7180: 5iempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentración de la enzima aumenta la velocidad enzimática hacia cierto límite.
T-89-/0.6/0: 6n incremento de 789* duplica la velocidad de reacción, hasta ciertos límites. )l calor es un factor que desnaturaliza las proteínas por lo tanto si la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su actividad.
PH: )l p óptimo de la actividad enzimática es :, e+cepto las enzimas del estómago cuyo p óptimo es ácido.
P/-5-+,10 3- ,*0,.*/-5: Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean activadores o coenzimas para funcionar adecuadamente. ;ara las enzimas que tienen cofactores, la concentración del cofactor debe ser igual o mayor que la concentración de la enzima para obtener una actividad catalítica má+ima. La catalasa es una enzima que se encuentra en el hígado y en la sangre y su función es evitar que el peró+ido de hidrógeno se acumule en las células, donde pueden intervenir con otras reacciones celulares. 4escompone a -- produciendo agua #-$ líquida y o+ígeno #-$ gaseoso.
- -- #ac$ < - - #=$ 1 - #g$ Las burbu&as #- gaseoso$ son una se>al de que está ocurriendo una reacción.
MATERIALES Y REACTIVOS MATERIALES
REACTIVOS
? tubos de ensayo
;ero+ido de idrógeno #--$ al @A
- pipetas de B y 78 ml
Ció+ido de Manganeso #Mn-$
CeaDer de E88ml
*ianuro de 5odio #!a*!$
*alentador
;apas como fuente de catalasa #traer$
;inza para tubos de ensayo
5angre como fuente de catalasa #e+traerse$
Fotero
"gua destilada
;robeta de 788ml
ielo #traer de la casa$.
)spátula Mortero con mano *uchilla #traer de la casa$ Fradilla Fasa #traer$.
PROCEDIMIENTO
"; R*.60/ ./-5 .6<*5 3- -+50=* = 0>/->0/ 0 ,030 6+* 05 51>61-+.-5 565.0+,105: Gubo !H7
7ml de sangre al 78A
Gubo !H-3
7 ml de e+tracto de papa.
Gubo !I@3
6na peque>a porción de Mn-
&? "gregar a cada uno de los tubos -ml de -- al @A. bservar la intensidad de la reacción por el burbu&eo del o+ígeno y la liberación de calor. *ompare el nivel alcanzado por las burbu&as en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.
O<5-/@0,1*+-5: A>/->0/ 0 ,030 6+* 3- *5 .6<*5 &8 3- H&O& 0 T6<* N": S0+>/- 0 "( )n esta observación pudimos notar la sangre pasa de color ro&o a ro&izo claro, formándose una efervescencia hasta quedar totalmente transparente, esta efervescencia alcanzo una altura apro+imadamente de @ cm.
T6<* N&: E./0,.* 3- 9090
"quí pudimos observar una efervescencia, lo cual ocasiono que todo el e+tracto de papa subiera hasta el tope del tubo de ensayo saliendo este burbu&eo por fuera del mismo.
T6<* N: M+O& "l adicionar a este tubo --, se generó un estado efervescente color grisáceo, la cual es producida por la reacción entre las dos sustancias. )sta reacción tuvo una altura de apro+imadamente @ cm
A,.1@1303 ,0.0F.1,0 •
5angre
•
)+tracto de papa Mn-
? ;repare @ tubos de acuerdo al numeral 7 y *olóquelos en un ba>o con agua a ebullición durante diez minutos, retirarlos y de&ar en reposo dentro de un ba>o de agua a temperatura ambiente durante 78 min. "dicionar a cada tubo -ml de -- al @A. *ompare el nivel alcanzado por las burbu&as en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base a este parámetro.
O<5-/@0,1*+-5: T6<* N": S0+>/- 0 "( "quí lo que se observa es un cambio de color trasparente opacoso con peque>os burbu&as por encima del tubo de ensayo. !o se generó ninguna reacción debido a que se desnaturaliza la enzima.
T6<* N&: E./0,.* 3- 9090 "quí en esta práctica no se generó
reacción alguna, debido a que la enzima se
desnaturaliza después de ser calentada
T6<* N: M+O& )n este tubo con Mn- al adicionarle -ml de --, se pudo observar en este caso una reacción, la cual se vio representada por un estado de efervescencia y un desprendimiento de vapor, teniendo una altura apro+imadamente de E cm.
A,.1@1303 ,0.0F.1,0: •
5angre +* 6<* /-0,,12+?
•
)+tracto de papa +* 6<* /-0,,12+? Mn- +* 6<* /-0,,12+?
4? ;repare nuevamente @ tubos de acuerdo al numeral 7 y colóquelos en un ba>o de hielo durante 78 min. "dicionar a cada tubo - ml de -- al @A. *ompare el nivel alcanzado por las burbu&as en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.
T6<*5 -+ <0* 3- 1-* O<5-/@0,1*+-5:
T6<* N": S0+>/- 0 "( )n este tubo al agregarle -- se puede observar una reacción burbu&eante y un cambio de color la cual a trasparente, su nivel alcanzo los @ cm de burbu&eo )sta es la catalasa de origen animal.
T6<* N&: E./0,.* 3- 9090 "l adicionar -- al e+tracto de papa, se generó un estado burbu&eante medio, además es una catalasa de origen vegetal.
T6<* N: M+O& La observación fue que al adicionar --, se pudo ver que al principio se formó una efervescencia, liberando en el determinado instante.
A,.1@1303 ,0.0F.1,0: •
5angre
•
)+tracto de papa Mn-
)? ;repare nuevamente @ tubos de acuerdo al numeral 7, adicione a cada tubo uno ? gotas de !a*! y de&ar en reposo durante B min, luego adicione -ml de -- al @A a cada tubo. *ompare el nivel alcanzado por las burbu&as en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.
O<5-/@0,1*+-5: T6<* N": S0+>/- 0 "( 0 .-89-/0.6/0 08<1-+.- ,*+ ,10+6/* 3- 5*31* 5e observó una reacción de cambio de color inmediato de ro&o a verdoso, pero no hay reacción aun, después de unos @8 segundos se genera la reacción, esta demora en reaccionar la cual esto se da debido al inhibidor que se utilizó en esta sección de esta práctica.
T6<* N&: E./0,.* 3- 9090 0 .-89-/0.6/0 08<1-+.- ,*+ ,10+6/* 3- 5*31* 5e observa una reacción muy lenta, generándose un peque>o burbu&eo esparciendo el e+tracto de papa hacia la superficie, esta reacción se demoró apro+imadamente un minuto, es necesario aclarar que el paso de partículas del e+tracto de papa hacia la superficie fue paralelo al tiempo de la reacción.
T6<* N: M+O& 0 .-89-/0.6/0 08<1-+.- ,*+ ,10+6/* 3- 5*31* )n este tubo al adicionarle cianuro de sodio N0CN? se observa una reacción efervescente en ebullición de color gris, desprendiendo ligeramente vapor, por lo cual se genera la reacción enzimática.
A,.1@1303 ,0.0F.1,0: •
5angre
•
)+tracto de papa MnPREGUNTAS
"; E91J6- 9*/ J6 - ,09.*9/1 = - -+0*9/1 5*+ --89*5 3- 1+1<13*/-5 ,*89-.1.1@*5 3- 0 -+7180 ,*+@-/5*/0 3- 0 0+>1*.-+51+0; R Los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina #J)*"$ son una clase de medicamentos que se emplean principalmente en el tratamiento de la hipertensión arterial, de la insuficiencia cardíaca crónica y también de la )nfermedad renal crónica y forman parte de la inhibición de una serie de reacciones que regulan la presión sanguínea3 el sistema renina angiotensina aldosterona. Los inhibidores )*" como el captopril, el enalapril y sus sustancias derivadas tienen una estructura similar a la del péptido C;;Ba o péptido potenciador de la bradiquinina, #C;;, de las siglas en inglés KbradyDinin' potentiating peptide$(
aislado
del veneno de
la
serpiente
&araracá
o
víbora
lanceolada brasile>a#Cothrops &araracá$. 5e ha descubierto que la secuencia tripéptida de triptófano'alanina'prolina formada por tres aminoácidos y que aparece en el C;;Baes uno de los componentes activos en las propiedades de estas molécula. ;uesto que el cuerpo
elimina con mucha rapidez el C;;Ba y el tripéptido, se han llevado a cabo numerosas modificaciones en la molécula para prolongar la duración del efecto, entre ellas, se ha cambiado la secuencia del triptófano'alanina'prolina por una secuencia similar pero más estable de fenilalanina'alanina'prolina. La aportación de una estructura análoga al ácido succínico o al ácido glutárico proporcionó más estabilidad y reforzó las propiedades inhibidoras en la enzima de conversión de la angiotensina.
&; L05 >/0+0305 5*+ 06/1303 90/0 J6- +* -9*.-+ -+ - 51.1* 3*+3- 5*+ 00+*5 J6- .1-+-+ 6+ ,*89*/.081-+.* 51810/ 0 3- 05 >/0+0305 D- --89*5; R )ste tipo de enzima recibe el nombre de zimógeno, este es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna reacción como hacen las enzimas. ;ara activarse, necesita de un cambio bioquímico en su estructura que le lleve a conformar un centro activo donde pueda realizar la catálisis. )n ese momento, el zimógeno pasa a ser una enzima activa. )l cambio bioquímico suele ocurrir en un lisosoma, donde una parte específica de la enzima precursora se escinde del resto para activarla. La cadena de aminoácidos que se libera por la activación se llama péptido de activación. Los zimógenos son utilizados en muchas reacciones biológicas, como en la digestión o en la coagulación sanguínea. 5on un brillante e&emplo de regulación endógena de las enzimas, de cómo controlar su función. Las modificaciones que sufren los zimógenos son irreversibles, por lo que para poder detener las reacciones que llevan a cabo es necesario un inhibidor de la enzima a la que dan lugar. *abe destacar el e&emplo del tripsinógeno #zimógeno$, que da lugar a la tripsina #enzima$, que a su vez activa otros zimógenos. ;ara poder detener la activación de los zimógenos, la tripsina no se puede volver a convertir en tripsinógeno, sino que debe secretarse un inhibidor de la tripsina para detener su acción.
; P*/ J6 ,0/-,- 3- 189*/.0+,10 0 19050 >5./1,0 -+ *5 9/*,-5*5 31>-5.1@*5 3- -5.280>* 3- *5 036.*5 = -+ ,08<1* -5 189*/.0+.- -+ - -5.280>* 1+0+.1 R )n la semana 7E de gestación se habrán desarrollado glándulas gástricas, un esbozo del píloro y el fundus, para la semana -8 el estómago tiene se>ales de motilidad y secreción.
)n el estómago distinguiremos cuatro capas3 • • • •
;eritoneo o capa sensoria *apa muscular que contiene te&idos longitudinales, circulares y oblicuos. *apa submucosa. *apa mucosa propiamente dicha.
)stas capas segregan3 líquidos gástricos, como el ácido clorhídrico #*l$, pepsina, lipasa gástrica, gastrina, factor intrínseco, resina y moco. La lipasa gástrica, es para la disgregación y digestión de las grasas, este proceso se efect%a través de la lipasa sublingual, la enteraza pregástrica y la lipasa gástrica propiamente, son glicoproteínas de ba&o ;, muy ba&o, que inhiben las sales biliares con autonomía de la acción colipasica pero de alta acción sobre los triglicéridos en la grasa Láctea. ;or el hecho de la lipasa ser la enzima que degrada las grasas para obtener nutrientes, en la etapa de vida para el ni>o es lo más primordial la cual lo lleva a la adaptación de una nueva forma de nutrición.
4; C6 -5 0 189*/.0+,10 831,0 3- 05 -+71805 D- 9*/ * 8-+*5 6+ --89* ,*+,/-.*; R 5in enzimas, no sería posible la vida que conocemos. Jgual que la biocatálisis que regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiológicos, las enzimas llevan a cabo funciones definitivas relacionadas con salud y la enfermedad. )n tanto que, en la salud todos los procesos fisiológicos ocurren de una manera ordenada y se conserva la homeostasis, durante los estados patológicos, esta %ltima puede ser perturbada de manera profunda. ;or e&emplo, el da>o tisular grave que caracteriza a la cirrosis hepática puede deteriorar de manera notable la propiedad de las células para producir enzimas que catalizan procesos metabólicos claves como la síntesis de urea. La incapacidad celular para convertir el amoniaco tó+ico a urea no tó+ica es seguida por into+icación con amoniaco y por ultimo coma hepático. 6n con&unto de enfermedades genéticas raras, pero con frecuencia debilitantes y a menudo mortales, proporciona otros e&emplos dramáticos de las drásticas consecuencias fisiológicas que pueden seguir al deterioro de la actividad enzimática, inclusive de una sola enzima. 4espués del da>o tisular grave #por e&emplo, infarto del miocardio o pulmonar, trituración de un miembro$ o siguiendo a multiplicación celular descontrolada #por e&emplo, carcionoma prostático$, las enzimas propias de te&idos
específicos pasan a la sangre. ;or lo tanto, la determinación de estas enzimas intracelulares en el suero sanguíneo proporciona a los médicos información valiosa para el diagnóstico y el pronóstico.
); D-1+0 J6- 5*+: Z182>-+*5% I5*71805% I+1<13*/-5 0 ,*89-.1.1@*5
I+1<1,12+ 9*/ +* ,*89-.-+,10: *uando las sustancias inhibidoras act%an independientemente de la calidad del sustrato natural presente, se trata de inhibición por no competencia. )n este caso, el inhibidor bloquea loas sitios activos de la enzima de modo irreversible( en ocasiones se trata de la desnaturalización de la enzima, como cuando se a>aden aniones o cationes que precipitan las proteínas. )n otros casos la combinación irreversible se hace con sustancias que act%an de manera específica sobre ciertos grupos activos de la enzima, o sobre la conformación o estructura completa de ella ( sin embargo, en estas circunstancias, se ven afectadas por igual todos o cuando menos varios tipos de enzimas. )+isten algunos inhibidores no competitivos que muestran cierta especificidad, como los agentes bloqueadores del radical sulfhídrico, '5, presente en las cadenas laterales del aminoácido cisteína, com%n a todas las moléculas proteínicas y, por lo tanto, a las enzimas.
L*5 7182>-+*5: 5on proteínas precursoras sin actividad enzimática, su activación es un proceso catalizado por encimas promoviendo la hidrólisis de uno o más enlaces peptídicos específicos en el zimógeno. Muchos procesos biológicos están regulados por esta ruptura proteolítica como la digestión o la coagulación sanguínea. La síntesis de los zimógenos en forma inactiva permite almacenarlos de forma segura hasta que son requeridos y evitar así que las proteínas e&erzan una actividad peligrosa en un lugar y momento equivocado.
I5*71805 * I5*-+71805: 5on proteínas con diferente estructura pero que catalizan la misma reacción. *on frecuencia, las isoenzimas son oligomeros de diferentes cadenas peptidicas, y usualmente difieren en los mecanismos de regulación y en las características cinéticas. 4esde el punto de vista fisiológico, la e+istencia de isoenzimas permite que haya enzimas similares con diferentes características, personalizadas de acuerdo a los requerimientos específicos del te&ido o a determinadas condiciones metabólicas.
6n e&emplo de las venta&as que ofrecen las isoenzimas al permitir un a&uste fino del metabolismo, en diferentes condiciones metabólicas.
; Q6 31-/-+,105 0= -+./- 1+1<13*/-5 */>+1,*5 - 1+*/>+1,*5 R Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. "sí mismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. " diferencia de los catalizadores inorgánicos, que catalizan reacciones específicas.
'; Q6 6+,12+ ,689-+ 05 @1.081+05 13/*5*6<-5 -+ 05 /-0,,1*+-5 ,0.0170305 9*/ E+71805 R V1.081+05 13/*5*6<-5: 5on de naturaleza polar y por lo tanto solubles en agua, su e+ceso no resulta to+ico ya que se eliminan por la orina. "ct%an como coenzimas o forman parte de ellos. 5e convierten en el organismo en cofactores de enzimas #grupos prostéticos o coenzimas$ del metabolismo. *omo coenzimas act%an en las reacciones )nzimáticas como dadores o receptores de dichos grupos químicos( pueden intervenir en las reacciones de ó+ido reducción o intervienen en reacciones de transferencia de grupos químicos.
; E91J6- ,28* 5- 30 - 9/*,-5* 3- /->60,12+ 3- 0 0,.1@1303 -+718.1,0 -+ - O/>0+158* R )n los humanos, la concentración del sustrato depende en la fuente de comida y usualmente no es un mecanismo fisiológico importante para la regulación de rutina de la actividad )nzimática. ;or otro lado, la concentración de la enzima es modulada continuamente en respuesta a las necesidades fisiológicas. La síntesis y degradación de las enzimas son mecanismos relativamente lentos para regular la concentración de las enzimas, con respuesta de horas, días o aun semanas. La activación de pro enzimas es un método más rápido para incrementar la actividad )nzimática pero, como mecanismo regulador, tiene la desventa&a de no ser un proceso reversible. Feneralmente las proenzimas se sintetizan en abundancia, se almacenan en gránulos secretorios y se activan covalentemente luego de que han sido liberadas de su sitio de almacenamiento. "lgunos e&emplos de
proenzimas importantes son el pepsinógeno, tripsinógeno, y quimiotripsinógeno, que dan origen a enzimas proteolíticas digestivas. 4e manera similar, muchas de las proteínas involucradas en la cascada de la coagulación se sintetizan como pro enzimas. tras proteínas importantes, como las hormonas peptídicas y el colágeno, también se derivan por modificaciones covalentes de sus precursores. tro mecanismo para regular la actividad )nzimática es secuestrar las enzimas en compartimientos en donde el acceso a sus sustratos es limitado. ;or e&emplo, la proteólisis de proteínas celulares y de los glicolípidos por las enzimas responsables de su degradación se controla secuestrando a estas enzimas dentro de los lisosomas.
CONCLUSI$N )sta práctica también nos ense>a que la temperatura también es importante a la hora de realizar esta práctica, ya que es un factor esencial para las distintas reacciones realizadas, por e&emplo es diferente este proceso en temperatura alta, en temperatura ba&a y a temperatura ambiente, es por ello que se debe tener buen observación cuando realizamos este tipo de prácticas, que nos servirán en un ma>ana no muy le&ano y que será muy satisfactorio repetirlos en este camino que estamos cruzando como futuros docentes. 5e puede decir que después de los análisis realizados )n condiciones corporales, la catalasa es me&or catalizador de la descomposición de peró+ido de hidrogeno en agua y o+igeno que el dió+ido de carbono. Las variaciones en la temperaturas afectan la actividad catalítica de una enzima, si supera la temperatura optima de la enzima esta perderá su función como catalizadora. )l dió+ido de manganeso no se ve afectado por las variaciones de la temperatura debido a que es un catalizador inorgánico. )l cianuro de potasio es un inhibidor de la acción catalítica de la catalasa debido a que en presencia de este su actividad enzimática tiende a desaparecer.
RE!ERENCIAS WEB ..9:;-6;-65<1*8*-,605-+71805-+7&&;.8 ..9:-5;119-310;*/>11I+1<13*/3-0-+7180,*+@-/.13*/03-0+>1*.+51+0 ..9:;-5091-+5;*/>-51-"(''((Z18CB>-+*5E590 CB"*? ..9:;.1/5*-//*;*/>,1-+,105930(-+71805;93 ..9:.-8-31,0<1*,-815./=90>-;*/>-5-+7=8-#1+-.1,5#59;99X/->60.1*+
PRACTICA DE LABORATORIO N° ) VITAMINAS Y MINERALES
BIOQUÍMICA
PRESENTADO POR: ISA KATHERINE POLO ARIAS WENDY VANESSA RIOS MORALES YOEMIS TORDECILLA ARRIETA ANDRÉS MAURICIO ALEMÁN MEDRANO HAN !REDY ABAD EVIS RAQUEL DURANDO PRESENTADO A: AMELIA ESPITIA ARRIETA GRUPO " B MONTERÍA# NOCHE VI SEMESTRE
UNIVERSIDAD DE C$RDOBA !ACULTAD DE EDUCACI$N Y CIENCIAS HUMANAS DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACI$N AMBIENTAL MONTERÍA% MARZO &' DE &(")
INTRODUCCI$N
OBETIVOS
• • •
5eparar algunos constituyentes de la leche Jdentificar la presencia de vitaminas y minerales en la leche econocer la vitamina " presente en la mantequilla.
TEORIA RELACIONADA
MATERIALES;
• • • • • • • •
• • •
/aso de precipitados de E88ml ;robeta de B8ml )rlenmeyer de 788ml ;ipetas de B y 78ml "gitador de vidrio Gubos de ensayo #B$ Fradilla )mbudo de vidrio aminonaftolsulfonico. )spátula /itamina " #traer$ Leche #traer$
Ncido acético al 78A 0*L Oerrocianuro de potasio al 7A !a al 78A "lcohol isobutilico +alato de amonio al EA "cido molibdico #5L6*JP!$ "cido 7, -,E *loroformo.
PROCEDIMIENTO;
"#PRECIPITACIN DE LA CASEINA: )n un vaso de precipitado de E88ml( agregar B8ml de leche y B8ml de agua destilada, a>adir con una pipeta gota a gota y con agitación constante ácido acético al 78A hasta la formación de un precipitado floc%lenlo de caseína. 4e&ar decantar y filtrar sobre gasa( descartar la caseína que no es de interés en la presente practica y conservar el filtrado para las posteriores pruebas cualitativas de vitamina C7# tiamina$ y minerales.
&# VITAMINA B
1.
/ierta -.Bml de filtrado en un tubo de centrifuga( a>ada una peque>a cantidad de 0*l, y 8.Bml de ferrocianuro de potasio al 7A y 7ml de !a al 78A, mezcle y disuelva totalmente el 0*l. "gregar -.Bml de alcohol isobutilico, agitar cuidadosamente por - min y centrifugar por B min a -888 rpm. La formación de precipitado indica la presencia de vitamina B 1
# CALCIO " 8.B ml de filtrado adicionar unas gotas de solución de o+alato de amonio al EA. bservar el precipitado que se forma.# de&ar reposar 78min$
4# !OS!ATOS " 8.B ml de filtrado adicionar 8.Bml de acido molibdico y 8.Bml de acido 7, -, E, aminonaftolsulfonico. bserve la coloración obtenida.
)# VITAMINA A
)n un tubo de ensayo( disolver una capsula de vitamina " de 7886, luego se disuelve en 7ml de cloroformo y adicionar B gotas del reactivo de *arr';rice. )n presencia de vitamina ", se produce un intenso color azul que desaparece al poco tiempo.
ANALISIS La primera prueba realiza con leche y agua al realizar los ensayos con las diferentes sustancias se procede a empezar por el ensayo - puesto que la prueba 7 se encontró lista La leche disuelta con agua fue filtrada y utilizada para las diferentes pruebas. ;ruebas realizadas3
C0,1* !*50.* V1.081+0 B" NOTA: E %ltimo ensayo de la observación de la vitamina " no fue realizada. V1.081+05: S65./0.* 3- ,0,1* Á,13* 8*1<31,* O00.* 3- 08*+1* A,13* ;&;4 081+* +6*566+1,* P*.051* -//*,10+6/* ENSAYOS "; V1.081+0 B": Las partículas halladas en el precipitado corresponden a la vitamina C7 después de observar la partícula en la muestra se procede a llevar a centrifugar por B minutos.
&; 5e forma el o+alato de calcio al agregar o+alato de amonio y calcio, este es insoluble en gua y es uno de los principales causantes de cálculos renales. ; !*50.*5: 5e tornó de un color marrón turbio.
4; V1.081+0 A:
!o fue realizada pero seg%n los análisis realizados por medio de investigaciones esta despues de agregar la capsula de vitamina " en el tubo de ensayo y disuelta con 7ml de cloroformo y adicionar B gotas del reactivo de *arr';rice se torna con un color azul que al poco tiempo desaparece.
PREGUNTAS:
"# Q*uál es el fundamento químico de los procedimientos desarrollados en la prácticaR
&# QSué importancia presenta la vitamina a, la tiamina, el calcio y los fosfatos en mamíferosR
CONCLUSI$N
RE!ERENCIAS WEB
PRACTICA DE LABORATORIO N° ALGUNAS PROPIEDADES !ÍSICAS Y QUÍMICAS DE LOS LÍPIDOS5
BIOQUÍMICA
PRESENTADO POR: ISA KATHERINE POLO ARIAS WENDY VANESSA RIOS MORALES YOEMIS TORDECILLA ARRIETA ANDRÉS MAURICIO ALEMÁN MEDRANO HAN !REDY ABAD EVIS RAQUEL DURANDO PRESENTADO A: AMELIA ESPI13TIA ARRIETA GRUPO " B MONTERÍA# NOCHE VI SEMESTRE
UNIVERSIDAD DE C$RDOBA !ACULTAD DE EDUCACI$N Y CIENCIAS HUMANAS DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACI$N AMBIENTAL
MONTERÍA% MARZO &' DE &(") INTRODUCCI$N
OBETIVOS
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4eterminar la solubilidad de los lípidos en solventes orgánicos. ealizar la reacción de saponificación y determinar algunas propiedades de los &abones. *omparar el grado de instauración de algunos lípidos.
MARCO TEORICO
MATERIALES
REACTIVOS
78 tubos de ensayo )tanol al TBA
- gradillas *loroformo
;ipetas de B y 78 ml Uter etílico
*alentador Cenceno
*apsula de porcelana *loruro de calcio #B8gVL$
7 vaso de -B8 ml *loruro de magnesio #B8gVL$
;inza para tubo de ensayo "cetato de ;lomo #B8 gVL$
;inza para crisol *loruro de sodio
)spátula 5olución de yodo
Fotero "cetona
)scamas de &abón #traer de la casa$
"cido sulf%rico concentrado
"ceite vegetal #traer de la casa$
idró+ido de sodio al 78A
"cido esteárico. "cido oleico
PROCEDIMIENTO "; S*6<11303
!umere : tubos de ensayo y coloque en cada uno - ml de aceite vegetal, luego agregue a cada tubo de manera diferente, 7 ml de cada una de las siguientes sustancias3 "gua destilada, etanol, etanol caliente, benceno, cloroformo, éter etílico y acetona. "gite cada tubo. 4e&e en la gradilla por - min y observe los resultados. a$ Q*uáles son los me&ores disolventes para las grasasR b$ Q*uáles no disuelven las grasasR c$ Q*ómo e+plican ustedes los resultadosR
&; E86511,0,12+ )n dos tubos de ensayo coloque - ml de aceite vegetal. ">ada a cada uno - ml de agua destilada. " una de los tubos agregue algunas escamas de &abón. "gite bien ambos tubos. bserve lo que ocurre. a$ Q*ómo se denomina la mezcla formadaR b$ Q*ómo está constituida dicha mezclaR 4e&e los tubos en reposo en la gradilla y obsérvelos varias veces durante quince minutos. c$ Q*ómo es la estabilidad de las mezclas en los dos tubosR d$ Q)+plique los resultadosR https3VVes.scribd.comVdocV7?:W7-8T?V;;J)4"4)5'OJ5J*"5'X'S6JMJ*"5'4)'L5' LJ;J45
; S09*+11,0,12+ )n una capsula de porcelana coloque unos -8 ml de agua y sométalos a ebullición #mantenga el volumen constante$. *uando estén hirviendo a>ada 7 ml de ácido oleico. "gregue ahora cuidadosamente y gota a agota una solución de !a al 78A, hasta que el medio sea claro. Genga cuidado de no a>adir un e+ceso de álcali. a$ )n que consiste la solución formadaR b$ )scriba la reacción química que ocurreR !umere ahora cinco tubos de ensayo y coloque en cada uno dos ml de la solución anterior realizando las siguientes pruebas3 GuboY7. sature la solución con !a*l. GuboY-. "gregue cinco gotas de ácido sulf%rico concentrado. GuboY@. "gregue cinco gotas de solución de cloruro de calcio. GuboYE. "gregue cinco gotas de solución de cloruro de magnesio. GuboYB3 "gregue cinco gotas de solución de acetato de plomo. bserve y anote los resultados. )+plique lo que ocurre en cada caso. )+plique las reacciones químicas correspondientes.
4; I+50.6/0,12+; Gome @ tubos de ensayo y agregue( 7ml de aceite vegetal al primero, 7ml de ácido oleico al segundo y una peque>a cantidad de ácido esteárico al tercero. "dicione a cada tubo - ml de cloroformo y agite bien, de&e - ml de cloroformo en otro tubo como control. "gregue solución de yodo gota agota a cada uno de los E tubos, agitando después de cada adición. La solución de yodo decolora si hay ácidos grasos insaturados. *ontinué agregando #má+imo 7B gotas$, hasta que el color del yodo sea estable. a$ Qcuantas gotas de solución de yodo se necesitaron en cada tubo para que el color permaneciera estableR b$ Q)+plique los resultados obtenidosR c$ )scriba la reacción química general de lo ocurrido. d$ *onsultar teoría relacionada de lípidos.
ANALISIS
CUESTIONARIO 7. QSué tipo de compuesto químico es el &abónR -. QSué diferencia hay entre &abones y detergentes sintéticosR @. QSué producto se prefiere generalmente en el traba&o de lavandería doméstica, un detergente sintético o un &abón Qpor quéR E. Q)+plique con sus propias palabras y por medio de un dibu&o como un detergente puede desprender las manchas de aceite y grasa de las telasR B. Sue son detergentes biodegradables y no degradablesR ?. )+plique estructuralmente y con sus propias palabras por que los aceites vegetales son líquidos a temperatura ambiente y las grasas son sólidasR :. Q*uáles son los ácidos grasos presentes en la mantequilla, margarina, y aceites vegetalesR W. )+plique Qqué relación hay entre los ácidos grasos omega @ y la enfermedad cardiacaR T. Q*uál es el nombre del esteroide que se presenta como un detergente en el cuerpo humanoR
CONCLUSI$N
RE!ERENCIAS WEB
