makmal hematologi

MAKMAL HEMATOLOGI PENGENALAN Makmal Hematologi di Hospital Nukleus Labuan menjalankan beberapa jenis ujian iaitu ujian Full Blood Count (FBC), ujian Prothrombin Time (PT), ujian Partial Thrombopastin Time (PTT), ujian Eritrosit Sedimen Retikulosit (ESR), ujian Pencelupan Vital Supra (RETIC COUNT, ujian penyedian Filem Darah Nipis (FDN), dan ujian G6PD.

Ujian FBC dijalankan bagi

mengesan jumlah sel darah merah dan sel darah putih serta platelet samada dalam julat normal ataupun abnormal. ujian PT, PTT dijalankan bagi mengesan untuk memastikan samada pesakit tersebut mempunyai haemostasis yang normal ataupun abnormal. Disamping itu, terdapat beberapa ujian lain yang dilakukan di dalam Makmal Hematologi salah satunya adalah ujian G6PD. Ujian G6PD dilakukan biasanya pada bayi yang baru lahir. Terdapat juga ujian D–Dimer yang dilakukan dalam Makmal Hematologi, iaitu merupakan ujian khas dan hanya dilakukan oleh kaki tangan makmal sahaja. Dalam Makmal ini mempunyai dua kaunter penerimaan spesimen iaitu kaunter luar terutamanya untuk pesakit luar seperti KP1 (Klinik Pakar 1), KP2 (Klinik Pakar 2) dan KP3 (Klinik Pakar 3). Manakala kaunter dalam penerimaan spesimen dari semua wad yang berada dalam Hospital ini dan penerimaan spesimen dari OPD (Out Patent Department).

MAKMAL HEMATOLOGI

Raja Saidatul Nadia PSKH (Kimia Hayat) C41

Aisah Bt. Diman JTMP U32

Muklis @ Bob b. Taim JTMP U32

Ivy Emily John JTMP U29

Tajuk Ujian : Ujian Full Blood Count (FBC). FBC adalah sel-sel yang beredar dalam aliran darah pada amnya terbahagi kepada tiga jenis iaitu sel-sel-sel darah putih (Leukosit), sel-sel darah merah (Eritrosit), dan platelet (Trombosit). Pengiraan yang yang tinggi atau rendah mungkin menunjukkan kehadiran pelbagai bentuk penyakit, dan seterusnya pengiraan jumlah darah adalah yang paling kerap dilakukan dalam bidang perubatabn, kerana pengiraan jumlah darah ini dapat menggambarkan keseluruhan status kesihatan am pesakit.

Bahan dan radas: I.

Mesin analyzer CELL – DYN Ruby

Reagen : I.

WBC lyse

II.

HGB lyse

III.

Diluent/sheath

Sampel : I.

Sel darah merah

Prinsip : SEL – DYN Ruby merupakan sistem penganalisa dalam makmal hematologi yang mempunyai pelbagai parameter automatik yang direka khas untuk mendiagnos sel secara klinikal di dalam makmal yang digunakan secara in vitro. Instrumen ini menggunakan teknologi MAPSS (Multi – Angle Polarized Scatter Separation) untuk mendiagnos, menganalisis, mengira dan membezakan sel – sel (sel darah putih, sel darah merah dan platelet) pada sampel darah pesakit. Selain itu, instrumen ini menggunakan laser dan memancarkan cahaya optik untuk menganalis tanpa memerlukan refleks kepada mod ujian yang lain. Tahap hemoglobin akan ditentukan dengan kaedah kolorimetri dan pembilangan sel – sel adalah tertakluk kepada saiz dan ukuran setiap sel darah pesakit.

Kaedah ujian : I.

Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.

II.

Sampel yang diterima mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap pada borang dan tiub sampel.

III.

Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan kepada wad atau klinik berkenaan.

IV.

Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan pendaftaran pesakit serta pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.

V.

Bagi ujian FBC, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.

Prosedur : I.

Sampel yang diterima akan disebatikan dengan menggunakan mesin „mixer‟ sebelum ujian dijalankan.

II.

Nama dan kad pengenalan pesakit akan ditaip pada skrin mesin.

III.

Letakan tiub yang mengandungi spesimen darah menyentuh „ probe‟.

IV.

Tekan panel dibelakang „ probe „ untuk memulakan sedutan spesimen.

V.

Biarkan spesimen disedut sehingga „probe‟ naik keatas yang menandakan proses sedutan telah tamat.

VI.

Letakan spesimen di rak yang disediakan.

VII.

Spesimen tadi akan melalui proses pencairan dan pengiraan sel- sel darah putih, sel darah merah dan platelet.

VIII.

Setelah pengiraan selesai keputusan akan keluar di skrin dan direkod dalam borang permintaan ujian.

IX.

Keputusan akan dikaji, sekiranya memuaskan laporan akan direkod dan dikeluarkan. Tetapi jika keputusan tidak memuaskan, ujian akan diulangi.

Interpretasi ujian :

Julat Normal Total White Blood Cell ( TWBC)

Dewasa

4.00 – 11.0 x 10 9/L

Bayi

10.00 – 26.0 x 10 9/ L

Kanak – kanak 1tahun Haemoglobin ( HB%)

Lelaki

13.5 – 18.0 g/dl

Perempuan

11.5 – 16.5 g/ dl

Bayi ( darah tali pusat )

13.6 – 19.6 g/dl

Bayi kurang 3 bulan

9.5 – 12. 5 g/dl

Budak 1 tahun

11.0 – 13.0 g/dl

Budak 10 – 12 tahun

11.5 – 14.8 g/dl

Packed cell Volume ( PVC )

37.7 – 53.7

Total Red Blood Cell ( TRBC )

4.06 – 4.69

Mean Cell Volume ( MCV )

81.1 – 96.0

Mean Cell Haemoglobin ( MCH)

27.0 – 31.2 picogram

Mean Cell Haemoglobin Concentration ( MCHC )

31.8 – 35.4

Neutrofil (NEU)

39.3 – 73.7 %

Lymposyte (LYM)

18.0 – 48.3 %

Monosyte (MONO)

4.40 – 12.7 %

Eosinofilik (EOS)

0.600 – 7.30 %

Basofilik (BASO)

0.00 – 1.70 %

Tajuk Ujian : Ujian Prothombine Time (PT) Ujian PT dijalankan bersama- sama dengan ujian PTT bagi mengesan pesakit tersebut telah mengalami pendarahan atau lebam yang tidak dapat dijelaskan,tromboemlism,keadaan akut seperti pembekuan sebagai faktor yang digunakan pada kadar normal yang atau dengan keadaan yang kronik seperti penyakit hati. Apabila seseorang mempunyai kes trombotik atau keguguran labih dari satu kali,PTT merupakan sebahagian daripada penilaian untuk antikoagulan pecah atau antikardiolipin antibodi.

Bahan dan Alat Radas : I.

Kuvet

II.

Bering

III.

Mikropipet

IV.

Finnipipette

Reagen : I.

Neoplastine

Sampel : II.

Serum

Prinsip : Prinsip ujian ini terdiri daripada penggunaan Tromboplastin kalsium untuk mengukur masa pembekuan plasma atau serum pesakit dan untuk membandingkan dengan julat normal. Secara keseluruhannya, aktiviti pembekuan faktor II (protrombin), faktor V (proaccelerin), faktor VII (proconvertin), faktor X (stuart faktor) dan faktor I (fibrinogen).

Kaedah Ujian : I.

Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.

II.

Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.

III.

Bagi ujian PT dan PTT, sampel yang diterima mestilah didalam tiub yang bewarna biru kerana tiub ini mengandungi antikoagulan sodium sitrat.

IV.

Setelah itu, sampel yang diterima mestilah diempar terlebih dahulu untuk memisahkan sel darah merah dengan serum.

V.

Sampel disimpan pada rak berdekatan dengan mesin incubate PT dan PTT.

VI.

Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang lengkap.

VII.

Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.

Prosedur : I.

Masukkan baring di dalam kuvet dan di simpan pada incubate.

II.

50ul plasma atau serum di masukkan ke dalam kuvet tadi.

III.

Tekan „1‟ „test mode‟ dan tekan (

IV.

Tekan „1‟ untuk ujian PT dan tekan (

V.

Tekan „1‟ untuk kedudukan kuvet pada incubate dan tekan (

VI.

Incubate dilakukan selama 60 saat.

VII.

Kuvet tadi di pindahkan setelah berbunyi dan finnpipette – positif „4‟, Neoplastine Cl plus

). ). ) sebanyak dua kali.

„100ul‟ di masukkan kedalam kuvet tadi. VIII. IX.

Tekan (

) untuk incubate.

Tunggu sehingga result keluar dan rekod.

Interpretasi ujian :

Julat Normal Prothrombin Time

11.5 – 14.5 sec

Tajuk Ujian : Ujian Partial Thrombopastin Time (PTT) Ujian Partial Thrombopastin Time (PTT) adalah ujian darah yang dijalankan pada beberapa masa diambil untuk darah membeku. Ia boleh membantu mengesan jika pesakit mempunyai masalah pendarahan atau pembekuan.

Bahan dan Alat Radas :

I.

Kuvet

II.

Bering

III.

Mikropipet

IV.

Finnipipette

Reagen : I.

CK Prest

II.

CaCl2

Sampel : I.

Serum

Prinsip : Ujian Partial Thrombopastin Time melibatkan recalcification plasma dalam kehadiran jumlah cephalin yang standad (pengantian platelet) dan faktor XII pengaktif (kaolin). Ujian PTT melibatkan laluan pembekuan intrinsik (faktor XII, XI, IX, VIII, X, V, II dan I) kecuali platelet. Kaedah Ujian : I.

Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.

II.

Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.

III.

Bagi ujian PT dan PTT, sampel yang diterima mestilah didalam tiub yang bewarna biru kerana tiub ini mengandungi antikoagulan sodium sitrat.

IV.

Setelah itu, sampel yang diterima mestilah diempar terlebih dahulu untuk memisahkan sel darah merah dengan serum.

V.

Sampel disimpan pada rak berdekatan dengan mesin incubate PT dan PTT.

VI.

Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang lengkap.

VII.

Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.

Prosedur : I.

Masukkan baring di dalam kuvet dan di simpan pada incubate.

II.

50ul plasma atau serum di masukkan ke dalam kuvet tadi.

III.

Masukkan CK prest „50ul‟ pada kuvet tadi.

IV.

Tekan „1‟ “test mode” dan tekan (

).

V.

Tekan „2‟ untuk ujian APTT dan tekan (

VI.

Tekan „1‟ untuk kedudukan kuvet pada incubate dan tekan (

VII.

Incubate dilakukan selama 180 saat.

VIII.

Kuvet tadi di pindahkan apabila berbunyi dan finnpipette – positif „2‟, CaCl2 0.025 „50ul‟

). ) sebanyak dua kali.

di masukkan ke dalam kuvet tadi. IX.

Tekan (

) untuk incubate.

X.

Tunggu sehingga result keluar dan rekod.

Interpretasi ujian :

Julat Normal Partial Thromboplastine Time

28.0 – 45.0 sec

Tajuk Ujian : Eritrosit Sedimen Rate (ESR), Kadar Pemendapan Eritrosit. ESR berdiri untuk kadar pemendapan eritrosit. Ia juga dikenali sebagai „kadar sed‟. Ia adalah ujian yagn secara tidak langsung mengukur berapa banyak keradangan ada di dalam badan. Bahan dan Alat Radas : I.

Tiub Westergent

II.

Mesin ESR

Sampel : I.

Sel Darah Merah

Prinsip : Kadar pemendapan eritrosit (ESR), ialah kadar di mana sel – sel darah merah mendap dalam tempoh 1 jam. Ia adalah ujian hematologi umum dan untuk menjalankan ujian, darah anticougulate diletakkan dalam tiub yang tegak, yang dikenali sebagai tiub Westergent dan kadar pemendapan sel – sel darah marah diukur dan dilaporkan dalam mm/h. Sejak di

perkenalkan penganalis automatik ke dalam makmal klinikal, ujian ESR telah dilakukan secara automatik. Kaedah Ujian : I.

Tekan „ON‟.

II.

Masukkan empat „SENSOR TEST CUVETTES‟.

III.

Tekan (

IV.

Tekan (RUN) sehingga „SENSOR TEST RUN‟ kelihatan.

V.

Tunggu sehingga „SENSOR TEST OK‟.

VI.

Tekan (

) tiga kali sehingga „SENSOR TEST‟ kelihatan.

) untuk sambungkan ujian.

Prosedur : I.

Pindahkan sampel darah ke dalam kuvate.

II.

Masukkan kuvate ke dalam „MINI VES‟.

III.

Tekan (

IV.

Tekan (RUN).

V.

Tekan (

) sehingga „WESTERGENT 1H‟kelihatan.

) untuk tengok result.

Interpretasi ujian :

Julat Normal Kaedah Westergen (ESR) :

mm/hr

Lelaki

:

0.15 mm/hr

Perempuan

:

0.20 mm/hr

Tajuk Ujian : Ujian Pencelupan Vital Supra (Reticulocyte Count). Ujian pengiraan jumlah retikulosit adalah ujian yang dijalankan apabila RBC yang menurun atau hemoglobin menurun dan hematokrit bagi mengesan fungsi sumsum tulang. Jika pengesanan yang kurang pasti,kaedah ini boleh memastikan lagi jika pesakit tersebut mempunyai keabnormalan pada sumsum tulang nya. Ujian ini juga dapat dijalankan andainya pesakit disyaki mempunyai gejala atau simptom seperti pucat,keletihan,kelemahan,sesak nafas atau

najis berdarah. Pengiraan retikulosit dilakukan bersama-sama dengan mengira 1 RBC, hematokrit, hemoglobin untuk memantau bagi fungsi sumsum dan tindakbalas kepada rawatan.

Bahan dan Alat Radas : I.

Tabung uji

II.

Maker

III.

Mikropipet

IV.

Incubater

V.

Slaid

VI.

Sisip kaca

VII.

Mikroskop

Reagen : I.

Larutan „Supra-Vitral‟

Sampel : I.

Sel Darah Merah

Prinsip : Reticulocyte adalah sel – sel darah merah muda yang mengandungi baki „basophilic ribonucleoprotin‟ dalam struktur nukleusnya. Bahan „Basophilic‟ ini akan bergantung dengan pewarna seperti Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue untuk membentuk mendapan biru yang berbintik – bintik atau berantai – rantai.

Kaedah Ujian : I.

Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.

II.

Sampel mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap pada borang dan tiub sampel.

III.

Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan kepada wad atau klinik berkenaan.

IV.

Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan pendaftaran dan pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.

V.

Bagi ujian Reticulocyte, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.

Prosedur : I.

1 tabung uji diambil dan dilabelkan nama pesakit atau nombor bagi pemohonan ujian yang banyak.

II.

50ml sampel darah dan 50ml reagen retic akan di pipetkan kedalam tabung uji tadi.

III.

Sebatikan tabung uji yang berisi sampel dan reagen tadi.

IV.

Masukkan kedalam incubater selama 30 minit.

V.

Buat smear, smear yang dibuat mestilah mengandungi ciri – ciri yang betul (mempunyai kepala, badan dan ekor).

VI.

Keringkan pada udara.

VII.

Lihat bawah mikroskop.

VIII.

Hasil keputusan akhir diambil dan direkodkan.

Interpretasi ujian : Julat Normal

Dewasa

: 0.2-2 %

Bayi

: 2.5-6 %

Tajuk Ujian : Ujian Penyediaan Filem Darah Nipis (PBF). Filem darah nipis biasanya dilakukan untuk menilai populasi sel darah apabila FBC mempunyai perbezaan yang dilakukan dengan pembilang sel darah secara automatic,menunjukkan kehadiran sel-sel abnormal atau belum matang. Ia juga boleh dilakukan apabila pesakit disyaki terdapat gangguan atau penyakit yang menjejaskan pengeluaran sel darah seperti anemia 1,berkurangan atau pengeluaran abnormal sel di dalam sumsum tulang serta pemusnahan sel peningkatan.

Bahan dan radas : I.

Slaid

II.

Sisip kaca

III.

Mikropipet

IV.

Mikroskop

Sampel : I.

Darah

Reagen : I.

Alkohol

Prinsip : PBF (Peripheral Blood Film) atau film daran nipis yang diwarnakan dengan pewarna tertentu dan diperiksan dibawah mikroskop. SDM normal digambarkan sebagai normochromic (warna yang normal) dan norocytic (saiz yang normal). Nilai MCV seolah – olah memberi pertunjuk kepada saiz SDM. Nilai MCV yang rendah selalu berhubungkait dengan saiz SDM yang lebih kecil daripada normal (microcytosis) sebaliknya nilai MCV yang tinggi berhubungkait dengan saiz SDM yang lebih besar (macrocytosis). SDP (Sel Darah Putuh) digamberkan sebagai „morphologically normal‟ pada individu yang sihat. Kehadiran sel – sel atypical lymphocytes, atypical mononuclear dan toxic granulation selalunya berhubungkait dengan infeksi. Impression yang diberikan adalah berdasarkan smear darah dan keputusan ujian darah yang lain.

Kaedah : I.

Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.

II.

Sampel mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap pada borang dan tiub sampel.

III.

Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan kepada wad atau klinik berkenaan.

IV.

Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan pendaftaran dan pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.

V.

Bagi ujian Filem Darah Nipis, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.

Prosedur : I.

Sampel yang mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap akan di ambil.

II.

Slaid dan sisip kaca di ambil dan sampel darah pesakit di ambil.

III.

Dengan menggunakan mikropipet, sampel darah di ambil dan dititiskan ke atas slaid.

IV.

Sisip kaca digunakan untuk membuat filem darah nipis.

V.

Filem darah nipis yang baik menggandungi kepala, badan dan ekor.

VI.

Smear di keringkan pada udara dan di fiksasi menggunakan alkohol.

VII.

Biarkan smear kering pada udara sebelum dilihat dibawah mikroskop.

VIII.

Keputusan yang dilihat akan diambil dan direkodkan ke dalam keputusan pesakit.

Interpretasi ujian : Julat normal

Peripheral Blood Film : 7.5 µm.

Tajuk Ujian : Ujian Glucose- 6 – phosphate – Dehydrogenase (G6PD). Ujian G6PD adalah yang dijalankan terhadap kanak-kanak yang mengalami jaundis berterusan sebagai bayi yang baru lahir yang tidak boleh dijelaskan oleh sebab lain. Ia juga boleh dilakukan terhadap pesakit yang telah mempunyai lebih dari satu kes yang tidak dapat dipastikan anemia hemolitik. Pengulangan ujian G6PD adalah dilakukan mungkin sekali sekala bagi mengesahkan penemuan awal atau jika keputsan adalah normal dalam sebuah kes hemolisis. Bahan dan Alat Radas : I.

Tabung uji

II.

Penebuk kertas

III.

Kertas G6PD

IV.

Mikropipet

V.

Maker

VI.

Jam

Reagen : I.

Glucose – 6 – Phosphate Dehydrogenase (G6PD)

Sampel : I.

Darah

Prinsip : Haemolysate dieramkan bersama dengan glucose – 6 – phosphate sebagai substrate dan triphosphopyridine nuclestide (TPN) sebagai co – enzyme bersama-sama dengan Brilliant Cresyle Blue Dye. Pengurangan hydrogen daripada glucose – 6 – phosphate dari hasil adanya G6PD di dalam campuran tindakbalas dan melibatkan pengurangan TPN kepada TPNH. Dye yang dicampurkan di kurangkan kepada sebatian yang tidak berwarna yang sama anggaran banyaknya dengan TPNH yang didapati. Ketiadaan atau kekurangan enzyme akan melibatkan timbulnya warna itu.

Kaedah Ujian : I.

Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.

II.

Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.

III.

Bagi ujian G6PD, biasanya sampel diterima pada kertas kecil yang mempunyai darah pesakit dan di kelipkan sekali dengan borang pesakit.

IV.

Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang lengkap.

V.

Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.

Prosedur : I.

1 Tabung uji di ambil dan di labelkan bersesuaian dengan nama pesakit atau nombor bagi sampel yang banyak.

II.

Kertas yang mengandungi sampel darah pesakit di ambil dan ditebuk dan diletakkan di dalam tabung uji tadi.

III.

Reagen G6PD akan diletakkan kedalam tabung uji tadi sebanyak 50ml menggunakan mikropipet.

IV.

Jam akan digunakan untuk menetapkan masa selama 15 minit.

V.

Kertas G6PD diambil dan sampel tadi diletakkan ke atas kertas itu dan di keringkan.

VI.

Masukkan kertas itu kedalam kotak khas untuk ujian G6PD „sinaran UV‟ dan tekan suiz „ON‟ serta lihat keputusannya.

VII.

Hasil akhir keputusan akan di rekodkan.

Interpretasi ujian :

I.

G6PD NORMAL

II.

G6PD DEFICIENT

III.

G6PD INTERMEDIATE

LEISHMAN Pewarnaan Leishman Prinsip: Pewarnaan Leisman merupakan campuran Methylene Blue dan Eosin. Larutan pewarna Leishman mewarnakan filem darah dengan kandungan alkohol metilnya. Sebagai pewarna neutral dalam medium beralkohol, pewarna Leishman hanya menunjukkan tindak balas pewarnaan setelah ditambah larutan penimbal. Tujuan: Untuk menghasilkan tindak balas warna pada sel-sel darah yang terbahagi kepada tiga komponen utama : nukleus, sitoplasma dan granul. Prosedur:

1.

Letakkan filem darah nipis di atas rak, banjirkan slaid dengan pewarna Leishman dan biarkan selama 30 saat hingga 1 minit.

2.

Tambahkan 2 ml larutan penimbal pH 6.8 dan biarka selama 10 minit.

3.

Bersihkan slaid filem darah dengan air mengalir untuk membersihkan sisa metalik pada filem darah.

4.

Biarkan filem darah nipis kering.

Keputusan: Komponen sel

Warna

Nukleus

Ungu-merah jambu

Sitoplasma limfosit

Biru ke kelabu kebiruan

Granul neutrofil

Merah jambu keunguan

Granul eosinofil

Oren kemerahan

Granul basofil

Ungu gelap

Platelet

Keunguan

Eritrosit

Kemerahan